156650. lajstromszámú szabadalom • Eljárás optikailag aktív antipodok előállítására
156650 19 17. példa: 3-Metoxi-i,3,5í(10),8i,14^ösztrapentaén-17ia-ol előállítása (Q9H22O2; 282,37) 200 mg (0,000618 mól) 3-metoxi-l,3,5(10),8,14- 5 -ösztrapentaén-17«-ol-acetátot 3 órán át keverünk nitiragénatmoszféra alatt 4 ml 1 n metanolos kálilúggal. Az anyag teljesen feloldódik. Jéghűtés közben vízzel kicsapjuk a terméket, majd a csapadékot leszívatjuk és alaposan mos- 10 suk. Ilyen módon 128 mg (73,5%) 3-metoxi-l,3, 5(l'0),8,14-ösztrapeintaén-17ct-olt kapunk az alábbi tulajdonságokkal: bomlás 30 C° fölött; a20 D = '•—197° (c=l, kloroform). Az anyagot hűvösön kell tartani, mert igen 15 gyorsan elbomlik. ]. példa: 3-Metoxi-8,14-szeko-9kszá,14a-oxido-l,3,5(10)- 20 -ösztratrién-17-on előállítása (C19H24O3; 300,38) 400 mg (0,00133 mól) 13a-metil-n,ß-OB.-SM^et fél órán át visszafolyató hűtő alatt forralunk 20 ml metanolban és 40 ml metilén-klorid'ban 0,4 ml tömény sósavval. Víz hozzáadása után a 25 szerves réteget elkülönítjük, és a hideg fázist raetilén-kloriddal extraiháljuk. Az egyesített szerves fázisokat hidrogén-karbonát-oldattal és vízzel semlegesre mossuk, szárítjuk, és az ol- „0 dószert vákuumíban lehajtjuk. Ilyen módon 400 ,mg (100%) 3-metoxi-8,14-szeko-9kszii,14ia-oxido-l,3,5(10)-ösztratrién-17-«nt kapunk, amely vékonyréteg-kromatográfiai úton egységesnek bizonyul. Etanolból végzett többszöri átkristályosítás után 45 mg anyagot kapunk az alábbi 35 tulajdonságokkal: op. 89—90 C'°; a20 D = +41,7° (c=l, kloroform). Az anyag szerkezetét infravörös, ultraibolya, mágneses magrezonancia és tömegspektrum alapján bizonyítottuk. 40 19. példa; lS^-metil-léa-^OH-SM! előállítása Saccharomyces uvarum (OBS 1508) mikroorganizmussal vég- 45 zett fermentáció útjián „resting^oell" módszerrel iSacoharomyces uvarum (1OB1S 1508) a<4d ,példa szerinti módon előállított 30 1 előfermentált kultúráját lecentriifugáljuk. A kapott élesztőt desz- 50 tillált vízzel mossuk, újra centrifugáljuk, majd 30 1 desztillált vízben szuszpendáljuk. A szuszpenzióból 500—500 ml-t töltünk 8 db 2-litsres Erl;enmeye:r-lombikba; a lombikot vattadugóval lezárjuk, majd 30 C° hőmérsékleten 140 fordu- 55 lat/perc sebességgel rázzuk őket. Négy óra eltelte után mindegyik lombikba 250 mg SM-et adagolun 2,5 ml metilcelloszolvban oldva, majd a fermentálást további ,20 órán át folytatjuk. Ezután a fermentációs tételeket egyesítjük, és 60 kétszer 1 liter metil-izobutil-ketonnal extraháljuk, majd az extraktumot vákuumban 45 C° fürdőhőmérsékleten szárazra pároljuk, és a maradékot először benzol és hexán elegyéből, majd etanolból átkristályosítjuk. 6 5 20 Ilyen módon lS^-metn^a-OH-SMi-et kapunk az alábbi jellemzőkkel: op.: 101/102—103 C°; aD = +45,4° (c == 1, dioxán). 20. példa: ía^-Metil-léa-OiH-SMi előállítása Saccharomyoes uvarum (CBS 1508) mikroorganizmussal por alakjában végzett fermentáció útján Saccharomyces uvarum (CBS 1508) 30 1 előfermentált kultúrájából 19. példa szerinti módon végzett centrifugálással élesztőt készítünk. Az élesztőt 3 liter acetonban szuszpendáljuk, a szuszpenziót 15 percen át keverjük, az élesztőt leszívatjuk, 3 liter acetonban újra szuszpendáljuk, keverjük, az élesztőt leszívatjuk, és vákuumban szobahőmérsékleten 3 órán át szárítjuk. A kapott száraz port 30 liter desztillált vízben szuszpendáljuk, és az így nyert szuszpenziót fermentálásra használjuk. ' Az SM fermentálása és a tételek feldolgozása a 19. példában leírt módon történik. Ilyen módon 13^-metil-14a-OH-4SM1 -et kapunk az alábbi jellemzőkkel: op.: 100/102—103 C°; aD = +43° <(c = 1, dioxán). 21. példa: ía^Metil-lía-OH-SM! előállítása 20:/?-hidroxi-szteroid^dehidrogenáz oldatával 4,4 ml 0,0212 mólos foszfát-puffer (pH = 5,5), 0,7 ml 0,4%^os DPNH-oldat, továbbá 0,03 ml 1 : 5 hígítású 20i^-hidroxi-szteroid-dehidrogenáz szuszpenziója (C. F. Boéhringer und Söhne GmbH, Mannheim, gyártmánya) elegyéhez 0,05 ml etanolban 1 mg SM-et adtunk, és 15 percen szobahőmérsékleten rázattuk az elegyet. Vékonyréteg-kromatográfiás elemzéssel (az la példában leírtak szerint) egyetlen átalakulási termékként TS^nmetil-iMa-OH-iSMi-et mutattunk ki. 22. példa: 13^Etil-3-metóxi^8(14)^zeko-li8-inor-l,3,5(10,-9(ll)-ösztratetraén^l7') Ő-ol-14-on (13 1/ #-etil-i 17/5--OH-iSMj) előállítása A 4d példában leírt feltételek mellett 20 órán át fermentálunk 15,0 g 13y?-etil->3-metoxiJ 8,14--szeko-l'8-nor-1,3,9( 10) ,9(11 )-ösztratetraén-l 4,17--diont (13^-etil-SM) Sacdharoimyces uvarum (CBS 1508) mikroorganizmussal. Ezután a fermentációs szuszpenziót kétszer 15 liter metil-izobutil-ketonnal extraiháljuk, az extraktumot 45 C° fürdőhőmérsékleten sziruppá betöményítjük, és a kapott terméket izopropiléterből átkristályosítjuk. Ilyen módon 13'/?-etil-3-metoxi-8t(14)-«zeko-18--nor~ly 3,Q(!lO),9(H)-Ösztratetraén-l'7 (/ S-öi-14-ont kapunk az alábbi jellemzőkkel: op.: Ö5-M3'6,5 C°, - ÖD = +15,2° (c = 1, dioxán). 10
