152716. lajstromszámú szabadalom • Eljárás és készülék szövettenyésztéshez sejtek előállítására

3 152716 4 használhatóságát nagymértékben csökkentik, vagy ezeket esetleg teljesen használhatatlanná teszik. A szervfragmentumokat gézen való átszűréssel távolítják el a szuszpenzióból, ami — a legnagyobb sterilitás mellett is — ismét szennyezésre vezet. Ennek az eljárásnak hátrányos tulajdonsága az is, hogy a munka termelékenységének növeléséhez nem elég egyetlen állatfajból készült iszövettenyészet. Többféle szövettenyészet előállítása a munkaigényes „kézi" módszerrel sók embert köt le. A sejteket előállító személyek állandó lekötöttségének csökkentése céljából készítettek már olyan készülékeket is, amelyek a szervek enzymatikus szétválasztásával készített sejtek előállításának folyamatát részben önműködően végezték. Így ismert olyan készülék, amelynél a sejtszuszpenziónak szervdarabkákból való szennyezésmentes elkülönítésére az emésztőedény aljára forrasztott perforált üvegen át szivattyúval szívják el a szervdarabkákból felszabadault sejteket. A perforált üveg azonban a tapasztalatok szerint nagyon gyorsan eltömődik. A többi műveletelemet ennél a készüléknél is kézzel végzik. Ismert olyan készülék is, amelynél felülről benyúló üvegbottal keverik az enzimben levő szervdarabkákat és sejteket és az emésztőedénynek alján üveggyöngy-réteg van szűrőként elhelyezve. A szűrést az üveggyöngyök aránylag kielégítően végzik, azonban jelentős mennyiségű szervdarabka jut az üveggyöngy-rétegbe és ezek további felhasználás céljaira elvesznek, tehát nagy az anyagveszteség. Már próbálkoztak olyan eljárással, illetve olyan készülékkel is, amely különféle szűrőrendszereket, szívómotorokat, mérlegelő szerkezeteket, centrifugát, stb. tehát bonyolult és drága gépszerelvényeket használ arra a célra, hogy a szervfragmentumok szétemésztéséhez, illetve a sejtek előállításához szükséges munka mennyiségét csökkentsék, azonban ezek a bonyolult és drága készülékek is a műveletnek csak egy részét végzik önműködően, és az állandó felügyelet továbbra is szükséges a munka sikerességének biztosításához. A találmány célja sejteknek enzimatikus szervdarabkák-szétemésztésével való előállítására olyan eljárás és készülék létesítése, amelyeknél a szervdarabkák felaprításán és emésztőedénybe helyezésén kívül az egész folyamat és annak minden műveleteleme, tehát az enzim megfelelő mennyiségben és megfelelő időben történő adagolása, a keverés, a szűrés, a szétválasztott sejtek emésztőedényből gyűjtőedénybe való átöntése önműködően megy végbe. A találmány szerinti eljárás a kitűzött feladatot azzal oldja meg, hogy a szervdarabkákat mágneses keverőre erősített csonkakúp vagy henger alakú forgó szita külső felülete melletti emésztőedény-térbe helyezzük, a szitával meggátoljuk a szervfragmentumoknak szita belsejébe jutását, centrifugális erővel meggátoljuk a szervfragmentumoknak a forgó szita felületére való lerakódását és ezáltal a szitalyukak eltömődését, az emésztőedénybe cseppek formájában adagolt enzimmel az enzim folyadékszintjét emeljük, meghatározott idő után az emelkedő folyadékszinttel az emésztőedény belső légterét 0 a külső légtérrel összekötő nyílást elzárva a belső légteret összenyomjuk és ezáltal a forgó szita belső terébe benyúló végű, másik végével a szabad légtérrel kapcsolatban levő szivornyaszerű csőben az emésztőedényben keletkező 10 túlnyomással a folyadéknivót az átfordulási pontig emeljük, ezáltal a tisztán csak sejteket tartalmazó szuszpenziót a csövön keresztül önműködően és előre beállított adagmennyiségben a gyűjtőedénybe folyatjuk és a sejteket a gyűj-19 tőedényben ülepítjük. A találmány szerinti eljárás foganatosítására szolgáló készülék jellemzője, hogy az emésztőedény alján forgó mágneses keverőre erősített, előnyösen kúp- vagy hengeralakú szitája, a 20 szita belsejébe benyúló végű, az emésztőedényből kinyúló végével a szabad légtérrel közlekedő, alul hosszirányú réssel vagy lyuksorral ellátott légcsöve, a légcsövön a légcső falában levő rést vagy lyuksort légtömören lezáró, hossz-25 irányban eltolható és beállított helyzetében rögzíthető zárószerve, a légcső belsejében a forgószita belsejébe benyúló végű, másik végével a gyűjtőedényben az emésztőedény aljánál alacsonyabb szinten végződő és szivornyasze-30 rűen kialakított elszívócsöve és a gyűjtőedénynek rugós kibocsátószelepe van. A találmányt a rajzokon vázolt készülékkiviteli példa felhasználásával ismertetjük. Az 1. ábra a találmány szerinti készülék 35 vázlata. A 2. ábra a külön kirajzolt légcső és leszívócső nagyított méretarányú vázlata. A 3. ábra a gyűjtőedény alján levő szelep vázlata. 40 Az 1. ábrán vázolt készüléknél az enzimet az 1 emésztőedénybe az e, fölött felfogott 2 enzimesedényből a 3 csövön keresztül csepegtetjük. A 3 csőben valamilyen ismert zárószerkezetet alkalmazunk, amely zárószerkezet segítségével 45 vagy a cső keresztmetszetét szűkítjük le a kívánt mértékben az időegységenként elérni kívánt cseppszámnak megfelelően, vagy egyéb ismert adagolószerkezetet iktatunk a 3 csőbe. A 3 cső az 1 emésztőedény 4 dugóján keresztül 50 nyúlik be az emésztőedénybe. Az emésztőedény az 5 mágneses keverőmotor fölött van elhelyezve és az 5 motor az emésztőedény alján levő 6 permanens mágnestestet forgatja. A 6 mágnestest tartja forgásban az 55 1 emésztőedényben levő enzim-folyadékot. A 6 mágnestestre pl. a perforált lemezekből kiképzett 7 szita van erősítve, amely az 1. ábrán vázolt kivitelben felfelé szűkülő csonkakúp alakú. A 7 szita felső nyitott végén keresztül a 8 GO légcső és az ennek belsejében elrendezett 9 elszívócső alsó vége nyúlik be a 6 mágnestest fölé. A 9 elszívócső felül görbített része ki van vezetve a 8 légcsőből és lefelé van hajlítva úgy, hogy a 9 elszívócső alsó vége az 1 emésztőedény 65 alatti szinten elhelyezett 10 felfogóedénybe nyú-2