154416. lajstromszámú szabadalom • Peptidzerű tripszin-inhibitor, és eljárás annak előállítására

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1966. IV. 12. , . (FA—625) Német Szövetségi Köztársaság-beli elsőbbsége: 1965. IV. 12. Közzététel napja: 1967. IX. 22. Megjelent: 1968. VII. 31. 154416 Szabadalmi osztály: 30 h 1—8 Nemzetközi osztály: A 61 k Decimái osztályozás: Feltalálók: Werle Eugen vegyész, Trautschold Ivar vegyész, Fritz Hans vegyész, München, Német Szövetségi Köztársaság ' Tulajdonos: Farbenfabriken Bayer AG., Leverkusen, Német Szövetségi Köztársaság Peptidszerű tripszin-inhibitor és eljárás annak előállítására A találmány tárgya új peptidszerű tripszin-ánttibitor, valamint eljárás annak elkülönítésére és tisztításiára emlősök hasnyálmirigyébőil. A találmány tárgya továbbá eljárás az új inhibitort tartalmazó gyógyászati készítmények elő- 5 állításaira. Ismeretes, hogy a szarvasmarha-hasnyálmirigye tripszin-inhilbiiltorokat tartalmaz; Így pl. Kazal marhahasnyá'lmirigyből egy tripszin- és trombinrdnlhibitort különített el (vö. L. A. Ka- 10 zal, D. S. Spicer éfe R. A. Birahinsky, J. Am. Chem. Soc 70, 3034 [Ü948]). Az is ismeretes, hogy egy inhibitor különíthető el marha-szervekből, így parotiszból, májból, tüdőből, lépből, nyirokmirigyekből és hasnyálmirigyből, 15 amely nem csupán a trinszint, hanem a kimotripszint, a kallikreint és a plazmint is inhibitálja (1084 433 sz. német szabadalom). Megál- . lapították, hogy ez az inhibitor azonos M. Kunütz és H. Nortihorp inlhibitoráVal (J. Gen. Phy- 20 siol. 19, 99il [1936]). I Most azt találtuk, hogy emlősállatok hasnyálmirigyéből el lehet különíteni egy eddig ismeretlen, polipeptidszerű tripszin-inhibitort, amely 25 nem gátolja a kimotiripszint, a kallikreint, a tromlbitnt és a plazmint. Emlősállatok hasnyálmirigyei megfelelő kiindulási anyagok az új inhibitor elkülönítéséhez. Különösen megfelelő a disznók hasnyál- 30 mirigye, azonban megfelel e célra a kutyák, tehenek, juhok és lovak hasnyálmirigye is. -. Az új inhibitort az említett kiindulási anyagokból ismert módszerrel lehet elkülöníteni. Célszerű a hasnyálmirigyet proteinmentesítő anyaggal magas hőmérsékleten homogenizáüni, majd elkülöníteni az inhibitort tartalmazó oldatot. Az inhibitort kationcserélőkkel közvetlenül adszorbeáltatni lehet az oldatból, adott esetben előzetes sótalanítás után, majd frakcionált derítéssel tovább lehet tisztítani. Az eluálást lúgos oldatokkal vagy semleges só-oldattal végezhetjük. Megfelelő >kationcserélők, pl. a karfooxi-metilcellulóz, a szullfo-etilcellulóz, a foszforilezett cellulóz és a kationcserélő gyanták. Az új inhibitort így nagy tisztasági fokkal és jó kitermelésekkel nyerjük. A taláimány szarinti inhibitor zóna-elektroforézissel végzett kezelése esetén több különálló aktív frakciót mutat, P. Andrews (Biotíheim. J. 91, 222 [1964]) -módszere szerint gélszűréssel végzett molekulasúly-meghatározás 6800 és 7600 közötti értékeket mutat. A találmány szerinti új inhibitor fehér por, 210 C° fölötti bomlási hőtoérséklettel; vízben és sóoldátokban kismértékben oldható. Ultraibolya és infravörös spektrumát a csatolt rajzon mutatjuk be. Az 1. ábra az inifra-154416