149063. lajstromszámú szabadalom • Eljárás delta 1-dehidro szteroidok mikrobiológiai átalakítására

149.063 3 1. 20 mg hidrokortizon 2. 20 mg hidrokortizon 3. 20 mg hidrokortizon 4. 20 lag hidrokortizon 0,5 mg 2-metil-l,4-naftokinon, 1,0 mg 2-metil-l,4-naitoki.non, 2,0 mg 2»metil~l,4-naitokinon, 5. 2 1 mg h idrokor tizon -j- 5,0 mg 2-rr,etil-1,4-naf tokinon 3. sz. táblázat 4. sz . táblázat Tenyészet kora Tenyészet kora x 2. 3. 4. 5. órákban az 1. fermentor 2. fermentor órákban az adagolás után ten. yészet adagolás után ten. yészet 0 0,030 -0 0,030 -0,037 0 0,0.30 0,030 0,030 0,040 0,045 2 4 6 3 10 1 r. 0,070 0,332 0,398 0,375 0,379 0,389 0,358 0,350 0,055 0,267 0,362 0,375 0,385 0,390 3 0,290 0,290 0,290 0,200 0,080 2 4 6 3 10 1 r. 0,070 0,332 0,398 0,375 0,379 0,389 0,358 0,350 0,055 0,267 0,362 0,375 0,385 0,390 6 0,360 12 0,330 0,360 0,390 0,340 0,390 0,310 0,370 0,100 0,075 2 4 6 3 10 1 r. 0,070 0,332 0,398 0,375 0,379 0,389 0,358 0,350 0,055 0,267 0,362 0,375 0,385 0,390 24 0,315 0,370 0,390 0,390 0,100 2 4 6 3 10 1 r. 0,070 0,332 0,398 0,375 0,379 0,389 0,358 0,350 0,055 0,267 0,362 0,375 0,385 0,390 48 0,025 0,390 0,360 0,400 0,080 ,1.^ 14 16 0,070 0,332 0,398 0,375 0,379 0,389 0,358 0,350 0,055 0,267 0,362 0,375 0,385 0,390 . 72 0,010 0,370 0,350 0,410 0,020 ,1.^ 14 16 0,070 0,332 0,398 0,375 0,379 0,389 0,358 0,350 0,461 18 0,278 0,390 A 3. ez. táblázat tanús ága szerint a 2-metil-l ,4-20 0,210 0,380 -naftokinon az alacson /abb k oncentrációba n gá-22 0,185 0,360 tolta a keletkezett prednizolon lebontását, na gyobb 24 0,210 0,370 koncentrációban azonban már a prednizolon képződését is megakadályozta. 4, példa: C Az 1, példában részletezett módon készítettünk üirnplex tenyészetet és a 2. példa szerint kézitettünk 10 literes üvegfermentorban 5-—5 liter iígitoit tenyészetet. Az első termentorhoz 1 g •.idrokortizont, a második fermentorhoz 1 g hidrooriizont és 100 mg 2-metil-l,4-naf tokinon t adaoitunk. A í'ermentorokat kb. 300-as percenkénti orduiaíszámmal kevertettük, percenként 5 liter ?vsgőt engedtünk át rajtuk és 37 C°-on vízfürőben ir.kubáltuk. Az eredményeket a 4. sz. tábízat mutatia be. A 2.-metil-l,4-naítokinon fermentoros tenyészetben, is gátolta a prednizolon lebontását és jobb termelést biztosított. 5. példa: Az 1. példában részletezett módon készítettünk C. simplex tenyészetet. Ebből a tenyészetből 100— 100 mi tömény (3,4), 10-szer híg (5,6), 20-ßzor Mg (7,8), 40-szer híg (9,10), 8ű-szor híg (11,12), tenyészethez adagoltunk 20 mg hidrokortizont is 1 mg 2-metil-l,4-naftokinont. 40-szer híg tenyészethez adagoltunk csak 20 mg hidrokortizont. (1,2). A 20-szor híg tenyészel felelt meg a 2, példában. megadott 0,240-es extinkciónak. Az eredményeket az 5. sz. táblázat szemlélteti. Tenyészet kora órákban az adagolás után 1—2 táblázat 5—6 7—8 9—10 11—12 6 12 24 48 72 ,320— ,320 ,440— ,460 ,490— ,510 ,430— ,400 ,140— ,140 ,020— .015 0,215— 0,210 0,180— 0,170 0,190— 0,170 0,170— 0,195 0,130— 0,165 0,240— 0,280 0,070-0,060 0,395-0,390 0,410-0,440 0,420-0,440 0,340-0,320 0,250-0,235 0,220-0,210 0,075-0,070 0,355-0,355 0,520-0,460 0,530-0,480 0,440-0,420 0,360-0,320 0,350-0,300 0,073--0,072 0,070 0,072 0,235-, 0,150 0,235 0,165 0,420— 0,290 0,390 0,310 0,500— 0,420 0,490 0,440 0,480— 0,420 0,480 0,450 0,385 -0,390-0,40." 0,440 0,4'OC-0,385-0,410 0,440 szerint a. 2-metil-l,4-naf to)!kozódik Az eredmények kinon hatása a hígítással fokozódik egy bizonyos értékig, tehát az optimális hatáshoz meghatározott enzim : szufosztrát arány beállítása szükséges. 6. példa: Az 1. példában megadott módon 0,120-os extinkciót adó 100—100 ml tenyészethez adagoltunk: