149539. lajstromszámú szabadalom • Eljárás prednizolon kinyerésére a 149062 lajstromszámú szabadalom szerint kapott fermentléből

Megjelent: 1962. július 31. MAGYAK NÉPKÖZTÁRSASÁG asr -^ SZABADALMI LEÍRÁS ORSZÁGOS TALÁLMÁNYI HIVATAL 149.539. SZÁM 12. o 25. OSZTÁLY — GO—772. ALAPSZÁM SZOLGALATI TALÁLMÁNY Eljárás prednizolon kinyerésére a 149 062 lajstromszámú szabadalom szerint kapott fermentléből Gyógyszeripari Kutató Intézet, Budapest Feltalálók: Tömörkény Endre vegyész (55%), Weisz Erzsébet vegyész (15%), Gyimesi József vegyész (10%), Kasszán Béla oki. vegyészmérnök (10%), Magyar Károly vegyész (10%), A bejelentés napja: 1960. november 30. A gyógyászatban igen nagy jelentőségre tettek szert a szteroidhormonok. Ezek előállítása természetben, előforduló anyagokból szintetikus és mikrobiológiai lépésekkel történik. A mikrobiológiai lépések során megfelelő táptalajban egy mikroorganizmus behatásának teszik ki a szterint és a kívánt átalakítás elérése után a nyert terméket a táptalaj komponenseitől, a kiindulási szterintől és az esetleg keletkezett melléktermékektől elválasztják. Mivel a táptalaj rendszerint tartalmaz zsírszerű anyagokat, illetve a mikroorganizmus is tartalmaz lipoidot, ez a lipoidoldódású szterinek tisztán való kinyerését megnehezíti. Ennek folytán a keletkezett értékes termék jó hozammal való elkülönítése sok és fáradságos lépés alkalmazását teszi szükségessé. Az eddigi irodalom és szabadalmi leírások szerint általában a szterinek és így a prednizolon kinyerését kivonatolásos módszerekkel végzik. A szűrt fermentlevet térfogatával egyenlő, vagy annál nagyobb mennyiségű megfelelően megválasztott szerves oldószerrel kivonatolják több részletben. A, kivonatoláshoz elvileg minden olyan oldószer felhasználható, amely vízzel nem elegyedik, a megoszlási hányados az oldószer és a fermentlé között egynél nagyobb, emellett az oldószer forrpontja elég alacsony. Gyakorlatban a prednizolon esetén például legjobban megfelel az etilacetát, propilacetát, butilacetát, noha az utóbbi oldószer forrpontja már magas és ez a további feldolgozást megnehezíti. Ezen oldószerek esetén is a fermentiere számított 3-szor 1/3 térfogat oldószer szükséges a kivonatolás elvégzésére. Az alacsoay forráspontú klórozott szénhidrogéneknél (pl. diklóretán, diklórmetán, kloroform) a megoszlási hányadosok sokkal kedvezőtlenebbek, 6—8 kivonatolás szükséges, ami igen nagy mennyiségű kivonathoz vezet. Az egyesített kivonatokat ezután kíméletes körülmények között rendszerint 40 C° alatti hőmérsékleten, nitrogénatmoszférában párolják be. A kapott terméket többször átkristályosítják, gyakran az igen fáradságos .kromatográfiás eljárással történik a tisztítás. A kivonatolásos eljárások hátrányait a következőkben foglalhatjuk össze. Ismerve a prednizolon és rokonvegyületek oldódási és megoszlási viszonyait, a jó extrakciós hatásfokot biztosító oldószerek vízoldhatósága jelentős. így pl. az etilacetát oldhatósága fermentleben 13—15 térfogatszázalék. Ezen fermentleben oldott etilacetát igen körülményesen nyerhető ki. Emellett a nagy térfogatú kivonat bepárlása hosszadalmas, nehézkes és kíméletes körülmények között is az értékes anyag károsodásához vezet. Sok esetben a kivonatolás nem szelektív, a fermentié egyéb szennyező alkotórészei is a kivonatba jutnak. Ilyen esetben a költséges és nagy mennyiségű anyaggal nehezen kivitelezhető oszlop-kromatográfiás eljárás alkalmazása válik szükségessé. Találmányunk lényegét az a felismerés képezi, hogy a prednizolon a 149 062 lajstromszámú szabadalom alapján kapott fermentléből vízoldható anorganikus vagy organikus só, illetve sókeverék hozzáadására kristályosan válik ki, így a kristályok szűrésével és egyszeri átkristályosításával a gyógyászati követelményeknek megfelelő tisztaságú prednizolon nyerhető. Felismerésünk váratlan, mert ilyen módon sok komponensű oldatból