158004. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 2'-amino-2'-dezoxi-kanamicin előállítására

25 158004 26 a táptalajhoz 50 g 6-amino-glükióat adunk, és az inkubálást folytatjuk. A tenyészetben felhalmozódó 2'-amino-2'Hdieoxi-íkanamioin manynyiságe 145 óra elteltével maximumot ér el. A tenyészet (kezelését és a nyers por tisztítását az .1. példában megadott módon végezzük. 1,0 g kristályos 2'^aimino~2'-deoxi-kanamicint kapunk. 3. példa: 3,0% keményítőt, 2,5% szójabaiblisatet, 1,2% nátriumniitirátot és 0,35% nátiriumkloridot tartalmazó 15 liter folyékony táptalajt az 1. példában alkalmazott Sttreptomyces kanasmyoeíticus törzzsel oituinlk be, és 'keverés és levegőztetés köziben 28 C°-on inkubálijuk. 20 órás inkubálás után a táptalajhoz 30 g NK—1001 amtifoiötikumo:t adunk és az inkubálást folytatjuk;. A 2'namino-2-dieoxi-kaniamicin termelés az inkubálás kezdetétől számított 140 óra elteltével maximumot ér. el. A tenyészet kezelésiét és a nyers por tisztítását az 1. példában megadott módon végezzük. 2,5 g kristályos 2'-amino-l

2'-deoxi-t

kanamici:nt kapunk. 4. példa: A 3. példában ismertetettel azonos összetételű 15 liter folyékony táptalajt az 1. példában alkalmazott Stneptomyees kanamyoeticus törzszsel oltunk be és levegőztetés és keverés közben 28 C°-on inkubáljuk. 20 órás inkubálás után a táptalajhoz 30 g NK-^1003 antibiotikumot adunk, és az iinkubáláslt folytatjuk. A tenyészetben felhalmozódó 2'na!mino-.2'-deoxi-ka-' namicin mennyisége az inkubálás kezdetétől számított 140 óra elteltével maximumot ér el. A -tenyészel; féldolgozásált és a .kapott nyers por tisztítását az 1. példában megadott módon végezzük. 1,5 g kristályos 2'-amino-2'-deoxi-k an ami cint kapunk. 5. példa: A 3. példában megadottal azonos összetételű 15 liter folyékony táptalajt az ' 1. példában alkalmazott Streptomyces kanamyoeticus törzszsel oltunk be, és levegőztetés és keverés közben 28 C°-on inkubáljuk. 20 órás inkubálás után a táptalajhoz 45 g neamint adunk és az inkubálást folytatjuk. A tenyészetben felhalmozódó 2'^aMino-2'-dieoxi-kanamicin mennyisége az linkdbálás kezdetétől számított 140 óra elteltével maximumot ér el. A tenyészet feldolgoizását és a kapott nyers por tisztítását az .1. példában megadott módon végezzük. 1,2 g kristályos 2'-.amino-2'-deoxi-kanamicint kapunk. 6. példa: i 3,0% keményítőt, 2,5% szójababliszteit, 1,2% nátriumnitrátloit és 0,35% nátriumfcloridot tartalmazó 15 liter folyékony táptalajt sterilizálunk, majd hűtjük, és 30 g NK—1001 antibiotikum sterilizált és lehűtött vizes oldatával elegyítjük. A kapott elegyet az 1. példáiban alkalmazott Streptornyoes feanamycetieus törzszssl oltjuk be, és levegőztetés és keverés közben 28 C°-on inkubáljuk. A tenyészetben felhalmozódó 2'Haimino-2'-d!eoxi-fcanamicin rmenynyisége az inkubálás kezdetétől számított 140 óra elteltével maximumot ér el. A tenyészet feldolgozását és a kapott nyers por tisztítását az 1. példában megadott .módon végezzük. 2,2 g kristályos 2'-amino-2'-deoxi-kanamicint kapunk. 7. példa: (Összehasonlító kísérlet) Összehasonlító kísérletsorozatot végeztünlk annak igazolására, hogy az amino-glükóz és deioxistireptaminHaminoglükózHSZármazékok j elenléte a találmány szerinti eljárás egyik kiviteli módja szerint meglepő és előnyös hatást gyakorol a 2'^ämino-2'-deoxi-kanamicin termelésére. Az összehasonlító kísérletekben a táptalajhoz nem adtunk adalékanyagot. E kísérletekben a Streptomyces kanamyceticus 0—4—1 törzset az 1. példában megadott összetételű táptalajon, az ott ismertetett fermienitordkban 28 C°-on 150 órán át inkuibáltunk. A tenyésztés megkezdése után különböző — a 6. táblázatban feltüntetett — időkben különböző aminoglüfcóz-vegyületefcet, ül. 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 A Streptomyces kanamyceticus tenyésztését a 3. példában megadott módon, NK—1001 an-25 tibiotikum jelenlétében végezzük. A kapott tenyészetet szűrjük és a szűrlétet {14 liter) nátriumihidroxiddal pH = 10-re lúgosíitjufc. A szűrlétet ezután 1/4 térfoigatinyi, a szűrletiben levő bázikus antibiotikum 1 grammjára számított 2 ,0

gramm henzaldehidet. tartalmazó n-butanöllal extraháljuk. Az n^butanolos extraktumot elkülönítjük és 1/10 térfoigaitrész vízzel elegyítjük. A kapott elegyet kénsiavval pH = 2-re savanyítjuk, keverjük, a vízoldhaltó bázikus antibiotikumok a vizes fázisba mennek át. A kapott vizes antibiotikum-oldatot aktív szénnel derítjük, és az 1. példában megadott módon Dowex 1x2-vel (OH-forma) és Amberlite CG— 50-el (lammónium-forima) kromatografáljuk. A kapott nyers port víz és dimétilformamid elegyéből átkriisltályositjulk. Színtelen, tűs kristályok formájában 1,1 g 2'-am,ino-2'-deoxiJkanamicint kapunk. 45 8. példa: 13