158137. lajstromszámú szabadalom • Eljárás N-karboxi-anhidridek és azok származékainak előállítására

27 158137 28 folytatjuk, és a pH-t kénsavval 3-ra állítjuk be a dekarboxilezés lefolytatása céljából. A terméket nem különítjük el. E reakcióelegy pH-ját tömény káliumhidroxid hozzáadásával 10,2-re állítjuk be, és gyors keverés közben 3,6 millimól glicin-N-karboxi-anhidridet adunk hozzá, mialatt a hőmérsékletet kb. 3 C°-on, a pH-t pedig 2,5 n nátriumhidroxidoldat cséppenkénti hozzáadásával 10,0 és 10,2 közötti értéken tartjuk. A reakciót kb. két percen át folytatjuk, majd pH-t kénsavval 3,2-re állítjuk be, és így lefolytatjuk a dekarboxilezést. A reakcióelegyet hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni, majd kb. egy órán át állni hagyjuk és szűréssel tisztítjuk. A kívánt terméket úgy különítjük el, hogy a reakcióelegyet szénoszlopon vezetjük át. Az adszorbeált peptidet 5%-os vizes ecetsav-oldattal eluáljuk, majd az eluátumból fagyasztva szárítással nyerjük ki. 14. példa Tetrahidropiranil-tirozin-N-karboxi-anhidrid előállítása Összesen egy gram N-karboxi-tirozin-anhidridet felveszünk 60 mg p-toluolszulfonilkloridot tartalmazó 20 ml dihidropiránban, és a reakcióelegyet 48 órán át keverjük kb. 25 C° hőmérsékleten. Ez idő alatt az anhidrid legnagyobb része oldódott, ami azt jelzi, hogy a reakció lényegileg befejeződött. A reakcióelegyet 30 ml petroléter hozzáadásával hígítjuk, aminek hatására kicsapódik a kívánt termék. 15. példa Tetrahidropiranil-tirozin-N-karboxi-anhidrid előállítása Összesen egy gramm N-karboxi-tirozin-anhidridet és moláris ekvivalens mennyiségű dihidropiránt felveszünk 40 mg p-toluolszulfonsavat tartalmazó 20 ml dioxánban, és a reakcióelegyet., 10 órán át keverjük 35 C° hőmérsékleten. Ezután az oldatot csökkentett nyomáson felényi térfogatra betöményítjük, etilacetáttal feltöltjük az eredeti térfogatra, majd 0,25 g szilikagélt adunk hozzá. Ezután az elegyet szűrjük, felényi térfogatra betöményítjük, és petroléter hozzáadásával a kívánt terméket kicsapjuk. 16. példa Tetrahidropiranil-tirozin-N-karboxi-anhidrid előállítása Összesen egy gramm N-karboxi-tirozin-anhidridet és molárisán ekvivalens mennyiségű dihidropiránt felveszünk 60 mg p-toluolszulfonilkloridot tartalmazó 20 ml tetrahidrofuránban, majd a reakcióelegyet 60 órán át keverjük 20 C° hőmérsékleten. Ezután az oldatot csökkentett nyomáson felényi térfogatra betöményítjük, etilacetáttal az eredeti térfogatra töltjük fel, és 0,25 g szilikagélt adunk hozzá. Ezután a reakcióelegyet szűrjük, felényi térfogatra betöményítjük, és a kívánt terméket petroléter hozzáadásával kicsapjuk. Az alábbi vegyületeket hasonló módon állítjuk elő, azonban a tirozin-származékot ekvivalens mennyiségű alábbi kiindulási vegyülettel helyettesítjük : N-karboxi-3,5-dibrómtirozin-anhidrid, ill. N-karboxi-3,5-dijódtirozin-anhidrid; a kapott vegyületek tetrahidropiranil-3,5-dibróm-tirozin-N-karboxi-anhidrid és tetrahidropiranil-3,5-dijód-tirozin-N-karboxi-anhidrid. Ezután a reakcióelegyet extraháljuk 2X100 ml éterrel, a reagálatlan xantát eltávolítása végett. A vizes lúgos rétegre 100 ml etilacetátot rétegezünk, majd 73 ml 12 n sósav-oldatot és 70 ml vizet adunk hozzá. Az elegyet összerázzuk, és a szerves réteget elkülönítjük. A vizes réteget ismét extraháljuk 100 ml etilacetáttal,-és az egyesített szerves rétegeket kétszer mossuk 50—50 ml telített nátriumklorid-oldattal: A szerves réteget elkülönítjük, nátriumszulfát felett szárítjuk, majd csökkentett nyomáson betöményítjük. így kicsapjuk a kívánt metil-tionuretán-tirozint. Összesen 8 g metil-tionuretán-tirozint felveszünk 40 ml tetrahidrofuránban, és keverés közben hozzáadunk 6,1 ml foszfortribromidot, miközben a hőmérsékletet 0 C° és 5 C° közötti értéken tartjuk. A reakcióelegyet 200 ml 10%-os vizes nátriumhidrogénkarbonát-oldatba öntjük, és háromszor 100 ml etilacetáttal extraháljuk. Az egyesített szerves rétegeket kétszer 50 ml tömény nátriumklorid-oldattal mossuk, majd nátriumszulfát fölött szárítjuk. A kívánt N-tiokarboxi-tirozin-anhidridet úgy kapjuk meg, hogy az oldószert csökkentett nyomáson lehajtjuk. Az így előállított termékből 5,8 g-ot a 15. példa szerinti módon dihidropiránban alakítunk át a kívánt vegyületté. 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 2Q 17. példa Tetrahidropiranil-tirozin-N-tiokarboxi-anhidrid előállítása . Összesen 145 g tirozint felveszünk 75 ml olyan etanolban, amely 18 ml vizet tartalmaz, és amelyhez 68 ml 11,7 n káliumhidroxid-oldatot adunk. A reakcióelegyhez nitrogén-atmoszférában, keverés közben hozzáadunk 97,5 g metiletil-xantátot, miközben a hőmérsékletet hűtő-30 fürdő segítségével kb. 25—30 C°-on tartjuk. A reakciót ezen a hőmérsékleten folytatjuk két órán át, majd az elegyet 45 C°-ra melegítjük, és további 0,5 órán át keverjük. Az alkohol legnagyobb részét csökkentett nyomáson eltávolít-35 juk, majd 180 ml vizet adunk az elegyhez. 14