155556. lajstromszámú szabadalom • Eljárás szorbóz előállítására
155556 nélkül, továbbá a lehető legrövidebb idő alatt végezzük a fermentatív szorbóz-előállítást. A találmány szerinti félfolyamatos üzemű módon úgy járunk el, hogy szorbitra vonatkoztatott 10—15% közötti induló szorbit-koncentrációjű, s a végtérfogatra számított mennyiségű egyéb szükséges tápanyagokból tápoldatot készítünk, amely az egyéb tápanyagokat a folyamatban szükséges teljes mennyiségben tartalmazza. Ezt az önmagában ismeretes és szokásos módon készített oltóanyaggal beoltjuk, s a további szorbitmennyiséget meghatározott időpontokban, kis adagokban adagolt sterilezetlen 35—75%-os töménységű szorbit-oldatmennyiségekkel adjuk be. Ezzel növeljük a fermentlé átalakult és átalakulatlan szorbit-tartalmát és egyúttal a mikroorganizmusok savtermészetű anyagcsere-termékeire nézve hígítjuk az oldatot. Mindezt oly módon végezzük, hogy a töménységet az átalakult és átalakulatlan szorbitra együttesen nézve az oxidáció lezajlásának mért ütemében 30—35% közötti mértékig emeljük. Közben a levegőztetést mért értékek alapján úgy szabályozzuk, hogy a fermentlé oldott oxigén-tartalma a fermentálás során 0,1 mg/liter—4 mg/liter közötti koncentrációjú legyen. Célszerűnek találtuk az adagolás olyan kivitelezését, amelynél az egyes adagokkal a csupán szorbit-tartalomra kifejezett koncentrációt 2—10% közötti értékekkel emeljük. A teljes mennyiség beadása és az oxidációs folyamat lezajlása után a továbbiakban a fermentálást önmagában ismert módon leállítjuk és a szorbóz terméket ugyancsak önmagában ismert módon kipreparáljuk. A találmány szerinti eljárást az alábbi kiviteli példákon mutatjuk be: 1. Az Acetobacter suboxydans ATCC 621 törzset Roux palackban szorbit tartalmú agar-agaros táptalajon, 28 C°-on, 48 órán keresztül inkubáltuk. A tenyészetet 50 ml 10%-os szorbit oldattal steril körülmények között lemostuk és beoltottuk a kísérleti fermentorban (előre) elkészített, sterilezett 3,5 1 táptalajba. Amikor a képződött szorbóz koncentrációja az 5%-ot elérte, 285 g 70%-os (fs: = 1,3) szorbit oldatot (220 ml) adagoltunk a fermentorba. A fermentációt az előzőek szerint folytattuk. 10%-os szorbóz-koncentráció elérésekor további 315 g 70%-os szorbit-oldatot (240 ml) adagoltunk a rendszerbe. Az oxidáció előrehaladásával további 480 g (370 ml), 530 g (410 ml), 615 g (470 ml), 690 g (530 ml) 70%-os szorbitot adagoltunk a fermentorba, míg a végső koncentráció 45 g/100 ml nem lett. Ezek után a fermentációt a szorbit szorbózzá történő teljes átalakulásáig folytattuk. A konverzió 95%, a fermentációs idő átlag 40 óra volt. Az anyagcseretermékek hígulását a pH állandó mérésével ellenőriztük. A mért végső pH-érték: 4,8. A fermentáció lefolyását adatszerűen az 1. sz. táblázat szemlélteti. 10 15 20 25 30 Az 1. példa biológiai képét az 1. sz. ábrán 35 szemléltetjük. Az ábrán a szorbit -|- szorbóz összkoncentrációja változásait (g/100 ml értékben kifejezve) a .— (pont, vessző) vonal, a szorbózadagolások okozta változásokat a vékony, ezek csúcsértékeit a vastag vonal mutatja (mind-40 kettőt ugyancsak g/100 ml értékben fejezve ki), míg az 02 -koncentráció változásait a ..— (pont, pont, vessző), s az aktuális C>2-telítési értékeket a (szaggatott) vonalon követhetjük. 1. sz. tát )lázat idő: térfogai szorbit szorbóz szárazkonpH On cc anyag verzió óra 1 g/ioo mi g/100 ml g/ioo ml % mg/l 0 3,55 15,0 0,0 15,0 0,0 5,8 4,3 8 3,55 10,0 5,0 15,0 33,0 5,8 2,4 11 3,77 9,5 10,0 19,5 51,0 5,6 1,8 14 4,01 8,7 15,0 23,7 63,5 5,4 1,7 18 4,38 8,3 21,0 29,3 72,0 5,0 1,4 24 4,79 8,6 26,0 34,6 75,0 4,9 1,0 30 5,26 8,0 32,0 40,0 80,0 4,8 0,3 40 5,79 2,0 43,0 45,0 95,0 4,8 0,3 A táptalaj összetétele: Szorbit kukoricalekvár CaCOs pálmamagolaj ecetsav pH = 5,8 indulási térfogat: 3,5 1 A készülék adatai összes térfogat Hasznos térfogat keverő fordulatszáma szulfitszám g/100 ml 45 2. Az oltóanyag készítése az első példában leírtak szerint történt és mennyiségileg azzal azo-15,0 nos volt. Az oltás, valamint a fermentálás körül-0,85 menyei (hőmérséklet, levegőztetés stb.) ugyan-0,3 csak az 1. példában megadottakkal azonosak 0,12 50 voltak. 10 1 5,5 1 800/perc (propellerkeverő) 9 mg 02 /l óra A fermentort 28 Cc -ra termosztáltuk és 0,8— 1,0 att levegőnyomást adtunk rá. A levegőztetés mértéke 1 1 levegő/2 1—2 1 levegő/l 1 táptalaj perc volt. Az oxidáció előrehaladását a kivett minták Schoorl szerinti analízisével követtük. 55 60 A táptalaj összetétele: Szorbit kukoricalekvár kalciumkarbonát pálmamagolaj ecetsav indulási térfogat 3,0 1 A készülék adatai: összes térfogat hasznos térfogat keverő fordulatszáma: 65 szulfitszám g/100 ml 15,0 1,4 0,57 0,28 pH 5,8 12,0 1 8,5 1 900 fordulat/perc (propeller keverő) 9,2 mg 02 /l óra
