152039. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a tetraciklin-sorba tartozó vegyületek előállítására
9 152039 10 nyomás alatt elpárologtatjuk az oldószert. A maradékot azután vizes savval kezeljük és az oldhatatlan részt ismét eltávolítjuk szűrés útján. A kapott savas oldatot azután valamely erre alkalmas oldószerrel, pl. butanollal extrahálhatjuk. A butanolos kivonat betöményítése útján jutunk a kívánt termékhez, amelyet azután kristályosítással vagy megoszlásos oszlop-kromatográfiával tisztíthatunk. A találmány szerinti eljárás kiindulóanyagaként alkalmazható (IIV) általános képletű 4-hidroxi-tetracikloxidok — e képletben R( hidrogénvagy halogénatomot képvisel — könnyen és jó termelési (hányadokkal állíthatók elő oly módon, hogy 6-demetü-tetraciklint vagy valamely 7Hhalogén-6-demetil-tetraciklmt egy erre alkalmas oxidálószerrel, mint pl. nátriumklorátt-al sósav jelenlétében vagy pedig valamely N-halogén-szukcinimididel kezelünk. A reakciót célszerűen valamely erre alkalmas oldószerben, pl. jégecetben, metanolban, dimetilformamidban vagy hasonlókban, —10 C° és 3(5 C° közötti hőmérsékleten folytathatjuk le, néhány perctől egy óráig vagy ennél is hosszabb ideig tartó reakcióidővel. A reakció befejeződése után a termék kinyerése a szokásos eljárásmódokkal történhet. Eljárhatunk pl. célszerűen oly módon, hogy a reakcióelegyet egyszerűen felihígítjuk valamely, a terméket nem oldó folyadékkal, pl, vízzel, aminek következtében a termék kicsapódik az oldatból. A nyers terméket azután etilénglikol-monometiléter és 0,1 n sósav oldat elegyóből történő átkristályosítással tisztíthatjuk, A találmány szerinti eljárással előállítható új vegyületek biológiailag aktívak és széles spektrumú baktérium-ellenes 'hatással rendelkeznek, így pl. a 4-dedimetilamino-4-metiletilamino-6--demetil-tetraciklin és a 4-dedimetilamino-4--metil-íbéta-hidroxieti^-amino-e-demetiíl-tetra-ciklin baktérium-ellenes spektrumát a szokásos módon, ágár-lemezes hígítási eljárással határoztuk meg. Valamely vegyület baktériumellenes spektrumában a vegyület ama mennyiségeit szokták megadni, amelyek szükségesek különféle fajta jellegzetes baktériumok fejlődésének a gátlására; ez a módszer általában használatos az új antibiotikumok vizsgálata terén. Az alábbi II. táblázatban adjuk meg e vegyületek minimális gátló koncentrációit mcg/ml egységekben kifejezve, különféle kísérleti mikroorganizmusokkal szemben. Összehasonlítás céljából megadjuk a 6-demetil-tetraciklm4iidroklorid ugyanezekre a mikroorganizmusokra vonatkozó baktériumellenes spektrumát is. A találmány szerinti eljárással előállítható új vegyületek szokatlan mértékű aktivitást mutatnak Gram-negatív mikroorganizmusok, mint Escherichia coli és Salmonella typshosa ellen is. Meghatározásiunk szerint egerek Escherichia coli fertőzései ellen, orálisan alkalmazott egyetlen 16 mg/kg adagban a 4-dedimetilamino-4-metiI-propilamino-6-demetil-tetraciklin kétszer olyan hatásos, mint a tetraciklin, a 4-dedi;metilamino-4-dietilamino-6-demetil-tetraciklin háromszor 10 13 20 30 35 40 45 50 55 60 65 olyan hatásos, mint a tetraciklin, míg a 4-dedl :imetiIamino-4-metiletilamino~6-demetil-t i etraciklin kétszer olyan hatásos, mint a 6-demetil-tetraciklin. II, táblázat (.1) 4-diedimetilamino-4-meületilamino-6-demetil-tetraciklin (2) 4-dedimetilamino-4-metil-(béta-hidroxietil)-amino-'ö-demetil-tetraciklin (3) ß-demetil-tetraciklin-lhidroklorid Mikroorganizmus (1) (!2) (3) 15 2 15 4 4 15 4 1 15 1 2 2 12:5 250 125 125 250 250 125 250 250 1 2 1 62 250 31 8 62 15 8 62 15 4 15 4 . 4 4 4 8 15 15 Mycobacterium ranae Mycobacterium smegmatiG ATCC 602 Staphylococcus aureus 2öfl P Bacillus subtilis ATCC 6933 Streptococcus pyogenes Streptococcus 11 Staphylococcus albus 69 Streptococcus 80 Bacillus cereus 5 Pseudomonas aeruginosa Escherichia coli ATCC 9637 S almonella gallinarum Streptococcus faecalis ATCC 8043 Klebsiella pneumonia ATCC 10031 Proteus vulgaris ATCC 9484 A találmány szerinti eljárásnak a fentiek szempontjából történő részletesebb szemléltetésére az alább következő példák szolgálnak. 7. példa: 4-dedi:metilamino-4-etilai mino-6-demetil-tetraciklm. 3,0 g 4-hidroxi-tetracii kloxidot feloldunk 150 ml tetráhidrofuránban és az oldatlhoz 6,0 ml 70%-os vizes .etilamint adunk. Az oldathoz ezután hozzáadunk 750 mg 10%-°s: palládiumos aktívszén 'katalizátort és az elegyet azonnal bevisszük egy 500 ml-es lombikba és 3,35 atm hidrogénnyomás alatt hidrogénezzük. A reduktív aminálási reakció 20 perc alatt lényegileg teljesen végbemegy. A katalizátort okkor szűréssel eltávolítjuk és a szüredéket csökkentett nyomás alatt szárazra pároljuk be. A kapott nyers termieket éterrel felvesszük és megszárítjuk. Ezután a terméket 40 ml metanolban szuszpendálju'k és tömény sósavat adunk hozzá, hogy pH = l látszólagos pH-értékű oldatot kapjunk. Az így megsavanyított oldatot 30 percig keverjük, ezalatt egy kristályos melléktermék képződik. Ezt szűréssel eltávolítjuk. A szűredékhez trietilamint adunk, hogy 7,0 látszólagos pH-értékű oldatot kapjunk. Az oldathoz két üveggyöngyöt adunk és 2 óra hosszat rázzuk az olcfetot. A képződött kristályos 4-dedimetilamino-4-etilamino-6^demetil-tetraciklint szűréssel 5
