152716. lajstromszámú szabadalom • Eljárás és készülék szövettenyésztéshez sejtek előállítására
152716 lik be a 11 dugón keresztül. A 8 légcső felső vége a szabad légtérrel kapcsolódik, mégpedig a 9 elszívócső legfelső részénél magasabb szinten. A 8 légcső 7 szitába benyúló alsó végén alkotóirányú rés van. A rés fölött a 8 légcső kerületét körülfogó. 12 gyűrű van elrendezve, amely a 8 légcső hosszirányában eltolható és 'beállított helyzetében rögzíthető. A 12 gyűrű a 8 légcső alján levő 13 rést úgy tudja lefedni, hogy a 12 gyűrű és a 8 légcső között nem tud levegő hatolni a 13 résbe, tehát a 12 gyűrű lég' tömören szorul a 8 légcsőre. A készülék a következőképpen működik: Az 1 emésztődényből a 4 dugót és ezzel együtt a 8 és 9 csöveket kiemelve a 7 szita és az 1 emésztőedény oldalfalai közé a szokásos módon mosott és darabolt szerv-fragmentumokat behelyezzük. A szerv-fragmentumokból semmi nem juthat a 7 szita belsejébe. Ezután a 4 dugót a 8 és 9 csövekkel együtt helyükre visszatéve megnyitjuk a 3 csövön levő áteresztőnyílást és ezzel a szokott módon enzimet adagolunk a szervfragmentumokra. Azután elindítjuk az 5 keverőmotort. és az enzimadagolást tovább folytatjuk. A folyamat kezdeti szakaszában az enzimcseppek 1 emésztőedénybe jutásának eredményeként nem jön létre nyomásnövekedés, mert az enzimeseppek a levegőt ki tudják szorítani a 13 résen keresztül. Azonban amikor az enzimfolyadék szintje olyan magasra emelkedett már az 1 emésztőedényben, hogy elzárja a 13 rést, azaz a 13 rés legfelső részeinél is magasabb lesz, ettől az időtől kezdve az 1 emésztőedénybe cseppenő enzimeseppek nyomásnövekedést okoznak. Az enzim feletti levegő összenyomódik, minek eredményeként a külső légtérrel összeköttetésben leyő 8 légcsőben és a 10 felfogóedénybe torkolló külső végű 9 elszívócsőben az enzimfolyadék felső szintje emelkedik. Amikor az enzim felső szintje a 8 és 9 csövekben eléri a 9 leszívócső 14 visszahajlítási pontját, akkor a szivomyaszerűen kialakított 9 leszívócsőben a folyadékoszlop súlya alatt megindul a sejteket tartalmazó enzim-folyadék 10 felfogóedénybe áramlása. A folyadéknak 9 leszívócsövön való kiáramlása folytatódik akkor is, amikor az 1 emésztőedényben az enzim felszíne lefelé haladtában újból eléri a 13 rést, mert az áramlás a 9 elszívócsőben mindaddig folytatódik, amíg a csökkenő folyadéknivó az 1 emésztőedényben el nem éri a 9 élszívócső alsó bemeneti nyílását. Így az 1 emésztőedény méreteinek, a 8 és 9 csövek alsó bemeneti nyílása magasságának, továbbá a 13 rés magassági helyzetének megfelelő beállításával, valamint az enzimeseppek méretének és az időegységenkénti cseppszámnak beállításával meghatározhatók a szétemésztési folyamatot befolyásoló idő és egyéb jellemzők, továbbá az 1 emésztőedényből egy elszívásra eltávolított enzim-folyadék menynyisége és az elszívások közötti idő. A 10 gyűjtőedényben a sejtek leülepednek. A 10 gyűjtőedény alsó kúpos végéből kinyúló 15 csőbe a 16 szelepülés helytállóan Van beerősítve. A 16 szelepülésre támaszkodik a 17 10 szelepfej, amelynek 18 szára menettel csatlakozik a 15 csőben eltolható 19 csőbe erősített 20 tartógyűrűvel összefüggő 21 anyarészhez. A 17 5 szelepfejet a 22 rugó szorítja a 16 szelepülésre. A 19 csőre erősített 23 burkolatot a 24 fedővel, illetve feldolgozó edénnyel felfelé nyomva a 17 szelepfej a 16 szelepülésről felemelkedik és a sejtek a keletkezett nyíláson keresztül a 23 burkolat terébe ömlenek anélkül, hogy közben a szabad légtérrel közvetlenül érintkeznének. A találmány szerinti eljárás és készülék előnyei a következők: A sejtek szétemésztési folyamatát a szervdarabkák emésztőedénybe való beadagolásától kezdve a- sejtek felhasználásáig zárt térben végezzük, tehát a környezettől semmiféle szenynyezés nem juthat a sejtekhez. A folyamat a beadagolás után az ülepítésig bezárólag teljesen önműködően megy végbe, tehát még felügyelet-20 re sincs szükség. A szűrés tökéletesen megbízható és bármilyen hosszú üzemidő után is hatásos, mert a forgó szitán fellépő és a szervfragmentumokra ható centrifugális erő nem engedi meg, hogy a szervdarabkák eltömjék a ,?-5 szita nyílásait. A szervdarabkákból semmi nem vész kárba, tehát a drága nyersanyag teljes egészében felhasználható. A szétemésztési folyamat közben a sejtek nem károsodhatnak, mert a szétemésztési idő és hozzá az enzim-30 mennyiség és az egyéb tényezők pontosan beállíthatók és az automatikusan dolgozó készülék a beállított időket és egyéb tényezőket pontosan és megbízhatóan azonos értéken tartja. A találmány szerinti készülék egyszerű és olcsó, és így 33 — figyelembe véve, a kezeléshez, illetve kiszolgáláshoz szükséges kevés munkaidőt is — lehetővé válik kis mennyiségű különleges szövettenyészetek gazdaságos előállítása is, A találmány nincs a példaképpen ismertetett 10 készülék alkatrészeinek kiviteli alakjára korlátozva. Ezeket hasonló működésű és hatású, azonban más kialakítású alkatrészekkel helyettesítve a találmány védelmi köre nem változik meg. így például a rajzon vázolt csonkakúp alakú 45 szita helyett hengeres szita is alkalmazható, stb. 50 Szabadalmi igénypontok: 1. Eljárás szövettenyésztés céljaira szolgáló sejtek előállítására, azzal jellemezve, hogy a szervdarabkákat mágneses keverőre (6) erősített csonkaküp vagy henger alakú forgó szita (7) 55 külső felülete melletti emésztőedénytérbe (1) helyezzük, a szitával (7) meggátoljuk a szervfragmentumoknak szita (7) belsejébe jutását, centrifugális erővel meggátoljuk a szerv-fragmentumoknak a forgó szita (7) felületére való ü0 lerakódását és ezáltal a szitalyukak eltömődését, az emésztőedénybe (1) cseppek formájában adagolt enzimmel az enzim folyadékszintjét emeljük, meghatározott idő után az emelkedő folyadékszinttel az emésztőedény belső légterét a 65 külső légtérrel összekötő nyílást (13) elzárva a 3