Hidrológiai Közlöny, 2014 (94. évfolyam)
2014 / 4. szám - László Kristóf - Jáger Katalin - Krett Gergely - Boros Gergely - Specziár András - Borsodi Andrea: Adatok a Balatonban élő busa fajok béltartalmának baktériumközösségeiről
36 HIDROLÓGIAI KÖZLÖNY 2014 94. ÉVF. 4. SZ. mintázatok összehasonlító elemzésének eredményét a 1. ábra mutatja be. Az egyedek egyes tápcsatorna szakaszaiból származó minták baktériumközösségeiben hasonló átlagos csíkszámot (E, 15; K, 15; U, 17) detektáltunk, s az egyes állatokban észlelt átlagos csíkszámok esetében sem volt jelentős különbség (1109/3, 19; 1109/5, 16; 1109/6, 12). A legerősebben festődő csíkok gélsávokban való elhelyezkedése alapján határozott elkülönülést lehetett megfigyelni az egyes minták között. Ennek alapján megállapítható, hogy az egy állatból származó elő- és középbéli minták mutatták egymáshoz a legnagyobb hasonlóságot. Az utóbélből származó minták külön csoportot képeztek és jobban hasonlítottak egymáshoz, mint az ugyanabból a mintából származó E és K mintákhoz. A 1109/3 és a 1109/5 jelzésű egyedek béltartalom mintáinak baktériumközösségei mindhárom bélszakasz esetében jobban hasonlítottak egymáshoz, mint a 1109/6 jelzésű egyed béltartalom mintáihoz. 1109/6U C —r—“i....n 11 no/si i raKBBHBBB*5 1109/3 U i :im:..r i 1109/5K Í :,i.....i 1 1109/3 K C .........ilJIl.] 1109/3E 1 i ^ i 1 ~j 1109/5 E I .......L-. 11 1 i 1109/6K i ...».at i 1109/6 H 1 ~~~1S55Mon i 50 T 60 “T I T 70 80 90 Hasonlóság (%) 1 100 1. ábra A busa béltartalom minták baktériumközösségeinek DGGE sávmintázata alapján szerkesztett UPGMA dendrogram Minta--— DGGE esik Filogenetikai csonort Legközelebbi rokon baktériumfai (Ezl Hasonlóság % (bo) 1109/6U 1 Cyanobacteria Planktothrix agardhii (X84811) 98.8 (420/425) 1109/6K 3 Cyanobacteria Planktothrix agardhii (X84811) 96,2 (359/373) 1109/3K 5 Cyanobacteria Planktothrix agardhii (X84811) 93,6 (354/378) 1109/5K 4 Cyanobacteria Microcystisfios-aquae (AF139327) 95,2 (357/375) 1109/3K 6 Cyanobacteria Phormidium uncinatum (EF654086) 90,9 (332/365) 1109/5K 7 Cyanobacteria Phormidium uncinatum (EF654086) 89,5 (343/383) 1109/6U 2 Gammaproteobacteria Aeromonas veronii (X60414) 98,9 (473/478) 1109/6U 8 Fusobacteria Cetobacterium somerae (AJ438155) 98,4(444/451) 3. tablazat A busa béltartalom mintákból származó DGGE csíkok filogenetikai meghatározásának eredménye a 16S rRNS gén vizsgálata alapján A PCR-DGGE molekuláris biológiai ujjlenyomat módszer előnye, hogy a gélből kivágott csíkokból visszanyert DNS szakaszok bázissorrendjének elemzésével a mintákban jelenlévő domináns szervezetekről taxonómiai-filogenetikai információ nyerhető. A kivágott csíkokból származó átlagosan 400 bázispár hosszúságú DNS szakaszok 90-99 %-os hasonlóságot mutattak már ismert és tenyésztésbe vont baktériumfajokkal. A mintákban megjelent domináns csíkok között legnagyobb arányban a Cyanobacterium törzsbe tartozó baktériumokat azonosítottunk (3. táblázat). Közülük az 1-es és 3-as jelzésű csík előfordulása valamennyi mintában megfigyelhető volt, míg az 5-ös és 6-os csík megjelenése a 3E, 3K, és az 5E, 5K mintákra volt jellemző. A 4-es és 7-es csík ugyanakkor az 5E-, és 5K mintákra volt a legjellemzőbb. A 2-es csíkból származó DNS-t a tenyésztéssel is kimutatott Aeromonas veronii fajhoz tartozónak határoztuk meg, mely a 6E és 6K minták kivételével minden mintában jelen volt. A 8-as csíkból származó DNS-t Cetobacterium somerae fajhoz tartozónak azonosítottuk, mely vizsgálataink során mindhárom busa minta utóbél szakaszában dominánsként fordult elő. Ezt a Gram-negatív, mikroaerotoleráns kemoorganotróf anya- gcseréjű szervezetet korábban is kimutatták egyes édesvízi halak tápcsatornájából (Fmegold és mtsai, 2003;Tsuchiva és mtsai, 2008). Összefoglalás A balatoni busák tápcsatornájának mikrobiológiai vizsgálata fajban gazdag baktériumközösségek jelenlétére mutatott rá. A vizsgált busa egyedek béltraktusa számos aerob és fakultatív anaerob, fakultatív patogén, de enzimtermelése révén akár pozitív hatást is kifejteni képes baktériumfaj képviselőjének ad otthont. Köszönetnyilvánítás Jelen kutatást az OTKA K83893 számú pályázat támogatásával végeztük. Irodalom Altschul, S. F„ Madden, T. L., Schaffer, A. A., Zhang, J., Zhang, Z., Miller, IV., Lipman, D. J. (1997j Gapped BLAST and PSI- BLAST: a new generation of protein database search programs. Nucleic Acids Research. 1 ;25( 17) 3389-3402. Bansemir, A., Just, N., Michalik, M., Lindequist. U.. Lalk, M. (2004) Extracts and sesquiterpene derivatives from the Red Alga Lauren- cia chondrioides with antibacterial activity against fish and human pathogenic bacteria. Chemical Biodiversity. 1, 463-467.
