146376. lajstromszámú szabadalom • Eljárás az oleandomycin acilésztereinek előállítására

8 146.376 Végül ezzel az eljárással 2-3-diacetil-oleandomycint 1,2,3-triacetil-oleandomicinné alakítottunk át. 9. példa: 2-monoacetil-oleandomycint súlyának kétszeres súlya ecetasavanihidridben feloldottunk és a kapott reakció-oldatot 17 óráig 25 C°-on állni hagytuk. A reakció-keveréket ..azután annyi vízzel kezeltük, amennyi az ecefcsavanhidrid felbontására és a kapott ecetsav-oldatnak 3,5 norrnalitásra való báellításához szükséges. A terméket azután úgy különítettük el, hogy a lehűtött oldat pH-ját 10 N vizes marólúggal 8,0—8,5 pH-ra beállítottuk, majd a vizes közeget egyenlő térfogatú metilénkloriddal kétszer extraháltuk. Az egyesített oldószerkivonatokat vízmentes nátriumszulfát fölött megszárítottuk, megszűrtük és csökíkentett nyomáson száradásig bepárologtattuk. Ily módon 50%-os kitermelésben 1,2-diacetil-oleandomycint kaptunk. Azonos módon alakítottunk át oleandoniycint 1-monoacetil-oleandomycinné, 80%-os kitermelésben, 3-imonoaeetil-oleandomycint 1,3-diacetil oleandomycinné és 2,3-diacetil-oleandomycint 1,2,3--triaceil-oleandomycinné. Ha 1-monoacetil-oleandomycint vetettünk alá a fenti eljárásnak azzal az eltéréssel, hogy a reakció idejét két hétre terjesztettük ki, a kapott termék 1,2-diacetil-oleandomycin volt. Hasonló módon, 1,3-diacetil-oleandomycint 1,2,3-triacetil-oleandomycinné alakítottuk át. Végül, ha 1,2-diacetil-oleandomycint ugyanennek az eljárásnaik vetettük alá, azzal a kivétellel, hogy a reakció-oldatot 25 C°-nál 2 hétnél tovább állni hagytuk, a papír-kromiatogrammok 1,2,3-triacetiloleandomycint mutattak ki. Az 1,2,3-triacetiloleandomycin mennyisége néhány hónap múlva tekintélyes lett. Érdekes, hogy úgy az, 1-monoacetil-oleando<mycin, mint az 1,2,-diacetil-oleandomycin volt a főtermék, oleandomycin acetonos oldatának (mólban számított) keton-felesleggel való kezelése után. 10. példa: Ebben a példában az 5. példában ismertetett eljárást követtük, azzal az eltéréssel, hogy 2,3-diacetil- oleanoomycin volt a felhasznált kiindulási anyag és a reakció időtartama néhány hónap volt. A kapott termék: 3-monoacetil-oleandomycin volt. Ha ugyanennek az eljárásnak 1,2-diacetil-oleandomycint vezettünk el 24 óráig, akkor 90%ros kitermelésben 2^monoacetil-oleandomycint kaptunk. Analízis: Számított érték: C37H63NO13 : CH3CO, 5.9 Megállapított érték: CH3CO, 5.9 11. példa: 2,3-diacetil-oleandomycin 1,2 ml egyenértékének 2,7 ml metilalkoholban való feloldása után kapott oldatot 25 C°-on, 16 óráig 0,3 ml N metamolos káliumhidroxiddal kezeltünk. Egy hányadot ezután eltávolítottunk, vizes pH 4 puffer-oldatban hirtelen lehűtöttünk es a kapott oldatot papiros kromatográfiának vetettük alá, melynek folyamán kitűnt, hogy a keletkezett termék 3-monoacetiloleandomycin. Ha a reakciónál kiindulási anyagként 1,2,3-triacetil-oleandomycint használtunk, közelítőleg 20 percnyi reakciótartam után 1,3-diacetiloleandomycin volt a kapott főtermék. 17 óra elteltével 3-monoacetil-oleandomycin keletkezett. Ez utóbbi vegyület azután, ugyanazzal a reakcióval, oleandomycin bázis kimutatható mennyiségéig, lassan dezacilezhető volt. A 3-monoacetil-oleandomycininek oleandomycin bázissá való átalakításának siettetésére irányuló erőfeszítések vízmentes oleandomycin képződését eredményezték, mely vegyület telítetlen a, ^-keton. 12. példa: Tipikus vérszérum-szintmérési kísérlet során minden egyén, szájon át, más-más napokon, 500 mg oleandomycin bázist, 500 mg 2,3-diacetil-oleandomycint, illetve 500 mg 1,2,3-triacetil-oleandomycint vett be. Azt találtuk, hogy 2 óra elteltével, az 1,2,3-triacetil-oleandomycin 2416 egység/ml szérum mértékében abszorbeáltatott, míg a 2,3-diacetiloleandomycin esetében a megfelelő érték 1208 egység/ml és az oleandomycin bázis esetében 0.763 mcg/ml volt. Megjegyzendő, hogy egy oleandomycin-egység az oleandomycin-aktivitásnak az a mennyisége, melyet 1 meg oleandomycin bázis kifejt, 3 óra után a megfelelő értékek 2384 egység/ml 1164 egység/ml, illetve 0.955 mcg/ml, 6 óra után a megfelelő értékek 1541 egység/ml, illetve 0.680 egység/ /ml, illetve 0.711 mcg/ml voltak. 13. példa: Az egyének mindegyikének, más-más napokon 500 mg-os adag oleandomycin bázist és 500 mg triacetil-oleandomycint adtunk be. 24 óra után azt találtuk, hogy a triacetil-oleandomycin esetében a kivált antibiotikus aktivitás átlagos mennyisége (oleandomycin-egységekben kifejezve) 23,5 %+10,3 volt, míg az oleandomycin bázis kivált átlagos mennyisége 10,2% +. 2,0 volt. A triacetil-oleandomycin esetében kapott százalékszámot a beadott vegyszer súlya határozza meg, tekintettel az észernek (in vitro) csekély aktivitására. Minden más esetben a százalékszám a beadott oleandomycin aktivitás mennyiségén alapszik. 14. példa: Tipikus 6 órás kiválási tanulmány folyamán öt egyén mindegyikének 100—100 mg triacetil-oleandomycint és öt további egyénnek 83 mg oleandomycin aktivitást adtak be a foszorsavas só alakjában. Azt találták, hogy triacetil-oleandomycin esetében a 6 óra után kivált antibiotikus aktivitás átlagos értéke (oleandomycin egységekben kifejezve) 9,9% volt, míg az oleandomycin foszforsavas sóval kezeiteké csupán 3,8%. 15. példa: Űn. kereszt-, azaz oly kísérletet végeztünk, melynél azok a betegek, akik az: első kísérleti