158224. lajstromszámú szabadalom • Eljárás mikrobiológiai úton előállított enzimek izolálására
MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL' SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1989. I. 30. (AE—284) Német Demokratikus Köztársaság-beli elsőbbsége: 1968. II. 02. (WP 6 a/129 971) Közzététel napja: 1970. VII. 24. Megjelent: 1971. V. 15, 158224 Nemzetközi osztályozás: C 07 g 7/028 '~-"'í: ty$ 1; '" n Feltalálok: Töpfer Horst oki. vegyész, Piesche Klaus oki. biológus, Dr. Schäfer Gerhardt oki. vegyész, Radebeul, Német Demokratikus Köztársaság Tulajdonos: VEB Arzneimittelwerk Dresden, Radebeul, Német Demokratikus Köztársaság Eljárás mikrobiológiai úton előállított enzimek izolálására A találmány tárgya eljárás enzimkonoentrátumok izolálására mikrobiológiai fermentációs oldatokból. Ismeretes, hogy számos mikroorganizmus a tenyésztés során a tenyésztőközegbe hidrolizáló 5 . enzimeket (hidrolázok) ad le. Ezek a hidrolázdk különféle proteineket (a ható enzimek: proteázok) poliszaéharidokat .(a ható enzimek: amilázok és oeUulázok) és zsírokat (a ható enzimek: lipázok) megbontani képesek. Ennek a ha- io tásnak eredményeképpen ezek az enzimek az emiber- és állatgyógyászatban, az élelmiszeriparban, a technikában, valamint a mezőgazdaságban sokoldalúan használhatók. így például a penészgombák fermentációs ol- 15 dataiból előállított enzimkoncentrátumok tabletta és drazsé alakjában emésztési zavarok kezelésére alkalmazhatók. A fenti területeken általában a nyers enzimkészítmények használhatók. 20 Ismeretes, hogy hidrolázkoneentrátumok fermentációs oldatokból pl. ammóniumszulfáttal, nátriumkloriddal és nátriurnszulífáttal végzett kisózással előállíthatók. A hidrolázokat, ame- 25 lyék kémiai összetételüket tekintve proteinek, a megfelelő só 20—100% telítettségi fokig való hozzáadásával kicsapj ák^ elkülönítik és a feleslegben levő sótól dialízissel vagy ioncserélővel végzett kezeléssel megtisztítják. 30 Ismeretes továbbá, hogy a hidrolázok mikrobiológiai tenyészetek szűr-léteiből vízzel elegyedő szerves oldószerek, pl. etanol vagy aceton hozzáadásával kicsaphatok. E célból a hatóanyagot tartalmazó oldatot 2—10-szeres térfogatú oldószerrel elegyítik, az így kicsapott nyers enzimet szerves oldószerrel mossák és szárazkészítménnyé feldolgozzák. Ugyancsak ismeretes, hogy proteinek, pl. enzimek taninnal vízben oldhatatlan komplexet képeznek, amelyből" a tannin-íkomponens főképpen aoetonnal történő eltávolítása után enzimkoncentrátum állítható elő. [Liebigs Annalen der Chemie. 430, 284 (1923); Arch. Biochem, New York, 7, 357 (1945); 629.416, 1224 255 sz. német és 2 452 000, 3147 196 és 3 256 157 sz. amerikai szabadalmi leírások.] Az enzimek biológiai fermentációs oldatokból kisózással történő kinyerése számos hátránnyal jár. Ez az eljárás üzemi méretekben végzett enzimtermelésnél a sóknalk túlságos nagymértékben való (felhasználása miatt nem gazdaságos. Számos esetben a tenyészetek szűrleteinek költséges töményítése nélkül a hatóanyag a csekély enzimkoncentráció miatt nem csapható ki. A kisózásnak további hátránya, hogy ennek alkalmazása esetén az enzimfconcentrátumban még jelenlevő sókat körülményes eljárásokkal, így dialízissel vágy ioncserélővel végzett kezeléssel kell eltávolítani. 158224
