153084. lajstromszámú szabadalom • Eljárás egy új polipeptid előállítására
153084 10 Liz-(KTB)Liz-(KTB)Liz-(KTB)Liz-Pro-Val-(KTB)Liz-Val-Tir-Pro-Val-NH2-t kapunk. Olvadáspontja 198°. 4. példa: 5 Tiritil-O-terc.-butil-L-glutamil-rm-tritil-L-hisztidil-L-fenilalanil-L-.arginil-L-triptofaml-glicil-«-N-karbo-terc.-butoxi-L-lizil-L-prolin-2,4,5-triklórfenilészter 10 [Trit-Glu(OTB)-(Trit)ffisz-Fe-Arg-Tri-Gli-(KTB)Liz-Pro-OCF] (C ábra) 300 g KBO-(N02 )Arg-Tri-Gli-OMe-t feloldunk 15 5000 ml vizes dioxánban (2 :8), hozzáadunk 720 ml n nátronlúgot, 1 óra hosszat 20°-on állni hagyjuk, beleöntjük 16 liter 0,05 n kénsavba, a csapadékot leszívatjuk, vízzel, alkohollal, dietiléterrel és petroléterrel mossuk, és megszá- 20 rítjük. 285 g KBO-(N02 )Arg-Tri-Gli-OH-t kapunk (op. 225°; [«]20 D = —14° dimetilformamidban), és ezt 3500 ml abszolút piridinben oldjuk, 250 g tri(2,4,5-t!riklórfenil)-foszfitot adunk hozzá, 16 óra hosszat 20°-on keverjük, bepároljuk, 25 ecetéterben oldjuk, híg kénsavval mossuk, megszárítjuk, és bepároljuk. A maradványt ecetéterdietiléterből kikristályosítjuk, és így 370 g KBO-(N02 )Arg-Tri-Gli-OCF-et kapunk. Olvadáspontja 124°. [a]2oű= _9° dimetilformamid- 30 ban. Az így kapott tripeptidésztert 700 ml dimetilformamidban oldjuk, 220 g H-(KTB)Liz-Pro-OH-t (3. példa) adunk hozzá, 16 óra hosszat 20°-on keverjük, dietiléterrel kicsapjuk, színv 35 jük, a csapadékot vizes eoetéterben oldjuk, n citromsavval mossuk, megszárítjuk és bepároljuk. A maradványt kétszer ecetéterből átkristályosítjuk. 370 g KBO-(N02 )Arg-Tri-Gli-(KTB)Liz-Pro-OH-t kapunk. Olvadáspontja 142°. 40 [a]20 D =—20° dimetilf ormamidfaan. 245 g KBO-(N02 )Arg^Tri-Gli-(KTB)Liz-Pro-OH-t féloldunk 450 ml ecetéterben, 50 ml vizet és 50 g palládiumszenet (10%-os) adunk hozzá, hidrogénezzük, szűrjük, bepároljuk, vízben old- 45 juk, liofilizáljuk, és nátronlúg felett megszárítjuk. 135 g H~Arg-Tri-Gli-(KTB)Liz-Pro-OH-t kapunk. [«]20 D =—9° 95%-os ecetsavban. 457 g H-Hisz-Fe-OMe.2 HBr és 266 ml trietilamint 1000 ml dimetilformamidban oldunk, 10 percig 50 0°-on keverjük, szűrjük, a szüredékhez 496 g KBO-Glu(OTB)-OCF-et adunk, és 16 óra hoszszat 20°-on állni hagyjuk. A dimetilf ormamidot elpárologtatjuk, a maradványt eoetéterben oldjuk, híg vizes ecetsavval és n nátriumhidrogén- 55 karbonát oldattal mossuk, nátriumszulfát fölött megszárítjuk, bepároljuk, és a maradványt ecetéterből kikristályosítjuk. 338 g KBO-Glu(OTB)-Hisz-Fe-OMe-t kapunk. Olvadáspontja 183°. [«]20 D = —21° dimetilformamidban. 60 Az ily módon kapott tripeptidet 3000 ml metanolban oldjuk, 50 g 10%-os palládíumszén jelenlétében hidrogénezzük, szűrjük, bepároljuk, a maradványt 1500 ml metilénkloridban oldjuk, 0°-ra hűtjük, 140 ml trietilamint, majd 270 g gj> trifenilklórmetánt adunk hozzá, 16 óra hosszat. 20°-on állni hagyjuk, híg ecetsavval, vízzel és n nátriumhidrogénkarbonát-oldattal, mossuk, megszárítjuk, és bepároljuk. A maradványt dietiléterben oldjuk, és petroléterrel kicsapjuk. 483 g Trit-Glu(OTB)-(Trit)Hisz~Fe-OMe-t kapunk (olvadáspontja bomlás közben 80°), amelyet 100 ml metanolban oldunk, 50 ml hidrazint adunk hozzá, 24 óra hosszat 20°-on állni hagyjuk, 500 ml-ra bepároljuk, 5000 ml dietiletert adunk hozzá, 0,1 n konyhasóoldattal mossuk, megszárítjuk, 500 ml-re koncentráljuk, és petroléterrel kicsapjuk. 390 g Trit-Glu(OTB)-(Trit)~ Hisz^Fe-NHNH2 -t kapunk. Olvadáspontja bomlás közben 80°. [«]20 D = —14° dimetilformamidban. 41,6 g Trit-Glu(OTB)-(Trit)Hisz-Fe-NHNH2 -t feloldunk 100 ml dimetilformamidban és 100 ml izopropanolban, ä —10°-ra hűtjük, és 40 ml 4n sósavat, majd keverés közben 9 ml 5n nátriumnitrit oldatot adunk hozzá. 5 perccel később hozzáadjuk 28 ml trietilamin és 1000 ml jeges víz keverékéhez, leszívatjuk, a csapadékot ecetéterben oldjuk, telített konyhasóoldattal mossuk, megszárítjuk, 0°-on bepároljuk, a maradványt 100 ml dimetilformamidban oldjuk, 26 g H^Arg-Tri-Gli-(KTB)Liz-Pro-OH.3 AcOH-t és 4,5 ml trietilamint adunk hozzá, 16 óra hosszat 0°-on' állni hagyjuk, 1000 ml ecetétert adunk hozzá, 0,5 n ecetsavval, vízzel és 0,5 n piridinnel mossuk, bepároljuk, a maradványt 100 ml ecetéterben oldjuk, és dietiléterrel kicsapjuk. 46,4 g Trit-Glu(OTB)-'(Trit)Hisz-Fe-Arg-Tri-Gli-(KTB)Liz^Pro-OH-t kapunk. Olvadáspontja 180°. [a]2 ° D =—13° dimetilformamidban. Az így kapott pepiidet feloldjuk 200 ml pirídinben, —20°ra hűtjük, 30 ml dioxános n sósav oldatot adunk hozzá, 5 percig —20°-on keverjük, 7,8 ml trietilamint adunk hozzá, térfogata'felére koncentráljuk, 30 g tri-(triklórfenil)-foszfitot adunk hozzá, 16 óra hosszat 20o-on állni hagyjuk, bepároljuk, a maradványt dietiléterrel feldolgozzuk, ecetéterben oldjuk, dietiléterrel kicsapjuk, szűrjük, és megszárítjuk. 51,6 g Trit-Glu(OTB)-(Trit)Hisz-Fe-Arg-Tri-Gli-(KTB)Liz-Pro-OCF. .HCl-t kapunk. Olvadáspontja bomlás közben 170°. [a]20D = _20° dimetilformamidban. 5. példa: iL-szeril-L-tirozil-L-iSzeril-L-norleucil-L-'gíutamil-L^hisztidil-L-fenilalanil-L-arginil-L-triptofanil-glicil-L-lizil-L-proiil-L-valil-glicil-L-lizil-L-lizil-L-lizil-L-lizil-L-prolil-L-valil-L-lizil-L-valil-L-tirozil-L-prolil-L-calinamid. (H-Szer-Tir-Szer^Nle-Glu-Hisz-Fe-Arg-Tri-Gli-Liz-Pro-Val-Gli-Liz-Liz-Liz-Liz-Pro-Val-Liz-Val-Tir-Pro-Val-NH2 ) (D ábra) 174 g Trit-Szer-OH-t és 117 g H-Tir-OMe-t feloldunk 2000 ml acetonitril, 1000 ml kloroform és 50 ml dimetilf ormamid elegyében, —10°-ra hűtjük, hozzáadunk 124 g diciklohexilkaríbodiimidet, és 5 óra hosszat 20°-on keverjük, Szűr-5
