158336. lajstromszámú szabadalom • Eljárás (-) (cisz-1,2-epoxipropil)-foszfonsav előállítására mikrobiológiai úton
69 158336 70 A beoltott tápoldatot egy 250 ml-es terelőlapos Erlenmeyer-lombikban 28 C°-on 6—7 napig inkubáltuk körrázóberendezésben. A kapott fermentációs lével (2,5% oltóanyag ^alkalmazásával) beoltottunk tíz kétliteres terelőlapos Erlenmeyer-lombikot, amelyek mindegyikében az alábbi összetételű vizes tápoldat 350. ml-es részlete volt: Kazeinhidrolizátum i(N—Z amin) Húskivonat Nátriumklorid Szójaliszt Szeszgyári cefre Kukoricalekvár Dextróz K2 HP0 4 CaC03 * Desztillált víz * A kalciumkarbonátot a tápoldat pH-jának nátriumhidroxid oldattal 7,0 értékre való beállítása után adagoltuk. A kapott beoltott lombikokat 28 C°-on három napig inkubáltuk körrázóberendezésben, azután a fermentációs leveket egyesítettük, és a megszűrt lét Proteus vulgaris segítségével hatóanyag-vizsgálat alá vetettük. A szűrt lé végső pH értéke 6,6 volt, és 30 mm átmérőjű inhibiciós zónát mutatott. 10 2,5 g/liter 1,0 g/liter 5,0 g/liter 10 g/liter 2 g/liter 15 5 g/liter 20 g/liter 2 g/liter 10 g/liter az előírt térfogatig 20 25 30 Foszfátpuffer* Magnéziumszulfát Desztillált víz 2 ml 0,05 g/liter az előírt térfogatig * 91 g KH2 P0 4 és 95,0 g Na 2 HP0 4 desztillált vízben egy literre oldva. A beoltott tápoldatot egy 250 ml-es terelőlapos Erlenmeyer-lombikban 28 C°-on két napig inkubáltuk körrázóberendezésben. A kapott lét 1,5%-os adagban oltóanyagként használtuk fel két kétliteres terelőlapos Erlenmeyer-lombik beoltására, amelyek mindegyikében az alábbi tápoldat 350 ml-es részletét helyezzük el: Zabpehely Szójaliszt Nátriuméitrát • 2 HjO Szeszgyári sűrítmény CoCl2 -6 H 2 0 Desztillált víz 20 g/liter 15 g/liter 4,0 g/liter 5 g/liter 0,1 g/liter az előírt térfogatig E tápoldat pH értékét 6,5-re állítottuk be, és minden lombikba egyenként 0,5% Poliglikol 2000 szert adagoltunk. A beoltott lombikokat 28 C°-on 4 napig inkubáltuk körrázóberendezésben. A kapott leveket egyesítettük, szűrtük és hatóanyagvizsgálat alá vetettük. A szűrt fermentációs lé pH értéke 8,5 volt, és a Proteus vulgaris-szal végzett standard hatóanyag-vizsgálat során 34,6 mm átmérőjű inhihiciós zónát adott. 21. példa: A S. fradiae MA—2915 (NRRL-—3417) liofilezett kultúrájával beoltottuk a 19. példában leírt tápoldat 50 ml-es részletét. A beoltott tápoldatot tartalmazó 250 ml-es terelőlapos Erlenmeyerlombikot 28 C°-on inkubáltuk egy napon át körrázóberendezésben. A kapott fermentációs lével azután egy második oltási sorozatot oltottunk be ugyanolyan módon, mint az első sorozatot. Ennek a második sorozatbeli lének 2,5%os adagijaival oltottunk be tíz kétliteres terelőlapos Erlenmeyer-lombikot, amelyekben egyenként 350 ml tápoldat volt, amely literenként 20 g száraz előre megfőzött zablisztet és 20 g paradicsompürét tartalmazott. A beoltott lombikokat 28 C°-on három napig inkubáltuk körrázóberendezésben, majd a leveket lehűtöttük és hatóanyagvizsgálat alá vetettük. A szűrt lé pH értéke 6,3 volt, és a Proteus vulgaris-szal végzett standard hatóanyagtartalom-vizsgálat során 25 mm átmérőjű inhibiciós övezetet adott. Kukoricakeményítő Élesztöhidrolizátum 35 40 45 50 55 22. példa: A S. viridodhromogenes MA—2916 (NRRL— 3415) ferde kultúrájával beoltottuk az alábbi 60 összetételű vizes tápoldat 40 ml-es részletét: 23. példa: A S. viridochromogenes MA—2917 (NRRL— 3416) ferdeagaros kultúrájával beoltottuk az alábbi összetételű tápoldat 40 ml-es részletét: Kukoricakeményítő Élesztőhidrolizátum Foszfátpuffer* MgS04 Desztillált víz 10 g/liter 10 g/liter 2 ml 0,05 g/liter az előírt térfogatig * 91 g KH2 P0 4 és 95,0 g Na 2 HP0 4 desztillált vízben egy literre oldva. A beoltott tápoldatot 250 ml-es terelőlapos Erlenmeyer-lombikban 28 C°-on körrázóberendezésben inkubáltuk. A kapott fermentációs lét 3%-os adagban felhasználtuk egy 22 darab, 250 ml-es • terelőlapos Erlenmeyer-lombikból álló sorozat beoltására, amelyek mindegyike az alábbi összetételű tápoldat 30 ml-es részletét tartalmazta: 10 10 g/liter g/liter 65 Zabpehely Szój aliszt Nátriumcitrát • 2 Hz O Szeszgyári sűrítmény CoQ2 -6 H 2 0 Desztillált víz 20 g/liter 15 g/liter 4 g/liter 5 g/liter 0,1 g/liter az előírt térfogatig 35
