151292. lajstromszámú szabadalom • Eljárás új, vízben oldódó, magas biológiai aktivitású tetraciklinszármazékok előállítására

1; 3 szerkezetének bizonyítását oly módon végeztük, hogy a vegyületet nátriumditionitos redukcióval tetraciklinre és N-metil-p-amino-szalicilsavra bontottuk. A komponenseket elkülönítettük és fizikai állandóik révén, illetve papírkromatográfiás módszerrel azonosítottuk őket. Fenti bizonyítást katalitikus hidrogénezéssel Raneynikkel katalizátor jelenlétében is elvégeztük. Ily módon a Panamycin tetraciklin tartalmának 96%-ot nyertük vissza és a redukciós elegyből az N-metil-p-amino-szalicilsavat papír-Kromatográfiás úton mutattuk ki. A találmányunk alapját képező eljárás foganatosítása során 1 mól tetraciklin típusú antibiotikumhoz 0,9—1,1 mól p-amino-szalicilsavat és .1—1,2 mól formaldehidet adunk. A reakciót 10—80 C°-on, előnyösen 40—60 C°-on hajtjuk végre, ezen a hőmérsékleten az Einhorn-kondenzáció rövid idő, 10—30 perc alatt lejátszódik. A reakciót szerves oldószeres közegben végezzük el, oldószerként alkalmazhatunk alifás alkoholokat, előnyösen metanolt, etanolt, propanolt, vagy butanalt. A reakcióelegy feldolgozása az oldat szűrése, a csapadék mosása és vákuumban, 40—60 C°-on való szárítása útján történik. Az ily módon előállított vegyületeknek képezhetjük alkáli fémekkel, alkáli földfémekkel alkotott sóit, vagy ammóniumsóit, előnyösen nátrium, kálium, vagy ammónium sóit. A sóképzést oly módon hajtjuk végre, hogy a tetraciklin savszármazékának alkoholos oldatához a megfelelő fém hidroxidjának alkoholos oldatát, illetve ammóniumihidroxidot adagolunk; a sóképzés azonnal megindul és a reakcióelegyből a só szűréssel elkülöníthető. A találmányunk alapját képező eljárás előnyös foganatosítási módja szerint oly módon is eljárhatunk, hogy közvetlenül a sókat állítjuk elő oly módon, hogy az I. képletű tetraciklineket formaldehiddel és a II. képletű vegyületek megfelelő sóival hozzuk reakcióba. Az eljárásunk alapján előállított vegyületeket a gyógyszergyártás önmagukban ismert módszereivel tabletta, drazsé, porampulla, injekció, kúp, kenőcs, szemcsepp, vagy sebhintőpor formájában készíthetjük ki. A termékek az állatgyógyászatban is felhasználást nyerhetnek, méhpálca, tőgyzselé, stb. formájában. Eljárásunk további részleteit a példák tartalmazzák. Példák: 1. 10,0 g tetraciklindihidrátot SO C°-on 150 ml n-butanolban oldunk, az oldatot szűrjük, majd a szűrlethez 2,15 ml 37%-os, vizes formaldehidoldatot és 3,3 g p-amino-szalicilsav 70 ml alkohollal 50 C°-on készített oldatát adjuk keverés közben. A reakcióelegyet 40-—50 C°-on 20 percig keverjük, majd további keverés közben szobahőmérsékletre hűtjük. A kiváló terméket szűrjük, alkohollal és éterrel mossuk, végül vákuumban szárítjuk. A termék 7,6 g 129á 4 tetraciklin-p-.amíno-szalicilsav származék. Óp.: 188—193 C° (bomlás közben). A vegyület íztelen, ami a gyermekgyógyászati alkalmazás szempontjából előnyös. 5 2. 25,0 g tetraciklindihidrátot 50 C°-on 350 ml n-butanolban oldunk, majd az oldathoz 5,4 ml 37%-os vizes formaldehidoldatot és 8,25 g p-amino-szalicilsav 175 ml alkohollal 50 C°on készített oldatát adjuk, majd keverés köz-10 ben 2,27 g nátriumhidroxid alkoholos oldatát csurgatjuk a reakcióelegyhez. A csapadékkiválás azonnal megindul; az elegyet 15 percig 40!

—50 C°-on keverjük, majd további keverés közben szobahőmérsékletre hűtjük. A kivált 15 világossárga terméket szűrjük, alkohollal és éterrel mossuk, vákuumban szárítjuk. A termék 31,6 g tetraciklin p-amino-szalicilsav nátriumsó. Op.: 240—245 C° (bomlás közben), molekulasúly: 637,00 (számított: 631,42). 20 A vegyület toxicitása egéren 152 mg/kg, i. v. A biológiai egységszám Bacillus subtilisen mérve: 950 y/mg. A termék vízoldhatósága 20 C°-on 1,4 g/ml, a 10%-os vizes oldat pH-ja 7,1. A vérszint vizsgálat szerint a termék vérszintje 25 1 óra után 22,1 y/ml, 3 óra után 7,6 y/ml, *> ^ra után 3,26 y/ml. A rezisztenciavizsgálat eredménye azt. mutatta,, hogy a termék a Colli 0111 sz. tetraciklinrezisztens törzsre már 6,25 y/ml koncent-30 rációban hatásos, míg a pirrolidino-metil-OTC csak 100 y/ml koncentrációban. A termék u. v. spektrumában 210 272 és 359 mí'-nál észleltünk maximumot, valamint 240 és 329 m/x-nál minimumot. 35 3. A 2. példában ismertetett módon járunk el, azzal a különbséggel, hogy nátriumhidroxid helyett 3,2 g káliumhidroxid alkoholos oldatával végezzük el a sóképzést. A termék 6,7 g tetraciklin-p-amino-szalicilsav-kálium só. Op.: 40 205—210 C° (bomlással). 4. A 2. példában ismertetett módon járunk el, azzal a különbséggel, hogy a sóképzést 2,0 g ammóniumhidroxid alkoholos oldatával hajtjuk végre. A termék 5,4 g tetraciklin p-45 -amino-szalicilsav ammóniumsó. Op.: 182—186 C° (bomlással). 5. 10,0 g oxitetraciklinhidrátot 70 ml metanolban szuszpendálunk, majd 50—55 C°-on 3,3 g p-amino-szalicilsav 70 ml alkohollal ké-50 szült oldatát és 2,15 ml 37%-os vizes formaldehidoldatot adunk hozzá. A reakcióelegyhez keverés közben 0,91 g nátriumhidroxid alkoholos oldatát csepegtetjük. A reakcióelegy feldolgozása a 2. példában ismertetett módon történik. 55 A termék 5,39 g oxitetraciklin p-amino-szalicüsav-nátrium só. Op.: 213—218 C° (bomlással). 6. 10,0 g tetraciklindihidrátot 50 C°-on 150 ml n-butanolban oldunk és az oldatot szűrjük. A szűrlethez 2,15 ml 37%-os vizes formaldehid-60 oldat és 3,78 g p-amino-szalicilsav nátriumsó 15 ml metanollal készült oldatát adjuk keverés közben. A reakcióelegyet 15 percig 45—60 C°on keverjük, majd szobahőmérsékletre hűtjük. A kiváló világossárga terméket szűrjük, etanol-65 lal, majd éterrel mossuk, végül vákuumban 2