126648. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hipofizishormonok különválasztására
2 126648. kát pH = 9—10 mellett 80 <y0 -os metanollal még egy-két ízben kivonatoljuk. Az egyesített kivonatokat semlegesítjük és vákuumban bepárologtatjuk. A ki-5 vonatok a hátsólebenyhormonokat tartalmazzák, melyek magában véve ismert eljárásokkal tovább tisztíthatók. A kivonatolási maradék előlebenjdiormonoknak magában véve ismert eljáio rásokkal történő előállításának kiindulási anyaga. Ilyen eljárásokat ismertet pl. a 650803. számú német szabadalmi leírás 4. példája és a 681216. számú német szabadalmi leírás. Más alkalmas 15 eljárásokat találhatunk pl. Bomskow »Melodik der Hormoníorschung« című művének 2. kötete (1939) a 777. és köv., 922. és köv., 854. és köv., 947. és köv. lapjain. 20 Ha kiindulási anyagul aeetonszárazport alkalmazunk, akkor ezt pH =9— 10 értéken 80 °/o— os metanolnak vagy más víztartalmú, vízzel keverhető szerves oldószernek 20-szoros mennyiségé-25 vei háromszor kivonatoljuk és a lenti módon tovább feldolgozzuk. A tisztításnak a találmány szerint való elvégzésekor ügyelni kell arra, hogy a bázis mennyiségét úgy válasz-30 szúk, hogy a kicsapandó oldat pH érléke célszerűen kb. 8 és 11 között legyen; nem feltétlenül káros 11-et meghaladó pH sem, azonban kevésbbé liszta termékeket és rosszabb hozadé-35 kokat eredményez. A kívánt pH-érték alkáliákon kívül megfelelő alifás vagy ciklusos szerves bázisok, így trietanolamin, piridin és, másefféle hozzáadásával is beállítható. 40 A kicsapás céljából hozzáadandó szerves folyadék mennyiségét úgy választjuk, hogy hozzáadása után töménysége a kicsapandó oldatban kb. 60—90 °/o, előnyösen 80 o/0 legyen. A 45 kicsapófolyadék legelőnyösebb töménysége és a legelőnyösebb p H-érték a kicsapáskor természetcsen az alkalmazó tt szerves folyadék niineműségétől és a kiindulási anyag összetételétől függ. 50 Ezek az értékek minden szakértő számára szokásos előkísérletekkel és élettani ellenőrző kísérletekkel mindig könnyen meghatározhatók. A felhasználásból természetesen ki vannak zárva 55 azok a szerves folyadékok, melyek a hátsólebeny hormonokat nem vagy nem kellően oldják, < pl. aceton. A találmány szerinti eljárást célszerűen alacsony hőmérsékleteken, előnyösen szobahőmérsékleten visszük 60 véghez. Az oldatlan csapadéknak a folyadéktól való különválasztására az ismert különválasztási módszerek, így szűrés, dekanlálás, centrifugálás stb. alkalmazhatók. 65 A találmány szerinti eljárással az előlebenyhormonokat csaknem menynyiségileg és 3—4-szeres dúsításban kaphatjuk meg. 1. példa: 70 Őrölt egész sertésmirígyből 10 kg-ot tömény ammóniával PH=9—10 értékre hozunk és a keverékhez 32 liter metanolt adunk, az egészet 12 órán át kavarjuk és leszivatjuk. A kivonató- 75 lási maradékból és 2,4 liter vízből pépet készítünk, azután az egészet ammóniával ismét pH ==9—10 értékre állítjuk be, 27,6 liter metanolt adunk hozzá, és a keveréket ugyancsak 12 órán át 80 kavarjuk, leszivatjuk és ismét azonos mennyiségű metanollal kezeljük. Az egyesi lelt kivonatokat ecetsavval semlegesítjük és beszárítjuk. Kb. 400 g száraz maradékot kapunk, mely a kiin- 85 dulási anyagnak az anyaméhre és a vérnyomásra gyakorolt egész hatásértékét, nevezetesen kb. , / 2 millió nemzetközi egységet foglalja magában. Ez a termék magában véve ismert módon 90 hátsőlebenyhormonok kitermelése céljából dolgozható fel. A kivonatolt mirigyekből vízzel végzett kivonatolással a lireotrop hormon állítható elő és lovábbá a kivonatolt maradékból híg 95 sósavval való főzés és a főzési kivonatnak alkalmas szerves oldószerekkel való kicsapásával végzett fehérjemenl esi lése útján a kortikolrop hormon termelhető ki. 100 2. példa: Egész serléshipofízisnek acelonszárazporából 50 g-mal és 200 cm3 1 0/0-os ammoniaoldaltal pépet készítünk és az egészet 800 cm3 metanol hozzáadása 105 után 12 órán át golyósmalomban őröljük. Ezt kövelőleg leszivatunk és a maradékot ammonias 80 %-os metanollal mossuk ki. A maradékot a kivonatolószer fél mennyiségével azonos mó- no don még kétszer kivonatoljuk és az utolsó leszivatás alkalmával a maradékot ecetsavas abszolút metanollal utánamossuk.
