154453. lajstromszámú szabadalom • Eljárás cserzőanyaggal kezelt, eritrociták stabilitásának fokozására és tablettázot eritrocita-készítmények előállítására
154453 6 A fenti módon kezelt eritrociták eléggé ellenállóképesek ahhoz, hogy adagolható egységekbe, pl. tablettákba sajtoljuk .őket. Erre a célra a szokásos segédanyagok használhatóik, csupán arra kell ügyelni, hogy ne alkalmazzunk az eritrocitákfcal vagy a hozzájuk kötődő antigénnel össze nem férő anyagokat. Az is nyilvánvaló, hogy nem alkalmazhatunk olyan segédanyagokat, amelyeik hátrányosan befolyásolják az antigénnek az eritrociitákboz való kötődését és olyanokat sem, amelyek észrevehető befolyást gyakorolnak a szándékolt immunokémiáli meghatározásra, tehát az alkalmazásra kerülő segédanyagoknak nem szabad észrevehetően megváltoztatniuk a szándékolt immunokémiai meghatározási reakció érzékenységét, megbízhatóságát és sebességét. Ha az előlkezelt, eritreeitákat és egy- vagy többféle segédanyagot tartalmazó keverék higroszkopitous, akkor előnyösen kis viszonylagos nedvességtartalmú {célszerűen tob. 20%) légkörben keverjük a további segédanyagokkal. Előnyösen olyan alkotáanyagokat választunk és olyan sajtolási körülményebet alkalmazunk, hogy biztosítsuk a tabletták rövid, pl. 3 percnél rövidebb idő -alatti szétesését. Az alkalmazható segédanyagok példáiként a következők említhetők: töltőanyagként szacharóz, mamiit, tejcukor és fcarfoamid, simítószerként bórsav, keményítő, Carbowax 40O0 és miagnéziumsztearát, a szétesést élősegítő anyagként pl. keményítő vagy alginsav. További segédanyagként az említett meghatározások céljaira szolgáló adalékok, minit foszifátok, pl. monoká'Iiumífoszfát vagy dmátriumfoszifát (pufSerként a tablettáikba! készített szuszpenzióhoz), továbbá náfcriumlklórid és valamely kelátképzőszer, mint etiléndiaminitetraecétsaiv-dinátriuimsó, valamint .albumin. Ezek a segédanyagok különösen a terhességi diagnosztikai reakció szempontjából előnyösek. A szükséges segédanyagokat száraz állapotban keverhetjük az előkezelt eritrotítákkal tablettázás előtt, előnyösebben azonban oly módon járhatunk el, hogy az oldható segédanyagokat együtt oldjuk és porlasztással megszárítjuk őket, azután keverjük össze a kezelt eritroeitákfcal; ilymódon nagymértékben homogén keveréket kapunk és egyben elkerüljük, hogy az eritrocilták a további kezelés során megsérüljenek a segédanyagok sorában szereplő durva kristályos alkotórészekkel való érintkezés következtében. Eljárhatunk olymódon is, hogy az eritrociták hőkezelését a tafolettázáshoz és a meghatározási módszerekhez szükséges valamenynyi segédanyag szárításával és hamogenizálásával kombináltan végezzük, az eiritrociták és a segédanyagok együttes szuszpenzióját vetve alá a parlasztásos szárításnak. Azt találtuk, hogy a HOG vizeletben való meghatározásához alkalmazandó reagens, amely érzékenyített eritrocitálkat, fosztfát-ipuífert, nátriumfcloridot, szacharózt, karbamidot, albumint. EDTAndinátriuimot és desztillált vizet tartal-10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 maz, igen előnyösen alakítható át homogén sajtolható porrá, ha az egész elegyet magasabb hőmérsékleten porlasztásos szárításnak vetjük alá; így a kezelés semmilyen észrevehető befolyást nem gyakorol a tablettazott porral végzett HCG-mleghatározások eredményeire. , Az oldhatatlan segédanyagok feldolgozása során különösen kell ügyelni arra, hogy ezek ne zavarják az így készített tablettákból kapott szuszpenzióval végzett meghatározás eredményeit. Oldhatatlan alkotórészek " könynyen befolyásolhatják az eritrociták leülepedési módját és ezáltal hátrányos befolyást gyakorolhatnak a meghatáirozási módszer pontosságára. Az egyes meghatáirozási műveletekhez általában egy tablettát alkalmazunk, amely a meghatározáshoz szükséges mennyiségű eritrocitát és egyéb segédanyagot tartalmaz. Eljárhatunk azonban oly módon is, hogy egy nagyméretű tablettából törzs-szuszpenziót készítünk, amely a meghatározások egész sorozatához elegendő. A találmány szerinti eljárás egyaránt alkalmazható az eritroeitáknak az antigénnel váló érzékenyítés előtt vagy az érzékenyítés után történő kezelésére. Ha az /eritrocitáfcat érzékenyítetlen állapotban kezeltük a találmány szerinti eljárással, akkor a kapott tablettazott vagy poralakú eritrodtakészítmény újbóli szuszpendálás után kapcsolható az antigénnel. A találmány szerinti eljárással kezelt érzékenyítétlen eritrociták igen stabilak és könnyen kezelhetők, jól használhatók kiinduióanyagként az eritrociták alkalmazásával történő immunokémiai meghatározásokhoz való reagensek gyártására, különösen a meghatározandó komponens vagy a megfelelő antitest hordozójaként. A találmány-szerinti eritrocita-kezelési eljárást, valamint a kezelt eritroicitákből sajtolandó tablettáik és egyéb szilárd adagolási egységek előállítását közelebbről az alábbi példák szemléltetik: 1. példa: Juh-eritroeitákat formaiinnal és tanninnal való kezelés után emberi chorion gonadotropinnal érzékenyítettünk, majd az alább felsorolt segédanyagokkal szuszpendáltuk őket. A szuszpenzió az alábbi összetételű volt: eiritiroeitálk 2,í7 tí/tf«/0 monoikáliumfoszfát 0,25 g dinátrium'foszfát • 2 H2O 1,202' g nátriumklorid 0,5625 g szacharóz 6,0 g eti'léndiamintetríaecetsav-dinátriumsó 0,2 g toanbamid 10,0 g desztillált vízzel feltöltve 1001 ml-re. Ezt a szuszpenziót „Niro" porlasztószárítóval száraz porrá alakítottuk. A szuszpenziót kb. 3
