149147. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 1-(2-alacsonyabb alkil-4-amino-5-pirimidilmetil)-alacsonyabb alkil-piridinium kvaterner só előállítására

8 149.147 ket amidőn a sérülés éppen csak észlelhető, mérsékelten vagy maximális mértékben jelentkezett, 1, 2 és 4 számokkal jelöltük. Midőn az állat elpusztult és a cecca coccidiosis sérülése mutatkozott, 5-ös számmal jelöltük. Ha a jelölések összege 0—-5 volt, akkor a vizsgálati vegyületet „aktív"-nak tekintettük, ha pedig a jelölések összege 6 vagy ennél több volt, akkor a vegyületet „inaktívnak vettük a vizsgált koncentráció esetén. Azt tapasztaltuk, hogy az I. táblázatban leírt vegyületek ezzel a módszer szerint vizsgálva aktívak (a jelölések összege 0—5 a jelzett koncentráció mellett. 9. példa: A találmány szerinti négy piridinium vegyület coccidiositatikus aktivitását a következő eljárással határoztuk meg: Tíz csirkéből álló kéthetes fehér Leghorn csirkecsoportokat meghatározott mennyiségű péppel etettünk, amely különböző mennyiségű vegyületeket tartalmazott. A vegyületeket egyenletesen diszpergáltuk az élelemben. A csirkéiket 24 óra után beoltottuk 50 0O0 sarjasztott E. tenella ooeystával. Más, tíz csirkéből álló csoportokat hasonló mennyiségű péppel etettünk, amely pép azonban nem tartalmazott coccidiostatot. Ezeket is beoltottuk 24 óra után és ezek pozitív vagy fertőzött kontroli-állatként szolgáltak. Pozitív kontrollkonroll-állatként szolgálták. Pozitív kontroliállatként tíz csirkéből álló kettő-négy csoportot alkalmaztunk. További, tíz . csirkéből álló csoportokat olyan péppel etettünk, amely nem tartalmazott coccidiostatot. Ezeket az állatokat nem oltottuk be, ezek egészséges kontroli-állatként szolgáltak. A fent ismertetett tápanyagot a csirkéknek a. fertőzést követően nyolc napon át adtuk. Ezen, idő letelte után a még életben maradt állatokat leöltük. Az oocyst számot a ceca homgenátumok mikroszkópos vizsgálatával határoztuk meg. A negyedrendű só meghatározott mennyiségének alkalmazásával kapott eredményeket a középértékben kifejezve a II. táblázat tünteti fel. 10. példa: A) 20 ml vízben levő 3 g l-(2^etil-4-amino-5-pirimidilmetil)-2-metil piridinium-bromid-hidrabromidhoz addig adtunk N-kalciumpikrát oldatot, míg a csapadék kiválás be nem fejeződött. A keletkezett szilárd l-(2-etil-4-amino-5-pirimidilmetil)-2-metil piridinium-dipikratot leszűrtük. Olyképpen tisztítottuk, hogy 15 ml meleg dimetilfcrmamidban oldottuk, leszűrtük és a sót 75 ml metanol alkalmazásával ismét lecsaptuk. A kiszárított termék olvadáspontja 173—174 C° (bomlik). B) Az l-(2-etil-4-amino-5-pirimidilimetil)-2~metil piridin ium-embonatot a következőképpen állítottuk elő: 10 ml vízben levő 2 g piridinium-bromid hidroforomidhoz hozzáadtunk 4,4 g nátriumembonátnak 75 ml meleg vízben levő oldatát. Ekkor az l-(2-etil-4-amino^5-pirimidilmetil)-2-metil piridiniumembonat azonnal lecsapódott, ezt leszűrtük és vízzel mostuk. 100 mi metanolból átkristályosítottuk és ekkor megkaptuk a lényegében tiszta anyagot, melynek olvadáspontja 200 C° (bomlik). C) 3,01 g l-(2-etil-4-amino-5-pirimidilmetil)-2-metil piridiniumklorid hidrokloridot 10 ml vízben oldottunk. Az oldathoz hozzáadtunk 3,5 g naftalin-l,5-diezulfonsavat. II. táblázat Vegyület Vegyül et-% a takarmány ban Elhullás %-ban Az Oocyst Súly- száma x 106 gyarapodás az életben %-ban maradt állatokban l-(2-etil--4-amino-5~pirimidilmetil)-2^metil piridinium-klorid hidroklorid l-(2-metil-4-amino-5-pirimidilmetü)~2-metil piridinium-bromid hidrobromid l-(2-etil-4-amino-5-pirimidilmetil)-2~metil-5-etil piridinium-klorid hidroklorid l-(2-metil-4-amino-5-pirimidilmetil)-2-metil-5-etil piridinium-klorid hidroklorid Fertőzött kontroli-állatok Egészséges kontroli-állatok 0,0015 0,003 0,006 0,0125 0,0015 0,003 0,006 0,0125 0,0015 0,003 0,006 0,0125 0,0015 0,003 0,006 0,0125 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 0 10 0 0 0 40 0 90 3 99 <0,1 106 <0,1, 100 <0,1 82 8 78 19 96 3 97 <0,1 97 0,2 97 <0,1 95 <0,1 89 <0,1 78 7 89 0,9 97 <0,1 105 <o,i 63 6 90