156545. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 4'-demetil-epipodofillotoxin-béta-D-glukozid előállítására
156545 11 12 tanolt. Ezután kétóránként 12,5 ml metanolt adunk hozzá, és ugyanennyit ledesztillálunk. Összesen 18 óra elmúltával az acetilcsoportok lehasadása befejeződött, és kb. 60% 4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxin-^-D-glukozidhoz és kb. 40% 4'-demetil-epipodofillotoxin-/?-D-glukozidhoz jutottunk. A reakciót kovasavgéllemezeken vékonyréteges kromatogrammon izopropüacetát-metanol (4:1) oldószerrel vízzel telítve követjük. Az előhívást 50%-os kénsavval készült 0,i2;%-os cerium'(IV)szulfátoldattal való bepermetezéssel és 110—130°-ra való melegítéssel végezzük. A termékekhez 5 ml jégecetet adunk, vákuumban 50°-on bepároljuk, és 15 perc alatt nagyvákuumban 50°-on megszárítjuk. A maradványt 250 ml 4 : 1 arányú kloroform-izopropanol elegybe és 25 ml vízbe felvesszük, a vizes fázist elválasztjuk, és a szerves fázist újabb 25 ml vízzel mossuk. A két mosóvizet 50 ml kloroform és izopropanol eleggyel extraháljuk, és az egyesített szerves fázisokat nátriumszulfát fölött való megszárítás után vákuumban bepároljuk. A maradványt háromszor vákuumban 30 ml acetonnal kezeljük, majd nagyvákuumban 75°-on két óra hosszat szárítjuk. 20 9. példa: 4'-Demetil-epipodofillotoxin-/?-D-glukozid 5 A 7. példa szerint előállított tetra-O-acetil-4'-demetil-epipodofillotoxin-/J-D-glukozidból 2,0 g-ot és 1 g vízmentes cinkacetátot 30 ml vízmentes metanolban 25 óra hosszat visszafolyató hűtő alatt melegítünk. Ezután a keletkezett fehér csa-Xü padékot néhány ml jégecet hozzáadásával és az oldat enyhe melegítésével oldatba visszük, az oldószert vákuumban 40°-on eltávolítjuk, és a maradványt 50 ml 4 : 1 arányú kloroform-butanol elegybe felvesszük. A szerves fázist kétszer 10— 15 10 ml vízzel mossuk, nátriumszulfát fölött való megszárítás után vákuumban bepároljuk, és a maradványt kovasavgélen kromatografáljuk. 9:1 arányú vízzel telített izopropilacetát-metanol elegy előbb az apoláris alkotórészeket, majd tiszta 4'-demetil-ep1 iipodofillotoxin-1/ 3-!D-glukozidot eluál. Az egyes frakciókat kovasavgéllemezeken vékonyréteges kromatogrammon izopropilacetát-metanol 8:1 arányú elegyével, vízzel telített, vizsgáljuk, és a glukozidfrakciókat egyesítve 2c kétszer metanolból átkristályosítjuk. A 4'-demetil-epipodofillotoxin-/J-D-glukozid 222—230°-on olvad, egy másik módosulat pedig 262—264°-on. [a]21 D = —88° (c = 0,507) metanolban. A 4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxin-/?-D-glukozidot és 4'-demetil-epipodofillotoxin-/?-D-glukozidot tartalmazó keverékből metanolból való kikristályosítással nem egészen tiszta alakban nyerhető ki a 4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxin-ß-D-glukozid. A terméket kb. 100-szoros mennyiségű kovasavgélen kromatografálva 9 : 1 arányú izopropilacetát-metanol eleggyel (vízzel telített) eluálva tiszta 4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxin-/3--D-glukozidot kapunk. A termék acetonból át-Szabadalmi 17 bg pr. 10 p-ra 7081 LTTS kristályosítva 15;5^1(5;6°-on olvad. ![;a]a3* D = —#2,0° (c = 1,00) kloroformban. A karbobehzoxi-csoport lehasítására 4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxin-/3-D-glukozid és 4'-demetil-epipodofillotoxin-/?-D-glukozid keverékét 200 ml acetonban oldjuk, az oldatot hozzáadjuk 3 g palládiumszénnek (10% palládium) 50 ml vízzel készült szuszpenziójához, és a védőcsoport lehasadásának befejeztéig (1,5 óra) hidrogénezünk. A reakciót vékonyréteges kromatogrammon a fent ismertetett módon ellenőrizzük. Ezután a katalizátort kiszűrjük, 100 ml 4 : 1 arányú aceton-víz eleggyel mossuk, és a szüredéket vákuumban kb. 40—45 ml-re sűrítjük, miközben a 4'-demetil-epipodofillotoxin-^-D-glukozid kikristályosodik. A kristályosodás tökéletessé tételére még 20 percig jégfürdőben állni hagyjuk, a kivált kristályokat leszívatjuk, 25 ml vízzel mossuk, és nagyvákuumban 70°-on megszárítjuk. Metanolból kikristályosítva tiszta 4'-demetil-epipodofillotoxin-/S-D-glukozidot kapunk 225—227° olvadásponttal. [O]21 D = — 88,fi° (e-1,05) metanolban. Egy másik módosulatnak 262—264° az olvadáspontja. S0 Szabadalmi igénypontok: 35 1. Eljárás 4'-demetil-epipodofillotoxin-/?-D-glukozid (I képlet) előállítására azzal jellemezve, hogy 4'-demetil-epipodofillotoxint (X képlet), illetve 4'-demetil-podofillotoxint (IX képlet) vízmentes, az adott körülmények között iners szerves oldószerben —20 és —5 C° közötti hőmérsékleten savlekötőszer jelenlétében klórhangyasav-benzilészterrel átalakítunk 4'-karbobenz-40 oxi-4'-demetil^epipodoifillatoxi;nná (V képlet), illetve 4'-karbobenzoxi-4'-demetil-podofillotoxinná (VII képlet), majd vagy a 4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxint (V képlet) az adott reakciókörülmények között iners oldószer-45 ben cinkoxid vagy higanyoxid jelenlétében a-acetobrómglukózzal (VI képlet) kondenzáljuk, vagy a 4'-karbobenzoxi-4'-demetil-epipodofillotoxint, illetve a 4'-karbobenizoxi-4'-demetiljpodofillotoxint bórtrifluorid-etiléterát jelenlétében az 50 adott reakciókörülmények között iners szerves oldószerben 0 C° alatti hőmérsékleten 2,3,4,6--tetra-0-acetil-/?-D-glukózzal (VIII képlet) kondenzáljuk, ezután az ily módon kapott tetra-O-acetil-4'-karibobenzoxi-4'-demetil-epipodofilIo-55 toxin-/?-D-glukozidból (II képlet) vagy először hidrogenolízissel lehasítjuk a karbobenzoxi-csoportot, és az így kapott tetra-0-acetil-4'-demetil-epipodofillotoxin-/J-D-glukozidot (III képlet) vízmentes cinkacetát jelenlétében alkoholízisnek 60 vetjük alá, vagy előbb az acetilcsoportokat vízmentes cinkacetát vagy vízmentes cinkacetát és nátriumacetát keveréke jelenlétében alkoholízissel lehasítjuk, és utána a karbobenzoxi-csoportot hidrogenolízissel eltávolítjuk. (Elsőbbsége: 1966. 65 december 13.). 6
