154162. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a tetraciklin-csoportba tartozó tiszta antibiotikumok előállítására
154162 19 20 példában leírthoz hasonló módon dolgozunk fel, csupán azzal az eltéréssel, hogy a vákuum-desztilláció után kapott metanolos maradékot 20 g nátriumkloriddal beoltjuk, majd 15 ml tömény sósavat adunk hozzá és éjjelen át állni hagyjuk. A brómtetraciklin-hidrokloirid levált kristályait hideg vízzel mossuk és vákuumban szárítjuk. Ily módon 80%-os termelési hányaddal kapjuk a 700 gamma/mg tisztaságú terméket. 15. példa 10 liter fermentációs levet, amely 980 gamma/ ml demetil-klórtetracikünt tartalmaz és amelyet az 1. példában leírthoz 'hasonló módon mentesítettünk a micéliumtól, 10 g kálium-paravolframáttal kezelünk. A kálium-palavolframát hozzáadása után a pH-értéket 10%-os sósavval 1,5-re állítjuk be. Az elegyet 4 óra hosszat állni hagyjuk, majd leszűrjük. A csapadékot 200 ml 1,5 pH-értékre savanyított vízzel mossuk, 300 ml desztillált vízben szuszpendáljuk és 8,5 pH-érték eléréséig 10%-os nátriumhidroxidoldatot adunk lassan hozzá. Ezután szűrünk és a szűredéket 10%-os sósavval 7,5 pH-értékre állítjuk be, 30 g szilárd ammóniumkloridot és 65 ml 20%-os kalciumkloridoldatot adunk hozzá. Ezután élénk keverés közben 20%-os sósavat adunk az elegyhez 6,5 pH-érték eléréséig. A levált demetilklórtetraciklin-kalciumsót leszűrjük és 40 ml vízzel mossuk. A szűredéket a volframát későbbi regenerálása céljából félretesszük. A mosott kalciumsót vákuumban megszárítjuk és 20 ml tömény sósavval megsavanyított 1,5 liter metanollal több részletben extraháljuk. A metanolos kivonatokat egyesítjük, 8 g aktívszén hozzáadása után 40 C° hőmérsékletre melegítjük és gyorsan leszűrjük. A csapadékként kapott aktívszenet 50 ml megsavanyított metanollal utánamossuk. A metanolos szűredéket egy Amberlite IRC 50 ioncserélőt tartalmazó oszlopon folyatjuk keresztül 10 ml/perc átfolyatási sebességgel. Az oszlopot 100 ml megsavanyított metanollal mossuk. Az oszlopról távozó folyadékot vákuumban 400 ml rétfogatra pároljuk be, majd 10 ml tömény sósavat adunk hozzá és tovább pároljuk be 100 ml térfogatig, ezután a maradékot 24 óra hosszat állni hagyjuk. A demetilklórtetraciklin-hidroklorid levált kristályait metanollal mossuk és leszűrjük. Ily módon 86%-os termelési hányaddal kapjuk a 680 gamma/mg tisztaságú terméket. 16. példa 5 liter szennyezett vizes oldatot, amely 1200 gamma/ml dezoxitetraciklint tartalmaz, a 15. példában leírthoz hasonló módon dolgozunk fel, csupán azzal az eltéréssel, hogy az antibiotikum volfrám-komplexének lecsapására 16 g Na2 W0 4 • 2H2 0-t alkalmazunk. 5 91%-os termelési hányaddal kapjuk a 740 gamma/mg tisztaságú terméket. Szabadalmi igénypontok: 10 1. Eljárás a tetraciklin-csoportbeli antibiotikumok kinyerésére a micéliumtól savanyítás és szűrés útján mentesített fermentációs levekből vagy a tetraciklin-csoportbeli antibiotikumot tartalmazó szennyezett vizes oldatokból, 15 azzal jellemezve, hogy a fermentációs léhez ill. a szennyezett oldathoz volfrámsavat vagy valamely volfrámsavas sót adunk az antibiotikum mennyiségéhez viszonyítva 0,5:1 és 4,0:1 közötti, előnyösen 1,2:1 és 1,5:1 Na2W0 4 • 2H2 0-ra szá-20 mított mennyiségi arányban, 0,5 és 7,0 közötti előnyösen 1,0 és 2,5 közötti pH-értéknél, majd a szűrés útján elkülönített csapadékhoz 8,5 és 10,0 közötti pH-érték eléréséig (célszerűen 10—20%-os) nátriumhidroxidoldatot adunk és 25 a kapott oldatból az antibiotikumot önmagában ismert módon, előnyösen kalcium- és/vagy magnéziumsók és/vagy ioncserélők segítségével elkülönítjük. 2. Az 1. igénypont szerinti eljárás kiviteli 30 módja, azzal jellemezve, hogy a kapott 8,5 és 10,0 közötti pH-értékű oldathoz 7,5 pH-érték eléréséig (célszerűen 10—20%-os) sósavoldatot adunk, majd 1:1—1:3 súlyarányban szilárd ammóniumkloridot és 1:1—1:4 súlyarányban 35 20%-os kalcium- vagy magnéziumkloridoldatot adunk hozzá és a szűrés útján elkülönített csapadékból az antibiotikumot szerves oldószerrel, mint metanollal vagy metilizobutilketonnal extraháljuk. 40 3. A 2. igénypont tezerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy az antibiotikumot tartalmazó metanolos kivonatot egy kationcserélő gyantával töltött oszlopon folyatjuk keresztül. 45 4. Az 1. igénypont szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy a 8,5—10,0 pH-értékű oldatot kationcserélővel kezeljük és az ioncserélőn megkötött antibiotikumot 1 n és 4 n közötti töménységű ammóniumhidroxidoldat-50 tal eluáljuk, majd az eluátumot anioncserélővel kezelj ük. 5. A -2—4. igénypontok bármelyike szerinti eljárás kiviteli módja, azzal jellemezve, hogy a 55 tetraciklin-icsoportbeli antibiotikum kalciumvagy magnéziumsójának leszűrése során kapott szűredékből vagy a 4. igénypont szerint az első ioncserélőről lefolyó folyadékból a volfrámsavat önmagában ismert módon, pl. tömény sósav 60 segítségével visszanyerjük. 2 rajz, 1 képlet A kiadásért felel: a Közgazdasági és Jogi Könyvkiadó Igazgatója. 6708506. Zríny i(T) Nyomda, Budapest V., Balassi Bálint utca 21—23. 10
