150834. lajstromszámú szabadalom • Eljárás peptidek előállítására
150.834 9 Kétszeri etanolos átkristályásítás után az olvadáspont 241—243 C°, fa] D 2 = —31" + 2° (c= 1,6, vízben). 12. példa: Na , NT —Di—Z—L—Lys—(N c —Z)— L—Lys—cetilamid 35,4 g N^.NT—Di—-Z—L—Lys—<NC —Z)—L— Lys—OH (J. Chem. Soc. 1953, 475) 150 ml tetrahidrofuránnal készített oldatához 2 C°-on, kavarás közben 8,6 g karbonildiimidazolt adunk, 30 perc elteltével 12,7 g etilamint adunk hozzá és éjszakán át közönséges hőmérsékleten állni hagyjuk. A kivált anyagot lenuccsoljuk, megmossuk, amikor is 19,8 g terméket kapunk, míg a szűrletet vákuumban bepároljuk, eceteszterben felvesszük, megmossuk és megszárítjuk; bepárlás és kloroform/petroléterben való átkristályosítás után további 5,2 terméket kapunk. Összesen 25,0 g N°,P —Di—Z—L—Lys—(Ne —Z)-~L—Lys-cetilaroid képződik, olvadáspont 147—152 C°; 21 [«]D = —6,3 (c — 2,0, dimetilformamidban). H—L—Lys—L—Lys—cetilamid • 3IIC1 28 g Na , NT — Di—Z—L—Lys —(N c — Z) — L— Iiys-cetilamidot. brómhidrogén 33%-o.s jégecetes oldatának 50 ml-ében való kezeléssel 2 óra hoszszat dekarboxiiezünk. Éterrel való kicsapás és 50 ml metanollal való bepárlás után minimális vízben oldjuk és 80 g Amberlite IRA 410-re öntjük. Vízzel eluáljuk, szénen át szűrjük, 30 ml 3 n sósavat adunk hozzá és 50 C°-on 60 Hgmm nyomáson 40 ml-re besűrítjük. Acetonnal való kicsapás után leszívatjuk, P2 0>;-on megszárítjuk, forró etanolban felvesszük, szénen át szűrjük és aceton lassú hozzáadásával a H—L—Lys—L—Lys— cetilamid -SHCl-t kicsapjuk. Ily módon 6,3 g-t kapunk, olvadáspont 230—250 C° (bomlás közben): [%]£2 = +6,6° (c= 2A metanolban). 13. példa: Na —Z—(N c -ftaloil)—L—Lys— (N c -ftaloil)— L—Lys—OC2 H 5 10,5 g (31 mmol) NE -ftaloil—L—Lys—OC 2 H 5 hidrokloridot 70 ml DMF-ben oldunk, 4,4 ml trietilamint adunk hozzá és megszűrjük. A szűrletet azonnal hozzáadjuk 12,6 g (31 mmol) Na —Z— (Ns -ftaloil)—Y—Lys—OH 150 ml abszolút tetrahidrofuránnal készített oldatához és az elegyhez 6,4 g (mmol) diciklohexilkarbodiimidet adunk. 2—4 C°-on 16 órás állás után a diciklohexilkarbamidról leszűrjük és vákuumban bepároljuk. A maradékot eceteszterben és 1 n sósavban felveszszük, karbamidról ismét leszűrjük, 1 n sósavval, vízzel, 10% bikarbonáttal telített nátriumkloridoldattal mossuk, nátriumszulfáton megszárítjuk és vákuumban besűrítjük. Ily módon Na —Z— (N E -ftaloil) — L — Lys — (N E -ftaloil) — L—Lys— OC2 ll5-öt kapunk, olvadáspont 116—121 C° (ecet-2 1 eszter/petroléter; [aj D == —11,8° (c — 0,5, etanolban). -'•'.''. 1; H—,(Ne -ftaloil)—L—Lys-^N" -ftaloil)— L—Lys—OC2 H 5 -HBr A kapott termékből az Na -karbobenzoxi-csoportot HBr/jégecettel a már leírt módon lehasítjuk. Ily módon a H—<NE -ftaloil)— L—Lys—(Nc -ftaloij)—L—Lys—OC2 Hr> • HBr hidrobromiclot kapjuk; olvadáspont 230'—235 C° (kloroform + kevés alkohol/éter). N «-oleil—(Ne -ftaloil)—L—Lys-(N * -ftaloil)— L—Lys—OC2 H 5 A kapott hidrobromicl 12,9 g-ját (20 mmol) 35 ml kloroformban 3 ml trietilaminnal felszabadítjuk, —20 C°-on 100 ml tetrahidrofuránnal elbontjuk, leszűrjük és további 3 ml trietilaminf adunk hozzá. Erős kavarás közben —30 C°-on 5.6 g (18,6 mmol) olaj sav kloridot csepegtetünk hozzá nitrogénáramban, még í/% óra hosszat 0 C°on kavarjuk és vákuumban besűrítjük. A maradékot eceteszter/l n sósavbn melegen felvesszük, előremelegített választótölcsérben elválasztjuk és gyorsan meleg vízzel és konc. nátriumkloridoldattal mossuk, megszárítjuk és vákuumban besűrítjük. Eeeteszter/petroléter és alkohol/vízben kristályosítva 12 g N" -óleil -<N "' -ftaloil) — L — Lys—i(N ' -ftaloil) — L — Lys—OC2 H 5 -öt kapunk. olvadáspont 118—125 C°; [«] p3 =-= —9,7° (c=l,'0, etanolban). N a -oleil—L—Lys—L—Lys-J OC 2 H 5 • HCl A nyert termeik 9,7 g-ját (11,7 mmol) a ftaloilvédőcsoportok lehasítása céljából 100 ml alkoholban oldjuk és 3,'5 ml 6,72 n hidrazinhidráttal, nitrogénáramban, 1 óra hosszat visszafolyatással hevítjük. Lehűlés után 8,0 ml 3,2 n sósavat adunk hozzá alkoholban, éjszakán át szobahőmérsékleten tartjuk és ftálhidrazidról leszívatjuk. A szűrletet vákuumban bepároljuk és kétszer alkohol/éterben átkristályosítjuk (a ftálhidrazid ismételt leszűrése után). Ily módon 3,3 g Na -oleil—L—Lys—L— Lys—OC2 H 5 • 2HCI-Í kapunk, mely 230 C° fölött bomlik, anélkül, hogy megolvadna; [a]p" = —17,7° (c —LO, etanolban). Az alább felsorolt példákban alkalmazott kiindulási anyagok az alábbi módon állíthatók elő: Na — Palm—(N 8 — Z)—L—Orn—OH (v. ö. 4. példa f) 150 ml 15 n káliumhidroxid-oldatban és 100 ml tetrahidrofuránban oldott 26,6 g (0,1 mol) N ä — Z —L—Orn—OH-hoz [Biochcm. J. 46. 582, (1950)1 2—5 C°-on, cseppenként 30 g (0,11 mol) palmitoilkloridot adunk. A csepegtetés befejezése után még 40 percig tovább kavarjuk és az alkalikus közeg fenntartása végett időnként 2 n káliumhidroxidoldatot adunk hozzá. Ezután sósavval megsavanyítjuk (kongóvörösre) és vákuumban tetrahidrofurántól 'mentesítjük. A maradékhoz 500 ml ecetesztert és kevés konc. sósavat adunk, a vizes fá-
