151786. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új antibiotikumok előállítására
151786 8 Az anguidin emellett vérbetegségek (pl. myeloid vagy lymphatikus leukémia), valamint a nyirokrendszer megbetegedéseinek (pl. Hodgkin-lymphogranuloma, lymphosarkoma) kezelésére szolgál. Ha kutyákat az anguidin napi egyszeri 0,1— 0,2 mg/kg adagjával intravénásán kezelünk, akkor többszöri injekció után a perifériás vérrendszerben a leukociták számának erős csökkenését tapasztaljuk. A kapott értékeket az alábbi táblázatban foglaljuk össze: Példák Kezelés előtt Kezelés után leuk./mm3 leuk./mms ,,A" kutya 10 800 3800 ,,B" kutya 23 800 5600 .,C" kutya 10 300 1500 „D" kutya 12 500 5300 10 15 20 Az anguidint és származékait pl. gyógyszerkészítmények alakjában használhatjuk fel gyór gyászati célra. Ezek a gyógyszerkészítmények az említett vegyületeket enterális, parenterales vagy helyi alkalmazásra megfelelő szerves vagy 25 szervetlen vivőanyaggal elegyített állapotban tartalmazzák. Ilyen vivőanyagként a hatóanyagként alkalmazásra kerülő új vegyületekkel nem reagáló anyagok, mint pl. zselatin, tejcukor, keményítő, magnéziumsztearát, talkum, npvényi 30 olajok, benzilalkohol, gummi arabikum, polialkilénglikolok, vazelinek, koleszterin, vagy más ismert gyógyszer-vivőanyagok használhatók fel. A gyógyszerkészítmények pl. tabletták, drazsék, porok, krémek, végbélkúpok vagy folyé- 35 kony alakban oldatok, szuszpenziók vagy emulziók alakjában szerelhetők ki. Adott esetben az ilyen készítmények sterilizálhatok és/vagy segédanyagokat, mint tartósító-, stabilizáló-, nedvesítő- vagy emulgálószereket tartalmazhat- 40 nak. Adhatók az ilyen készítményekhez esetleg más, gyógyászati szempontból értékes anyagok is. A találmány szerinti eljárás gyakorlati kiviteli módjait az alábbi példák szemléltetik; meg- 45 jegyzendő azonban, hogy a találmány köre nincs ezekre a példákra korlátozva. A példákban a hőmérsékleti adatok Celsius-fokokban értendők. Az oldószerekre vonatkozólag megadott viszonyszámok minden esetben térfogatokra 50 vonatkoznak. 1. példa: Anguidin. 55 100 db 500 ml-es Erlenmeyer-lombikba beviszünk 100—100 ml következő összetételű tápoldatot: literenként 8,5 g NaN03 , 2,72 g KH2 P0 4 , 1,23 g MgS0 4 -7H 2 0, 28 mg FeS0 4 • 60 • 7H2 0, 3 mg ZnSO é • 7Hs O (valamennyi só analitikai tisztaságú minőségben), 30 g glükóz puriss. (gyógyszerkönyvi minőségben), 1 g „Bacto" (Difco-gyártmányú élesztőkivonat), iontalanított vízzel elkészítve. A tápoldatokat a Fusarium 65 ariguioides NRRL 3020 törzs (egy Marseille kornyéki talajmintából elkülönítve) konidiumainak szuszpenziójával oltjuk be és 25 napig inkubáltatjuk nyugalomban, 27 C° hőmérsékleten. A kultúrákat azután szobahőmérsékleten (kb. 20 C°) gyapotszöveten át leszűrjük. A szüredéket azonnal —22 C°-ra fagyasztjuk, majd 6 hét múlva 50° hőmérsékletű fürdőben felolvasztjuk őket. Az így kapott sárgás zavaros oldat (pH = = 7,2) kb. 8 literjét benzinnel, etilacetáttal és vízzel telített n-butanollal a megadott sorrendben többször extraháljuk; a kapott kivonatokat 1,5—1,5 liter vízzel kétszer mossuk, maid vákuumban 50° hőmérsékleten bepároljuk. Az etilacetáttal készített kivonat bepárlási maradékának súlya 0,60 g; ezt az anyagot 30 g kovasav-gélen kromatografáljuk. A benzollal és kloroformmal eluált részeket kiselejtezzük. A kloroform és metanol 99 : 1* arányú elegyével eluált frakciók az oldószerelegy elpárologtatása és kevés benzol hozzáadása után kristályosíthatok; az anyalúgokban egy sárga olajszerű termék számottevő mennyiségei maradnak vissza. Az összes kristályos frakciók benzol és hexán elegyéből történő átkristályosítása útján 45 mg anguidint kapunk; op. 162—163°. Ez, az anyag nagyvákuumban (0,01 mm Hg-oszlop nyomás alatt) 120° hőmérsékletű fürdőben szublimálható; a szublimátum a fentivel megegyező olvadáspontot mutat, Rf-értéke (vékony rétegű kromatogramban) ugyancsak megegyezik a fenti kristályosított termékével. 2. példa: Anguidin. Az 1. példában említettel megegyező törzset egy fermentorban (New Brunswick Co., New Brunswick USA, Typ FS 314) szaporítjuk; ugyancsak konidium-szuszpenzióból indulunk ki és ezt 10 liter tápoldatban — amelynek öszszetétele az 1. példában leírttól csupán abban különbözik, hogy nátriumnitrát helyett literenként 4 g ammóniumnitrátot (analitikai minőség) tartalmaz — keverés (450 fordulat percenként) és szellőzés (5 liter levegő percenként) mellett 113 óra hosszat inkubáltatjuk 27° hőmérsékleten. A micéliumot ezután szűréssel elkülönítjük és a kapott víztiszta, sárga szüredéket (pH = 5,0) etilacetáttal többször extraháljuk. Az etilacetátos kivonatot 1—1 liter vízzel kétszer mossuk, majd az egyesített kivonatot egy keringtető bepárolóban messzemenően bepároljuk. Az így kapott koncentrátumot azután forgó bepárlóban szárazra pároljuk. A kapott bepárlási maradékot, amelynek súlya 1,94 g, petroléter és ugyanolyan térfogatú 90%-os vizes metanol között megosztásnak vetjük alá; a vizes-metanolos fázisban 1,68 g anyag marad, ezt 85 g kovasav gélen kromatografáljuk. Kloroform és metanol 99 : 1 arányú elegyével 0,72 g terméket eluálunk. Benzol és heptán elegyéből kristályosítva 0,39 g anguidint. kapunk, amely 162—164°-on olvad. 4
