155927. lajstromszámú szabadalom • Eljárás antidiuretikus hatású polipeptid előállítására
155927 ciklusos polipeptiddé oxidáljuk, az oxidációt vizes oldatban vagy vízzel elegyedő oldószerek keverékeiben végezve. Például a következőképpen járhatunk el: a /?-benziltiopr>opionsav-kloridot a tirozin-metilészterrel kondenzálva az eddig le nem írt ß-benzil-tio-propionil-L-tirozin-metilésztert előállítjuk, majd ezt. hidrazinhidráttal az eddig lenem írt hidraziddá és aziddá átalakítjuk és az L-fenilalanin-metilészterrel kapcsoljuk. A dipeptidészter így kapott származékát ismét azid alakjában az L-glutaminil-L-aszparagmil-S-benzil-cisztein-metilészterrel az eddig nem ismert /3-benzil-tio-propionil-L-tirozil-L-fenilalanil-L-gluta;mmil-Lnaszparaginil-S-benzil-L-cisztein--metilészterré kondenzáljuk, amelyet L-propil-NG -tozil-HD-argmil-glicinamiddal, ismét az azidszintézis útján a (II) képletű, új védett okta-5 peptid-származékká kapcsoljuk. A védőcsoportokat folyékony ammóniában, nátriummal végzett redukcióval eltávolítjuk, majd a redukált terméket káliumferrieianiddal oxidálva az (I) képletű, új ciklusos, biológiailag 10 aktív diszulfiddá alakítjuk. Az (I) képletű ciklusos diszulfid a természetes arginin-vazopresszinnél nagyobb és specifikusabb antidiuretikus aktivitásával tűnik ki (lásd a következő táblázatot) Táblázat Vegyület Aktivitás antidiuretikus presszorikus A hatás N. E./mg N. E./mg fajlagossága l-dezaminoHD^Arg8 -vazopresszin l-dezamino~Phe^Arg8 -vazopresszin Az aktivitást nemzetközi egységekben, N.E./ /mg, a hatás fajlagosságát az antidiuretikus és presszorikus hatás hányadosával fejezzük ki. Az (I) képletű ciklusos diszulfid a természetes arginin-vazopresszintől abban tér el, hogy az 1. helyzetben cisztein helyett a /S-tiopropionsavat és a 8. helyzetben az arginin helyett D-arginint tartalmaz. Az (I) képletű polipeptid, melyet 1-dezamino-8-D^arginm-vazopresszinnek nevezhetünk, biológiai hatását tekintve kiváló készítmény a polyuria szabályozására és a Diabetes insipidus-nál a polydipsia enyhítésére. A találmány szerinti polipeptidet akár szabad bázisként, aikár szerves Vagy szervetlen savakkal képezett sói alakjában használhatjuk, esetleg segédanyagok, mint stabilizáló- és konzerválóadalékoik, édesítőanyagok, aromás anyagok, nedvesítőszerek stb. hozzáadása útján. A találmány szerinti poliipeptidek parenterális, perorális, intranasalis, szubkután, mtramuszkuláris és intravénás alakban használhatók. Szervetlen savakként például sósavat, bórsavat és foszforsavat, szerves savakként például ecet-, citromos borkősavat vagy savas hatású vegyületeket például tannint stb. használhatunk. Segédanyagokként keményítőt, laktózt, természetes és keményített olajokat, talkumot, glicerint és hasonlókat alkalmazhatunk. A találmány szerinti eljárás kiviteli módját .közelebbről az alábbi példák szemléltetik. Példa: /S-benzil-tiopropionil-L-tirozin-metilészter 9,2 g /Mjenzil-tiopropionsavat feleslegben alkalmazott tiomilkloriddal a kloridjává átalakítjuk, ezt 20 ml etilacetátban feloldjuk, az oldatot erélyes keverés és hűtés (0 C°) közben 10,9 g L^irozin-metilészter-hidroklorid, 50 ml víz 60 65 16 000 ±200 800 ±170 11 29 ±7 1454 27,5 25 és 50 ml etilacetát keverékéhez adjuk és a reakciókeverék pH-értékét nátriumkarbonát adagolásával gyengén lúgosra beállítjuk. Az acetátos réteget elkülönítjük, megszárítjuk, csökkentett nyomáson bepároljuk, és a maradékot etil£0 acetát-petroléter keverékéből átkristályosátjuk. Az anylúgból lepárlás és átkristályosítás után egy másik részt kapunk. Az összes kitermelés 16,3 g, az elméletinek 93%-a. A termék olvadáspontja 89—90 C°, [a:P5 D = —3,4 ±0,5° 35 (c = 0,5, dimetilformamid). C2 oH 23 ;N0 4 S(373,5) képletre a számított értékek: C = 64,31%, H = 6,21%, N = 3,75%, a talált értékek: C = 64,38 %, H = 6,25%, N = 3,71%. 40 ^-benziltiopropionil-L-tirozin-hidrazid 15,3 g /?-benzil-tiopropionil-L-tirozin-metilésztert 60 ml etanolban feloldunk, 6 ml 80%os hidrazinhidrátot adunk hozzá és a keveré-45 ket visszafolyató hűtő alatt 2 órán át forraljuk. A kásaszerű reakció keverékhez feleslegben vizet adunk, a kivált terméket leszívatjuk, á szűrőn mossuk és vizes etanolból átkristályosítjuk. Kitermelés 11,95 g (78%), op.: 193—194 50 C°, [«]25 D = —6,0 ±0,5 C° (c = 0,5 dimetilformamid). C19 H 2 3N:Í0 3 S (373,5) képletre a számított értékek: C = 61,10%, H = 6,21%, N = 11,25%. A talált értékek: C = 61,10%, H = 6,11%, 55 N = 11,15%. /5-benzil-tiopropionil-L-tirozil-L-fenilalanin-metilészter 5,6 g /?-benzil~tiopropionil-L-tirozin-hidrazidot 50 ml dimetilformaimid és 4 ml tömény sósav keverékében feloldunk, s az oldathoz keverés és —10 C°-ra való hűtés közben 1,03 g nátrrumnitritet 2 ml vízben adunk. A reakciókeverék pH-értékét N-etilpiperidinnel 6—7-re beálz
