156544. lajstromszámú szabadalom • Eljárás influenza-vakcina előállítására

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1967. XI. 20. (RO—455) J Franciaországi elsőbbsége: 1966. XI. 21. (PV 84337). Közzététel napja: 1969. IV. 25. Megjelent: 1970. V. 02. 156544 •U Szabadalmi osztály: 30 h 1—8 Nemzetközi osztály: A 61 k Decimal osztályozás: Feltaláló: Werner Georges biológus, 92 Sceaux, Franciaország Tulajdonos: Rhone-Poiulenc S- A., Párizs, Franciaország Eljárás influenza-vakcina előállítására A találmány tárgya eljárás egyszerű és kombinált inaktivált vírusvakcinák előállítására influenza ellen. Ezeknek a vakcináknak az előállítására emberi (A, Ai, A2 vagy B típusú), ló-, sertés- vagy madár-influenzavírusokat használunk. A találmány szerinti eljárás abban áll, hogy a fent említett vírusok egyikét beoltjuk egy embriós tyúktojás allantoiszába (hugytömlőjébe), a beoltott tojást inkubáljuk, a vírustartalmú szuszpenziót öszegyűjtjük, és alkalmas módszerrel inaktiváljuk. Az így kapott szuszpenzió meghatározott összetételű olajban emulgálva tartós olajos inaktivált influenzavírus-emulziót szolgáltat, amely embereknek és állatoknak adható az illető vírus által kiváltott influenza elleni megvédésükre. A találmány szerinti eljárás gyakorlati kivitele során a fent említett különféle antigén típusú influenzavírusok részecskéit a szokásos módon embriós tyúktojás allantoiszában tenyésztjük, majd 2—3 napi inkubálás után az allantoisz-folyadékot összegyűjtjük, differenciális centrifugálással tisztítjuk, és szűrjük. így inaktiválásra alkalmas vírus-szuszpenziót kapunk. Eddig az influenzavírus-vakcinát rendszerint ultraibolya besugárzással inaktiválták. Az ilyen vakcinának az a hátránya, hogy fehérjetartalma miatt lázat és különféle egyéb másodlagos tüneteket vált ki [F. R. Davenport és munkatársai: J. Lab. Clin. Med. 63, 5—13 (1964)]. 10 15 20 25 30 Davenport idézett közleményében egy hemagglutinin' alapú, a találmány szerint előállíthatóval analóg influenzavírus-vakcina előállítását is ismerteti. Eljárása szerint az allantoiszfolyadékot adszorpciós oszlopon átbocsátva megszűrik, majd nátrium-acetátos pufferoldattal szemben háromszor dializálják. A továbbiakban formaldehides, majd lantánacetátos kezelést alkalmaznak. Ezeknek a laboratóriumi módszereknek és további tisztítási műveleteknek az alkalmazásával sikerült Davenportnak és munkatársainak elég hatékony és kellően tiszta influenzamkcinához jutniuk. Ez a bonyolult, számos különleges laboratóriumi műveletből álló eljárás csak kellően felszerelt laboratóriumban valósítható meg, szükségszerűen rossz hozammal, és üzemi megvalósításra alkalmatlan. A találmány szerinti eljárás iparilag könnyen megvalósítható hagyományos gyógyszeripari készültekben. Különösen jelentős műszaki haladást és a hozam növekedését jelenti a dializálás elmaradása. A találmány értelmében a fent leírt módon előállított vírusszuszpenzió inaktiválását etiléterrel végezzük oly módon, hogy a tisztított vírusszuszpenzióhoz étert adunk, és a keveréket 0 C° körüli hőmérsékleten rázatjuk, majd az így tisztított hemagglutinin-szuszpenziót dekantálással elválasztjuk. Ilyen körülmények között megmarad a vírus neuramidináz-aktivitása. Ezután ismert módon meggyőződünk róla, hogy ez 156544