152120. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hisztaminazoproteinek előállítására

MAGYAR NÉPKÖZTÁRSASÁG ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL SZABADALMI LEÍRÁS Bejelentés napja: 1962. III. 06. Közzététel napja: 1964. XI. 23. Megjelent: 1965. XII. 01. (WE—281) 152120 Szabadalmi osztály: 30 h 1—8 Nemzetközi osztály: A 61 k Decimái osztályozás: Feltalálók: Dr. Went István orvos, Debrecen,, Dr. Kesztyűs Lóránd orvos, Debrecen, Dr. Richter Péter vegyész, Budapest, Dr. Szöőr Árpád vegyész, Debrecen Tulajdonos: Humán Oltóanyagtermelő és Kutató Intézet, Budapest mint a feltalálók jogutódja. Eljárás hisztamin-azoproteinek előállítására Ismeretes, hogy p-aminobenzol-azohisztamint és marha- vagy lószérumot H. Pauly-féle diazo-reakcióba hozva hisÄtaminazobenzol-azoproteineket nyerhetünk. E vegyületek hisztamin^antigén jelleggel bírnak, azaz képesek a hisztamin toxikus adagja többszörösének hatását kivédeni [Orvosok Ijapja 2, 257 (1946)]. Az előbbiekben ismertetett módon nyert vegyület tek az allergia terápiájában bírnak gyakorlati jelentőséggel [Acta Med. Hung. 2, 103 ,(!95l'); Acta Med. Hung. 2; 117 (§1951); Acta allerg. <Suppl.) 5, Öl C1968)]. Az, ismert eljárás szerint hisatamirtazölöénzol-aziopirotein úgy állítható elő, hogy p-andánobmzoí-azo^hisztamint hígított sósavban és desztillált vízben oldanak, az oldathoz jeget és részletekben 0,1 mólos nátríumnitrit oldatot adnak. 500 ml marha- vagy lósaérumot normál nátriumfcarbonát oldattal elegyítenek és az előbbiek szerint készített oldatot hűtés közben hozzáfolyatjáii. Á keletkezett hisztaminazobenzol-azoproteint sósavval Mcsapják, normál nátriumhidroxid oldatban feloldják és az oldatból alkohollal kicsapják. Az alkoholos kicsapást oldás után megismételve nyerik a végterméket, amelyet nátriumhidroxid oldattal feloldanak, sósavval az oldatot fenolftaleinre semlegesítik és így hisztamin-azopro'teint tartalmazó oldatot nyernek. Az előbbiekben vázolt ismert eljárás a következő hátrányokkal rendelkezik: — Az egyik reagáló komponens, nevezetesen a marha-- vagy lószérum, inhomogenitása foly-5 tán a nyert termék sem homogén, ezáltal nehezen oldható és oldataiból könnyen kicsapódik. — Az -izolálás során alkalmazott sósavas kicsapás a natív fehérjéket részlegesen denatu-10 rálja, ami ugyancsak előnytelenül befolyásolja a termék oldhatóságát. — Az eljárás szerint előállított hisztamint -azoproteinben a fehérje 1 rnól-jához legfeljebb 1,4 mól pHámtooibenZol-azohiszliami'n kapcsoló- ^ 15 di'k, ami az élettani hatás kifejtése szempontjából előnytelenül kevés. Vizsgálataink során arra a felismerésre jutottunk, hogy jó kitermeléssel, egységes és jó oldhatóságú hisztamin-azoprotein állítható elő 20 H. Pauly-féle diazoreakcióval, ha legalább 5 :1 mólarányban p-aminobenzol-azohisztamint valamely szérumból izolált albuminhoz kapcsolunk és a nyert vegyületet vízzel elegyedő szerves oldószerrel kicsapva és mosva tisztítjuk. 25 A találmány értelmében célszerűen úgy járunk el, hogy p^aminobenzol-azohisztamint savas közegben nátríumnitrit oldattal diazotáljuk, majd az így nyert reakcióelegyet szérumból izolált albumin alikálihidroxiddal és/vagy lúgo-30 san hidrolizáló szervetlen sóval készített vizes 152120