96435. lajstromszámú szabadalom • Eljárás enzymatikus folyamatok reakciógyorsaságának fokozására
Megjelent 1929. évi október hó 15-én. MAGYAR KIRÁLYI ^^^^ SZABADALMI BÍRÓSÁG SZABADALMI LEÍRÁS 96435. SZÁM. — IY/i. (IV/e., IVh/2.). OSZTÁLY. Eljárás enzymatikus folyamatok reakciógyorsaságának fokozására. Dr. F. F. Nord vegyészmérnök Berlin. A bejelentés napja 1928. évi február hó 1-je. Németországi elsőbbsége 1927. évi junius hó 3-ika. Kémiai átalakításoknak enzymekkel történő foganatosításánál azt tételezik fel, hogy a mindenkori reakció gyorsaságára döntő befolyása van a rendszerben jelen-5 levő substratenzym koncentrációjának. Azt találtuk már most, hogy valamely enzymoldatnak hatályossága, áz oldatnak kifagyasztása után, az oldatban levő kolloidok felületének megnagyobbodása folytán, a 10 közbenső és végső termékekkel szemben tanúsított érzékenységüknek egyidejű megfelelő megváltoztatásával, jelentékenyen növekedik. Ha ilyen oldatokat, melyek lyophilos kolloidák gyanánt viselked-15 nek, kifagyasztás után vagy anélkül, illetve magukat az enzymeket tartalmazó sejteket oly vegyületekkel hozzuk érintkezésbe, melyeket az előbbiek könnyen adszorbeálnak, akkor azt az előre nem lát-20 ható tényt kellett megállapítani, hogy a reakcióképesség hosszabb ideig megmarad, illetve, hogy a közbenső és végső reakciótermékeknek káros befolyása meg van akasztva. Ezen anyagok anélkül, hogy azok 25 maguk a reakcióban vegyileg bármiképen is részt vennének, a sejtmembrán áteresztőképességének növelését idézik elő és a hatásos felületen adszorbeált réteget képeznek, miáltal először a reakció gyor-30 sulását létesítik és másodszor a felületet a közbenső és végső termékek által előidézhető káros hatások ellenében megvédik. Ily módon sikerül pl. tésztamasszáknál egyrészt a diasztatikus leépítést, másrészt 35 magánál a sütésnél a héjképződést fokozni. Az élesztőzymazek, miután első sorban erjesztés, pl. pyro-szőlősav által nagy mértékben megsérültek, ily „protektor" jelenlétében minden további művelet nélkül 6 40 atomos szénhydrátoknak vagy ezek keverékeinek normális erjesztésére használhatók. Dohánylevelek sejtjeire az anyagok első sorban a permeabilitás növelése révén hatnak, ami a hydrogénperoxidnak a jelen, levő katalaze révén végbemenő gyorsított 45 bomlásában mutatkozik. A jelen találmányt képező eljárást akként foganatosítjuk, hogy a sejtrendszereket vagy az enzymszuszpenziókat, hatásukat ezen vagy valamely más tulajdonság 50 által kifejtő, oly könnyen adszorbeálható vegyületekkel, mint amilyenek pl. a nitrogénoxydul, acetylén, aethylen, propylen, butylen, amylen vagy ezek keverékei, rövid ideig szobahőmérsékleten érintkezésbe 55 hozzuk és azután ismert módon járunk el. Leggyengébben a nitrogénoxydul hat, sokkal erősebben az acetylén. Példák: 1. Alsóerjedésű sörélesztőből származó 50 g. száraz élesztőt, szénsavval 60 telített 150 cm.3 vízvezetéki vízzel jól elkavarunk és ezután 6—7 órán át 25—26°-nál macerálunk. Az oldatot most, valamennyi sejtalkatrésznek eltávolítása céljából, kétszer centrifugáljuk és azután felületi fe- 65 szültségét, illetve viszkozitását megállapítjuk. 20 cm.3 ily zymazeoldaton, mely mínusz 10°-on eltartva hatályosságát hetekig megtartja, 1—15 percig kereskedelmi aethylent mérsékelt áramban vezetünk át. 70 Ezen oldatot, hűvös helyen elzárva, egy éjen át állatjuk. Ezután 1 g. glukózét adagolunk az oldathoz és a 30° C.-nál fejlődő szénsavmennyiséget szénsavval telített, telített konyhasóoldatnak kiszorítása által 75 tizedfokokra osztott bürettában mérjük. Ellenőrző gyanánt egy aethylennel nem kezelt, egyébként azonban azonos zymazeoldat szolgál. Miután a cukornak legnagyobb része elhasználódott, az oldatokhoz 80