147613. lajstromszámú szabadalom • Eljárás 11 alfa-oxiszteroidok előállítására

2 147.613 CH?OR (I) előállítására szolgáló eljárás képezi; ezek a szteroidok az 1- és/vagy 6-helyzetben telítetlenek is lehetnek, a képletben pedig az R hidrogénatomot vagy acetilcsoportot jelent, Ez az eljárás abból áll, hogy az alábbi (II) általános képletű vegyületeket (amelyek az 1- és/vagy 6-helyzetben szintén telítetlenek is lehetnek és amelyek képletében az R jelentése a fentebbivel egyező) CH2

GR c==o OH y\y o (II) a Fusarium-faj Diskolor és/vagy Gibbossurn és/vagy Elegans-Oxisporum fajtáiba tartozó gombákkal vagy az e gombákból kinyerhető oxidáló enzimekkel kezeljük, az ily módon elállított lla-oxi-szteroidokat a reakcióeiegyből — előnyösen extrahálás útján — különválasztjuk, és ezeket adott esetben ismert módon a megfelelő' 21-acetátok'ká alakítjuk át. Minthogy a Fusarium-törzseknek az említett fajtákon {szekciókon) is túlmenő osztályozása körülményes és némi bizonytalansággal terhelt művelet, a találmány szerinti eljárásban alkalmazásra kerülő törzseket az E. Merek Aktiengesellschaft darmstadti cég gombagyűjteményében alkalmazott számozással jelöltük meg, ugyanezt a számozást alkalmaztuk a kísérletek leírása során is. A lla-hidroxilcsoportnak a fenti (II) általános képletű szteroidok molekulájába való bevitele pl. az alábbi Fusarium-fajbeli gombákkal történhet: Fusarium, Sectio Discolor: Fusarium culmor-um. (W. G. Sm.) Saccardo (2092), Fusarium sambucinum Fuckel (2077), Fusarium sambucinum Fuckel (2102), Fusarium reticulatum Montaigne (2091), Fusarium reticulatum Montagne f .1. Wollenweber (2095), Fusarium heterosporum Nees (2093), Fusarium sp. (2070), Fusarium sp. (2074), Fusarium, Sectio Gihbosum: Fusarium equiseti Saccardo var. bullatum (Sher-bakoff) Wollenweber (2083), Fusarium equiseti Saccardo var. bullatum (Sher-bakoff) Wollenweber (2090), Fusarium, Sectio Elegans-Qxysporum: Fusarium oxysporum Schlechtendahl (2088), Fusarium redolens Wollenweber (2087), * Fusarium redolens Wollenweber (2094), Fusarium bulbigenum Cke. et Mass. (2096), Fusarium sp. (2089), Fusarium sp. (2088). E törzsek pl. malátakivonatból és peptonból (2% malátakivonat, 0,2%; pepton kazeinból) álló táptalajon tenyészthetők. Megfelel az olyan tápoldat is, amely glükózt, szójalisztet, élesztőkivonatot, primer káliumfoszfátot és nátriumkloridot tartalmaz. Az átalakítást kielégítő mértékű szellőzéssel (ál-, tálában kb. 600 liter levegőt számíthatunk óránként egy kb. 13 liter térfogatú kis fermentorban lefolytatott művelet esetében) hajtjuk végre. A szükséges reakcióidő 7 és 25 óra között lehet. Az ily módon kapott lla-oxi-szteroidokat megfelelő oxidálószerrel való kezelés útján a megfelelő ll-keto-szteroidokká alakíthatjuk át, adott esetben a 21-helyzetű hidroxilcsoport pl. acetilezéssel történő megvédése után. Ennek az oxidációnak a lefolytatására különösen alkalmas a krómsavanhidrid, ill. krómsavanhidridből és valamely szerves tercier bázisból (pl. piridin, lutidin) vagy krómsavanhidridból és jégecet és víz elegyéből képezett keverék. A termék 21-acetáttá való észterezése célszerűen acetilkloriddal vagy eeetsavanhidriddel történhet, valamely szerves tercier bázis, pl. piridin jelenlétében. Előnyösen úgy járhatunk el, hogy az eceteavanhidridet és a llö-oxi-szteroidot egyaránt mólos mennyiségekben alkalmazzuk, vagy pedig a szteroid ás a szerves tercier bázis (pl. piridin) mólos mennyiségének keverékét feleslegben levő mennyiségű acetilkloriddal kezeljük. Az ily módon előállított lla-oxi- vagy 11-keto-szt erőid ok molekulájában megfelelő kémiai vagy mikrobiológiai dehidrogénezoszerekkel való kezelés útján kettőskötést is létesíthetünk az 1- és/vagy 6-helyzetben; a két kettőskötés létesítés egyidejűleg vagy egymás után történihet. így fclőramllal való kezelés vagy brómozás (pl. i\T

-brómszukcinimiddel) és ezt követően valamely hidrogénbromidot lehasító szerrel (pl. piridinnel) való kezelés útján a 6-helyzetben létesíthetünk kettőskötést, A találmány szerinti eljárással előállított 11«-oxi-szteroidok molekulájában, amely adott esetben a 6-helyzetben kettőskötést is tartalmazhat, szeléndioxiddal, vagy elemi brómmal és ezt követően valamely halogénhidrogént, lehasító szerrel való kezelés., vagy pedig valamely erre alkalmas mikroorganizmussal (pl. Corynebacterium simplex vagy -Bacillus sphaericus) történő mikrobiológiai dehidro'génezés útján az 1-helyzetben 1 élesíthetünk kettőskötést. Az 1- és 6-Jhelyzetű kettőskötésnek a llo-oxi-szteroidok molekulájában — adott esetben a megfelelő ll-keto-sztsroidokká való átalakítás (oxidá--