149539. lajstromszámú szabadalom • Eljárás prednizolon kinyerésére a 149062 lajstromszámú szabadalom szerint kapott fermentléből
2 149.539 só hatására a számunkra értékes termék szelektíve, megfelelő tisztaságban nyerhető. Megvizsgálva a különböző sóknak a kristályosodásra gyakorolt hatását, eredményeinket táblázatban foglaltuk össze. Kísérleteinkbein a 149 062 lajstromszámú szabadalom alapján kapott Termen tlevet használtuk. A vizsgálandó sót szobahőmérsékleten oldottuk fel a fermentleben, 300 g-ot literenként. A só feloldása után egy órán át szobahőmérsékleten állni hagytuk a fermentlevet, ezután a kivált kristályos anyagot szűrtük, majd a szűrőről etilacetáttal leoldottuk és kvantitatív papírkromatográfiás analízissel prednizolontartaimát meghatároztuk. A mért értéket táblázatunkban az eredetileg bennelevő prednizolonmennyiségre számítva adjuk meg százalékosan. Némely esetben telített sóoldatot alkalmaztunk oldhatósági viszonyok miatt. NaCl 48% KCl 44% NH4 C1 17% MgClc 5% alatt CaCl2 nem kristályosítható BaCl2 5% alatt KBr 5% alatt KJ nem kristályosítható HOCONa 55% CH3 COONa 35%, CH3COONH4 nem kristályosítható nem kristályosítható (COONa)2 (telített oldat) (CH3 ) 2 NH • HC i nem kristályosítható (CH3 ) 3 N • HCl nem kristályosítható LÍ2SO4 93% Na2 S0 4 91% (NH4 ) 2 S0 4 80% K2 S0 4 56% (telített oldat) MgS04 69% A12 (S0 4 ) 3 81% NaH2 P0 4 85% {NH4 ) 2 HPÖ 4 83% KH2 P0 4 73% (telített oldat) Az eredmények szerint leginkább a kettő és három értékű anorganikus savak nátrium- és ammóniumsói felelnek meg. Különösen érdekes és nem várt jelenség az, hogy az alkáli földfémek vízoldható sói kisebb hatást mutatnak, mint a megfelelő nátrium- illetve ammóniumsók. Ezen kivételtől eltekintve a kis ion radius-szal bíró kationok jelenlétében megy végbe a prednizolon kristályosodása előnyös termeléssel. A fentiek szerint kikristályosodó prednizolon a fermentléből közvetlenül kiszűrhető. Mivel a nagy volumenű fermentleben levő aránylag kis menynyi ségű kristályos anyag kiszűrése különleges berendezést igényel, eljárhatunk úgy is, hogy prednizolont jól oldó, vízzel nem elegyedő oldószerrel a kivált kristályokat oldatba visszük, amely oldatból bepárlás vagy második oldószerrel történő kicsapás útján a prednizoloat kinyerjük. Az oldott só az oldószer oldhatóságát fermentleben lecsökkenti, így az ez úton létrejövő oldószerveszteség csekély (pl. 30% ammóniumszulfát alkalmazása esetén az etilacetát oldhatósága 3%). Ugyanakkor a fermentlé térfogatának 10—20%-át kitevő oldószermennyiséggel közel kvantitatív kinyerést lehet elérni, ami ily módon az oldószer bepárlásnál létrejövő anyagkárosodást a minimumra csökkenti. A felhasznált oldószer mennyisége a kikristályosodott prednizolon mennyiségétől függ, a csekély mérvű oldódást leszámítva független a fermentlé térfogatától, ezért a feloldás nem tekinthető kivonatolásnak. A prednizolon oldására jól felhasználható az etilacetát, butilacetát, amilacetát vagy butanol. Az említett csekély oldószerveszteséget is lényegesen csökkenthetjük ama felismerésünk alapján, hogy olyan oldatokban, melyek fajsúlya 1,3 felett van, a prednizolon kristályok a sóoldat tetején, illetve a sóoldat felett a készülék falán helyezkednek el. Ha a fermentlé főtöniegét olyan sebességgel. boesátj ik le alul, hogy a készülékben örvények ne képződjenek, a felszínen úszó és a falra tapadt kristályokat kis mennyiségű oldószerrel leoldhatjuk. A találmány szerinti eljárás kivitelezésére az alábbi példákat adjuk meg: 1. példa: 10 liter, a 149 062 lajstromszámú szabadalom alapján nyert fermentleben, mely literenként 390 mg prednizolont tartalmaz, 3000 g diammóniumhidrofoszfátot .oldunk fel szobahőmérsékleten, majd egy órán át állni hagyjuk. A kristályosan kivált prednizolont szűrjük, a szűrletet elöntjük, a szűrőn maradt anyagot kevés jeges vízzel mossuk és szobahőn levegőn szárítjuk. Ily módon 3,45 g prednizolont kaphatunk. Etanolban melegen csontszenezve lehűtésre 2,92 g anyag válik ki. op. 228 C° (korrigált), j>]D = + 100° (c = 1, dioxán). '2. példa: 1-0 liter, a 149 062 lajstromszámú szabadalom alapján nyert fermentleben, mely literenként 440 mg prednizolont tartalmaz, szobahőmérsékleten 3000 g ammóniumszuifátot oldunk és egy órán át állni hagyjuk. A prednizolon kristályosan kiválik és jórészt a fermentlé felső 10%-ában és az edény falán van. Ezután 800 ml etilacetáttal kevertetjük, midőn a prednizolon az etilacetátban feloldódik, elválasztás, szárítás, szenezés és szűrés után az etilacetátos oldatot bepároljuk. A nyers prednizolon súlya 3,80 g, op-ja 225 C° (korrigált), [a] D = +97° (c = 1, dioxán). Etanolból átkristályosítva 3,50 g anyag nyerhető, op. 228 C'' (korrigált), [«] D = 99° (c = 1, dioxán). 3. példa: 10 liter, a 149 062 lajstromszámú szabadalom alapján nyert fermentleben, mely literenként 440 mg prednizolont tartalmaz, 3000 g csekély víztartalmú nátriumszulfátot és 3000 g ammóniumszuifátot oldunk fel és egy órán át állni hagyjuk. A prednizolon kristályosan kiválik, a fermentlé felső 10%-ában és az edény falán van. A sóoldat 90%-át ezután alsó leeresztő nyíláson leeresztjük olyan sebességgé], hogy örvénylő áramlás ne következzék be. A maradék 10% kristályszuszpenzióhoz 530 ml etilacetátot adunk és a kristályok feloldó-
