154162. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a tetraciklin-csoportba tartozó tiszta antibiotikumok előállítására
17 vábbi 600 ml metanolt desztillálunk le. A desztillációs maradékhoz 10%-os nátriumhidroxidoldatot adunk 3,8 és 4,0 közötti pH-érték4 eléréséig, majd izoelektromos tetraciklin kristályaival beoltjuk. A kapott elegyet 2 óra hosszat 5 keverjük, majd kristályosítás céljából hűtőszekrényben 14 óra hosszat állni hagyjuk. A levált kristályos tetfaciklin-bázist n-butanollal, majd vízzel mossuk és levegőn megszárítjuk. Ily módon 92%-os termelési hányaddal kapjuk a 860 10 gamma/mg tisztaságú tetraciklint. 11. példa A 9. példa szerinti módon kapott 5 liter fermentációs levet a 10. példában leírt módon 15 dolgozzuk fel, de azzal az eltéréssel, hogy a lecsapáshoz alkalmazott nátrium-pairavolframátot 0,5:1 és 4,0:1 között változtatott mennyiségi arányban (Na2 W0 4 • 2H2 0-ra számítva) adjuk hozzá. Az így kapott eredményeket az alábbi 20 táblázatban foglaltuk össze. Táblázat Na2 W0 4 -2H 2 0 : Hozam Tisztasági fok 25 : tetraciklin arány % gamma/mg 0,5:1 38,5 890 0,7:1 59,4 870 0,9:1 75,4 820 1,0:1 80,2 840 1,2:1 91,5 860 1,3:1 92,0 840 1,5:1 89,0 870 1,7:1 78,0 710 2,0:1 76,0 730 2,4:1 72,0 700 2,8:1 77,0 650 3,0:1 70,2 690 3,5:1 65,0 700 4,0:1 63,5 700 A táblázatban megadott hozamok a kapott végtermékre, nem pedig a fermentációs léből 45 elkülönített tetraciklinre vannak számítva. 12. példa 2 liter 9. példa szerinti fermentációs levet a 10. példában leírthoz hasonló módon dolgozunk 50 fel, csupán azzal az eltéréssel, hogy az oldat pH-értékét a nátrium-paravolframáttal tötrénő lecsapás előtt 0,5 és 7,0 között változtatott pH-értékekre állítjuk be. A kapott eredményeket az alábbi táblázatban foglaltuk össze. 55 Táblázat Hozam Tisztasági fok % garnmá/riig. 60 0,5 95,0 880 0,7 94,3 890 0,9 93,5 870 18 Hozam Tisztasági fok % gamma/mg 1,1 95.0 800 1.3 93,0 850 1,5 92,0 860 1,7 93,0 850 2,0 92,0 840 2,5 89,0 820 3,5 70,0 700 4,0 70,0 750 4,5 58,0 700 5,0 40,0 700 6,0 40,0 580 7,0 25,0 380 13. példa 10 liter szennyezett vizes oldatot, amely 800 gamma/ml brómtetraciklint tartalmaz, 10%-os sósavval 2,0 pH-értékre savanyítunk, 12 g Na2 W0 4 • 2H2 0-t adunk hozzá, majd 1/2 óra hosszat élénken keverjük. A brómtetraciklin volframát-komplexéből álló csapadékot 2 óra hosszat állni hagyjuk, majd lszűrjük. Az így elkülönített csapadékot 300 ml vízben szuszpendáljuk, a szuszpenzióhoz 9,0 pH-érték eléréséig 10%-os nátriumhidroxidoldatot adunk, majd gyorsan leszűrjük. A szűredékhez 2,0 pH-érték eléréséig 10%-os sósavat adunk, az elegyet 4 óra hosszat állni hagyjuk, majd leszűrjük. A csapadékot 400 ml 10%-os sósavval megsavanyított vízzel mossuk. A mosott csapadékhoz 9,5 pH-érték eléréséig 10%-os nátriumhidroxidoldatot adunk, majd az így kapott oldatot 20%-os sósavval 7,5 pH-értékre állítjuk be, 20 g szilárd ammóniumkloridot és rögtön ezután 150 ml 20%-os kalciumkloridoldatot adunk hozzá. Az elegyhez keverés közben 10%-os nátriumhidroxidoldatot adunk 8,5 pH-érték eléréséig majd további 1/2 óra hosszat keverjük. A csapadékot ezután leszűrjük, 200 ml desztillált vízzel mossuk és vákuumban, 30 mm Hg-oszlop nyomás alatt, 30—45 C° hőmérsékleten megszárítjuk. A száraz csapadékot 20 ml tömény sósavval megsavanyított 800 ml metanollal extraháljuk. A metanolos kivonatot leszűrjük és 30 mm Hg-vákuumban 30 C° hőmérsékleten 200 ml térfogatra töményítjük be. A bepárlási maradékot 100 ml desztillált vízzel hígítjuk, majd erős keverés közben 4,5 és 5,0 közötti pH-érték eléréséig elégendő 10%-os nátriumhidroxidoldatot adunk hozzá, azután 1 óra hosszat állni hagyjuk az elegyet. A levált csapadékot leszűrjük, desztillált vízzel mossuk és liofilizálás útján Szárítjuk. Ily módón 86% hozammal kapjuk a 750. gamma/mg tisztaságú brómtetraciklin-bázist. 14. példa 10 liter szennyezett vizes oldatot, amely 1000 gamma/ml brómtetraciklint tartalmaz, a 13. 9
