156545. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 4'-demetil-epipodofillotoxin-béta-D-glukozid előállítására
9 156545 10 pentán vagy ciklohexán elegyéből átkristályosíthatjuk. A legtisztább tetra-0-acetil-4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodoiillotoxin-/ ö-D-glukozid Ü67—lí69°-on olvad. [a]20 D = —46,6° (kloroformban). 4. példa: Tetra-0-acetil-4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxin-/3-D-glukozid 8,56 g 4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodof illotoxint 55 ml acetonitrillel 65°-on oldódásig keverünk, majd 3,92 g száraz cinkoxidot adunk hozzá, és nedvesség kizárásával 65°-on 20,0 g a-acetobrómglukózt keverünk bele. 10 percenként mintát veszünk, és vékony rétegű kromatogrammban (kövasavgél/kloroform-f-10% aceton) megvizsgáljuk. Az acetobrómglukóz teljes átalakulása után (kb. 40—60 perccel a reakció megindulása után) a reakciókeveréket szobahőmérsékletre hűtjük, 50 ml kloroformmal hígítjuk, az átalakulatlan cinkoxidot kiszűrjük, és a szűredéket vákuumban 40°-on kb. 20 ml-re besűrítjük. Ezt a koncentrátumot 250 ml kloroformban oldjuk, a kloroform-fázist kétszer 300—300 ml 9:1 arányú víz-metanol eleggyel mossuk, és a kloroformos réteget nátriumszulfát fölött Való megszárítás után vákuumban bepároljuk. A száraz maradványt négyszer 70—70 ml 1:3 arányú forró etanol és víz eleggyel extraháljuk. Az etanolban oldhatatlan részt kb. 450-szeres mennyiségű kovasavgélen kromatografáljuk, eluálószerként 5% acetont tartalmazó kloroformot használva. A tiszta glukozid-frakciókat egyesítve és nagyvákuumban 80°-on megszárítva nyers tetra-0-acetil-4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxin-/?-D-glukozidot kapunk. További kromatografálással igen tiszta készítmény állítható elő, amelynek fizikai adatai megegyeznek a 3. példában leírt végtermék adataival. 5. példa: 4'-Karbobenzoxi-4'-demetil-podofillotoxin 15,0 g 4'-demetil-podofillotoxint feloldunk 450 ml vízmentes etilénkloridot és tetrahidrofuránt azonos arányban tartalmazó meleg elegyben, hozzáadunk 6,0 ml vízmentes piridint, és —10°ra hűtjük. Ezután keverés és hűtés közben 1,5 óra alatt hozzácsepegtetjük 8 ml klórhangyasavbenzilészternek 55 ml etilénkloriddal készült oldatát, majd 1 óra hosszat —5 10°-onkeverjük. Ezután 40°-os fürdőben vákuumban 200 mire bepároljuk, 250 ml etilénkloriddal hígítjuk, és az oldatot egyszer 100 ml n sósavval, majd vízzel semlegesre mossuk. Nátriumszulfát fölött való szárítás után vákuumban bepároljuk, és a maradványt 20-szoros mennyiségű kovasavgélen kromatografáljuk. 1% metanolt tartalmazó kloroform előbb kevés mellékterméket, majd tiszta 4'-karbobenzoxi-4'-demetil-podofillotoxint eluál. Metanolból átkristályosítva a vegyület 113—• 114°-on olvad. [a]21 D = —88,3° (kloroformban). 6. példa: Tetra-0-acetil-4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxin-^-D-glukozid 10,7 g 4'-karbobenzoxi-4'-demetil-podofillotoxint melegítés közben feloldunk 30 ml etilénkloridban, az oldatot +15°-ra hűtjük, és 14,0 g 2,3,4,6-tetra-0-acetil-/3-D-glukózt. adunk hozzá. 5 perc keverés után nedvesség kizárásával —15°ra hűtünk, és 5 perc alatt 7 ml —10°-ra hűtött bórtrifluorid-etiléterátot (48% bórtrifluorid) csepegtetünk hozzá. Ezután 1 óra hosszat —15°-on keverjük, majd hozzácsepegtetjük 7 ml vízmentes piridinnek 20 ml etilénkloriddal készült oldatát. 100 ml kloroformmal való hígítás után ötször 50—50 ml vízzel mossuk. A szerves fázist nátriumszulfát fölött megszárítjuk, vákuumban bepároljuk, és a maradványt 60°-on vákuumban megszárítjuk. A kapott habot 50 ml forró etanolban oldjuk, kb. 50°-ra hűtjük, 150 ml hideg vizet adunk hozzá, és addig keverjük, míg a kezdetben csomós, kenőcsszerű csapadék homokos porrá nem alakult át. A terméket leszívatjuk, 40 ml 25%-os etanollal utánamosunk, és vákuumban 60°-on megszárítjuk. Ezután a készítményt 200 ml forró metanolban oldjuk, kristálytisztára szűrjük, a szüredéket vákuumban bepároljuk, és a maradványt nagyvákuumban 80°-on súlyállandóságig szárítjuk. Az így kapott tetra-0-acetil-4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxin-/S-D-glukozid azonos a 3. példa szerint előállított termékkel; 7. példa: Tetra-0-a!eetil-4'-demetil-epipodofillotoxin-/ 3--D-glukozid A karbobenzoxi-maradéknak a tetra-O-acetil-4%karbobenzoxi-4'-demetil-e)pipodofillotoxin-/3-D-glukozidból való lehasítására ebből a vegyületből 13,4 g-ot feloldunk 100 ml 1 : 2 arányú aceton-etanol elegyben, hozzáadunk 0,5 ml jégecetet és a 2 g palládiumszenet (10% palládium), és 20°-on hidrogénezzük. Ezután a katalizátort kiszűrjük, meleg aceton-metanol eleggyel mossuk, és a szüredéket vákuumban bepároljuk. A maradványra 100 ml forró etanolt öntünk, kikristályosodni hagyjuk, és a kristályokat leszívatás és metanolos mosás után vákuumban megszárítjuk. A legtisztább tetra-0-acetil-4'-demetil-epipodofillotoxin-/?-D-glukozid 225—227°-on olvadó finom tűk alakjában kristályosodik. [ö ]2i D = _i64,4° (c = 1,024) kloroformban. 8. példa: 4'-Demetil-epipodofillotoxin-/3-D-glukozid 25 g tiszta tetra-0-acetil-4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxin-/?-D-glukozidot, 3,6 g vízmentes cinkacetátot és 1,45 g vízmentes nátriumacetátot 150 ml metanolban visszafolyató hűtő alatt keverés közben melegítünk. 2, ill. 4 óra elmúltával ledesztillálunk 12,5—12,5 ml me-10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 5
