155872. lajstromszámú szabadalom • Eljárás immunokémiai meghatározások céljaira alkalmas eritrocita-készítmény előállítására

MAGTAR N ÉPKÖZTARSASÄG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1967. III. 24. (OA—338) Hollandiai elsőbbsége: 1966. III. 24. Közzététel napja: 1968. X. 22. Megjelent: 1969. X. 15. 155872 /^' **\ v* y Szabadalmi osztály: 30 h 1—8 Nemzetközi osztály: A 61 k Decimái osztályozás: Feltaláló: Dr. Dingwall David vegyész, Hamilton, Nagy-Britannia Tulajdonos: N. V. ORGANON cég, OSS, Hollandia Eljárás immunokémiai meghatározások céljaira alkalmas eritrocita-készítmény előállítására A találmány tárgyát oly eljárás képezi, amellyel az eritrociták mechanikai tulajdonságai megjavíthatok és ezáltal az eritrocitákból tabletták vagy más szilárd adagolási egységek sajtolhatok, anélkül, hogy az így nyert készítmény elveszítené alkalmasságát az immunokémiai meghatározások során segédanyagként történő felhasználásra. Ismeretes, hogy az emlős állatokból, mint szarvasmarhákból, lovakból, juhokból vagy nyulakból, továbbá csirkékből, valamint az emberi szervezetből nyert eritrociták felhasználhatók az antigén antitesttel való reakcióján alapuló immunokémiai meghatározások segédanyagaként. Az eritrocitákat pl. antigének hordozójaként alkalmazzák, így pl. emberi korion gonadotropin (HCG) — vö. Acta Endocrine*logica 35, 261 (I960) — szérum-gonadotropin, növekedési hormon — vö. Nature 182, 951 (1958) — továbbá szérumalbumin, gamma-globulin, inzulin, luteinizáló hormon és tetanus-toxoid készítményekben. S. V. Boyden szerint — Proc. Soc. Exp. Biol. & Med. 73, 289 (1950) — az eritrociták felületi adszorptív tulajdonságai nagymértékben javíthatók valamely cserzőanyaggal vagy pácolószerrel való kezelés útján, így az antigén sokkal jobban tud kötődni az eritrocitákhoz. Az irodalomban ilyen célra a következő cserzőanyagokat ill. pácolószereket említik: inulin, tannin, hidrokinon, bisz-diazobenzidin — vö. pl. Fed. Proc. 17, 461 (1953) — formalin — vö. pl. Schweiz. Z. Path. Bakt. 21, 1043 (1958) — acetaldehid, piroszőlősav-jaldehid és 5 glioxál. Ajánlották már az eritrociták különböző cserzőanyagokkal egymás után történő kezelését is, mint pl. a formaiinnal való előkezelést, majd ezt követően tanninnal való reagáltatást, vö. Wide és Gemzell, az Acta Endocri-X0 nologica fentidézett közleményében. Az utóbbi néhány évben különböző közlemények jelentek meg az in vitro végezhető terhességi reakciókról, amelyek során cserzőanyaggal vagy maró hatású páoolószerekkel 15 előzetesen kezelt és emberi korion gonadotropinnal érzékenyített eritrocitákat alkalmaznak. Ezeknek a homológ antiszérummal való reakciója meggátolható a vizsgálandó vizeletbein jelenlevő HCG által és így specifikus eritrocita-20 -üledék képződik a reaktor-edény fenekén. Eddig az előzetes kezelés után érzékenyített eritrocitákat vizes szuszpenzióban, vagy pedig előnyösebben fagyasztva szárított alakban tárolták felhasználásig. Az eritrociták azonban 25 igen instabil részecskék és ezeknek a hordozóként alkalmazott eritrocitáknak a megfelelő módon történő tartósítása igen nehéz feladatot jelentett. A pácolószerrel előkezelt eritrociták kevésbé instabilak és könnyen száríthatok 30 fagyasztással; ebben az állapotban azután vi-155872