154813. lajstromszámú szabadalom • Eljárás egy terakozapeptid előállítására
11 154813 12 oldjuk, —5°-ra hűtjük, hozzáadunk 4,1 g p-toluolszulfonsavat, és végül éterrel kicsapjuk. 66 g H-Val-Gly^(CTB)Lys-<eTB)Lys-Arg-Arg-Pro-ValH(CTB)Lys-Val-Tyr-Pro-Val-NH2 -Trit-toluolszulfonátot kapunk, amely bomlás köz- 5 ben 185°-on olvad. [a]2 ° D = — 42° dimetilformamidban,. 2. példa: O-terc.butil-L-glutamil-Im-tritil-L-hisztidil-L-fenüalanil-i-arginü-L-triptofanil-glicil-N-karbo-terc.ibutoxi-L-lizil-L-prohl-L^valil-glicil-iN-karbo-terc.butoxi-L-lizil-N-karbo-terc.butoxi-L-lizil-L-arginü-L-arginil-L-prolil-L-valil-N-karho-terc.butoxi-L-lizil-L-valU-L-tirozil--L-prolil-Iwvalinamid [H-(OTB)GluH(Trit)His-Phe-Arg-Try-Gly-(CTB)Lys-Pro-Val-Gly-(CTB)Lys-4(CTB)Lys-Arg-Arg-Pro-Val•^(CTB)Lys-Val-.Tyr-Pro-Val-NH2 ]. 3. példa: L-tirozil-L-szeril-L-norleucin-metilészter (H-Tyr-Ser-Nle-OMe). 54 g H-Ser-JNHe-OMe-HCl-ot és 63 g CBO-Tyr-OH-t feloldunk 860 ml aoetonitrilben, 0°ra hűtjük, 28 ml trietilamint adunk hozzá, majd —10°-ra hűtjük, és 41 g diciklohexilkarbodiimidet adunk hozzá, a reakciókeveréket 16 óra hosszat 0°-on keverjük, majd szűrőre viszszük. A csapadékot 1400 ml piridinnel mossuk. Az egyesített szűredékeket bepároljuk, és a maradványt etilacetátból kikristályosítjuk. 101 g CBO-TyrnSer-Nle-OMe-t kapunk 140—142° olvadásponttal. [a]20 D = —15° dimetilformamidban. 51 g előbb kapott terméket feloldunk 2 liter metanolos n hidrogénklorid oldatban, és 10 g palládium-szén jelenlétében hidrogénezzük. Kb. 2 óra elmúltával megszakítjuk a hidrogénfelvételt, szűrünk, a szűredéket bepároljuk, és a maradványt metanol és éter 3 : 1 arányú elegyéből kikristályosítjuk. 42 g H-Tyr-Ser-Nle-OMe • BCl-t kapunk 227° olvadásponttal. [a]20D = = —7° dimetilf ormamidban. 4. példa: N-Propionil-L-tirozil-L-szeril-L-norleucin-hidrazid (Prop-Tyr-Ser-Nle-NHNH2 ). 7,4 g propionsavat és 22,6 g 2,4,5-triklórfenolt feloldunk 100 ml etilacetátban. A reakciókeveréket 0°-ra hűtjük, 20,6 g diciklohexilkarbodiimidet adunk hozzá, 2 óra hosszat rázzuk, szűrjük, bepároljuk, és a maradványt etanolból átkristályosítjuk. 15,6 g propionil-2,4,5-triklórfenilésztert (Prop-OCP) kapunk 40° olvadásponttal. A kapott tripeptidészterből 13,6 g-ot, 8,3 g Prop-OCP-t, 0,2 g propionsavat és 42 ml trietilamint feloldunk 60 ml dimetilformamidban, a. kicsapódott trietilamin-hidrokloridot leszívatjuk, a szűredéket 50 óra hosszat 20°-on állni hagyjuk, 500 ml etilacetátot adunk hozzá, híg sósavval, híg ammóniával és vízzel mossuk, nátriumszulfát fölött megszárítjuk, és bepároljuk;» Etilacetátból való átkristályosítás után 12 g Prop-Tyr-Ser-Nle-OMe-t kapunk 190° olvadásponttal. [O]20 D = —5° dimetilformamidban. A fentiek szerint kapott tripeptidészterből 8,7 g-ot feloldunk 100 ml metanolban. 80 ml hidrazinhidrátot adunk hozzá, 16 óra hosszal állni hagyjuk, szűrjük, a csapadékot 500 ml metanollal és többször vízzel mossuk, és megszárítjuk. 7,1 g Pro-Tyr-Ser-Nle-NHNH2 -t kapunk 255° olvadásponttal. [Ö]20 D = +7° dimetilformamidban. 5. példa: N-propionil-L-tirozil-L-szeril-L-norleucil-I^-glutamil-L-hisztidil-L-fenilalanil-L-arginil-L-triptofanil-glicil-L-lizil-L-prolil-L-valil-glicil'-L-lizil-L-lizil-iL-iargmil-L-arginil-L-lprolil-L-vialil-L-lizil-L-valitl-L-tirozil-L-prolil-L-valinamid. (Prop-Tyr-Ser-Nle-Glu-His-Phe-Arg-Try-Gly-Lys-Pro-Val-Gly-Lys-Lys-Arg-Arg-Pro-Val-Lys-Val-Tyr-Pro-Val-NH2 ). 1,6 g Frop-Tyr-Ser-Nle-NH-NH2 -t (4. példa) feloldunk 12 ml dimetilformamidban, hozzáadunk 4 ml vizet, —10°-ra hűtjük, hozzáadunk 2 ml 6 n sósavat, majd 280 mg nátriummitritet 5 percig —5°-on keverjük, hozzáadunk 300 ml 0,2 n káliumhidrogénkarbonát oldatot, és centri-15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 62 g H-Val-Gly-(CTB)Lys-('CTB)Lys^Arg-Arg-Pro-VaP(CTB)Lys-Val-Tyr-Pro-Val-NH2 • 3 Tos-OH-t feloldunk 300 ml piridinben és 300 ml acetonitrilben. Ezután hozzáadunk 57 g Trit- 25 -((OTBíGlu-íTritJH.is-PheHArg-Try-Gly-CCTB)Lys-Pro-íOH-it, és mikor imindeníf eloldódoítt, 0°-ra hűtjük, és hozzáadunk 28,6 g diciklohexilkarbodiimidet. 24 órai rázás után 20°-on a karbamidot leszűrjük, és az oldatot éterrel kicsapjuk, so A terméket ismételten metanolban oldjuk, és etilacetáttal kicsapjuk. 90 g Trit-(OTB)Glu~(Trit)His-Phe-Arg-Try-Gly-(CTB)Lys-Pro-Val-Gly-,(CTB)Lys-(CTB)Lys-Arg^Arg-Pro-Val-(CTB)Lys-Val-Tyr-Pro-Val- £5 -NH2 -tritoluolszulfonátot kapunk, amely bomlás közben 184°-on olvad. [a]20 o = —51° metanolban. 45 g Trit-(OTB)Glu-<Trit)His-Phe-Arg-Try-Gly^(CTB)Lys-Pro-Val-Gly-H(CTB)Lys-(CTB)Lys- 40 ^Arg-Arg-Pro-Val-'(CTB)Lys-Val-Tyr-Pro-Val-NH2 -3 Tos-OH-t feloldunk 500 ml 80%-os ecetsavban, és 2 óra hosszat 30°-on állni hagyjuk. Hozzáadunk 50 ml acetátfázisú Amberlit IRA—410-et, leszűrjük, a szűredéket vákuum- 45 ban bepároljuk, és a maradványt metanolban oldjuk. Éterrel kicsapva 40 g H-(OTB)Glu-(Trit)His-Phe-Arg-Try-Gly-<CTB)Lys-Pro-Val--Gly-(CTB)Lys-(CTB)Lys-Arg-Arg-Pro-Val-(CTB)Lys-Val-Tyr-Pro-Val-NH2 -ot kapunk, 50 amely 17'0°-on elbomlik. [a]20 D = —49° metanolban.
