150332. lajstromszámú szabadalom • Eljárás egy új antibiotikum (ZN-6) előállítására
6 150.332 A tenyészoldat összetétele: Glükóz Glicerin KH2 P0 4 -2 H 2 0 NaNO:í KCl MgS04 7 H 2 0 ZnSO.,-6 H2 0 Élesztűikivoinat (Ditfco) 30 g per liter 5 „ .5 6 „ 0:5 „ 0,5 ., 1 mg per liter 0,12 p per liter A/ Í =+ ' izartuk c 0 J h4 ei lrz 0 u T> I ixmaz il rick litei pti p c L<"OL I"" n )jf i i UJ ü i -i k le dul T -> L^II i kuit. JH. e ^ li n°i1 b C u J i t-v. \ üit tt liS B 1 1 11 1 II Ü f '1 U ! "> n i v ]mj -.cin' 11 1 1 1 | ^1 ) H i / n'i oi i n n [*' ) i i i \ i \ ° \ i 1 t 'oi L T i 1 n [ I t« LP IT _ r 1 e 1 _U—fi i ji L í ' ( Ml ( ' leim K í ) i r J 4. példa: ZN—f . p'ibiL hkuin Jodln^su 16 000 lit r ardibi < rr -V n l MM. kn «4 i amelyn-e1 pll-i u tTi'i'j'. i u > t . li 1 ) be, fern i'o.'jiu ' _> oi i bo.*./ >*" i-ü " <_ i ui ' ilizáltunk: Búzadaráié, 50% 2,5 g per liter Szőjaliszt, vagy húsltszt 10,0 Szaccharóz 30,0 Glicerin 7,5 NaCl 4,0 KHpPO,, 0,5 MgS(34 -7 H 2 0 0,5 A. ki r a kkulfs j ua, 1 a 3 uJd " u c> d -~ oltenn agg0 " 1 b oUdíuk v.-. i ít i u ki c1 "" ') i 'lOÍ-C at »ii vT J ík, LL> 1 dv (7 »xtl L< i' i 'AJI-IQ f I fiu ?N -b ii1 tik «ii 1 i K i n •-'ke i.uU ' 1j a i' PJ " ( v ii i' 11. L e MI 5. példa: ZN- 6 antibiotikum előállítása. 18 000 liter alábbi összetételű ienyészközeg-et, Búzadaráié, 5-0% 20,0 g per liter Szacharóz 60,0 KH2 PC) 4 10,0 MgSO.|-7H2 ö 0,5 amelynek pI-T-ját sterilizálás előtt 6; 8~ua állítottuk be, a ferment orban 120 C°-on Vz óra hosszat sterilizáltunk ás lehűtés után a 3. példában említett -oltószerrei -beoltottunk. 100 óra hosszat a 3. -példa szerinti körülmények között fermentáltuk, a ZN—6 antibiotikum termelés 250 mg per ml tenyéiszoldat. 0. példa: ZN—6 antibiotikum elkülönítése és -tisztítása. Az 5. példa szerint kapott derített í-ermentálóievet (15 000 liter, 3,75 kg ZN—6 antibiotikum tartalommal, az agar-esésze eljárás szerint meghatározva) pH-jat ß/0-na állítottuk be és Podbielirißk exiraháMban 30-00- liter metilizofcutilketonnal extraháltuk. Ez az extraktum 3,4 kg ZN—6 antibiotikumot tartalmazott, Ev: követően 600 lier 11,5 pH-jú vizes nátriumhidroxid oldattal extraháltuk. Közvetlenül az extrahálás- után a vizes fázist 9,3 pH-ra állítottuk be és vákuum elpárologtatóban 150 liter térfogatra, pároltuk be. Ebben 3,25 kg ZN—8 antibiotikum volt Ezután 4-0 "iltc-r benzolt adtunk hozzá és kávára? 'közben a vizes fázis pH-ját sósav adagolással 5;ü-ira állítottuk be. A kavar ást 4 óra' hosszat folytattuk; -ezután a ZN—0 antibiotikumot tartalmazó sznlvátot szűrtük, vízzel és benzollal mostuk, maid szárítottuk. A nyers terméket (2,8 kg) VI liter metil énkloridbsn feloldottuk, szűrtük és vákuumban, szárazra pároltuk. A maradékot 3,2 liter metanolban feloldottuk; 0 C°-ra hűtve a metanol szolvát kikristályosodott. Ezt szűrtük, 3X300 ml jéghideg metanollal raoetuk, majd szárítottuk; a termelés 2,48 kg színtelen, metanolszolvát. Ezt -a termeiket 7:50 ml metanol és 1750 ml aceton el egyében szusz p-ciidáituk, majd. néhány csepp fenolitalein indikátor hozzáadása után 33%-os vizes n-átriumhidroxidot adagoltunk hozzá kavarás közben, olyan mennyiségben, hogy enyhe piros színeződés jelenjen, meg. A kapott oldatot diealiíon. átszűrtük, 5 liter metílizobutiliketonnal tdegyí tettük -és vákuumban körülbelül 3 literre bepárcituk. A koncentrálás folyamán, a nátriumsó kikristályosodott. Szűrtük, acetonnal, majd éterrel mostok és szárítottuk; a termelés 2,35 kg tiszta nátriumsó. 7. példa: ZN—6 antibiotikum, só szerves bázissal. :>u 11 > ZN—6 antibiotikum és- 5 ml oldatához l mii mol szerves bázist, majd 2,5 ml hexánt '' i d p k ezután kapargatásra a sók kikristá-! 11 < összegyűjtöttük és megfelelő oldószerl ni <ui ii-,t llyos-ítva tisztítottuk. Atkristályosítő Op. C° oldószer Trietilamin Piperidin íVTorfolin. Ciklohexilarnin. Dibe-nzii-etiléndiamin* Ben.z.il-^-fsniletilaimin* Monoetanclaímm Prokain* aceton aceton aceton aceton etil acetát 143—144 155—156 112—114 180—182 112—113 aceton-diexán 103—105 aceton-hexán 130—132 amorf * Vízben csak kevéssé oldódik
