Hidrológiai Közlöny 1991 (71. évfolyam)

6. szám - Varga Csaba: Ivóvizek genotoxicitás vizsgálatának irányelveiről

VARGA CS.: Ivóvizek genotoxicitás vizsgálata 347 3. táblázat Vízminták szerves szennyezőinek koncentrálására és izolálására alkalmas eljárások (Jolley, 1981) MÓDSZER KONCENTRÁLT ELŐNYÖK HÁTRÁNYOK SZERVES ANYAGOK TÍPUSA KONCENTRÁCIÓS TECHNIKÁK fagyasztás poláros, apoláros liofilezés vákuum -deszt illáoió reverz ozmózis ultraszűrés nem illékony nem illékony Ms=-200 Ms 1000 alacsony hőmérséklet alacsony hőm., magas konc., kevés szennyezés környezeti hőm., magas konc., kevés szennyezés környezeti hőmérséklet =-100 l-es térfogat környezeti hőmérséklet literes térfogat, imitált konc sókoncentr. 1 —100 l-es térfogat sókoneentráció 1—100 l-es térfogat, sókoneentráció sókoncentráció szennyezés sókoncentráció IZOLÁCIÓS TECHNIKÁK old őszei"-ex t mkció aktív szén ioncsere XAD gyanták precipitáció centrifugálás gáz-stripping apoláros, illékony, nem illékony apoláros, illékony nem illékony poláros, apoláros apolárostól polárosig, illékony, nem illékony huminanyagok, spec. vegy. makromolekulák illékonyak környezeti hőm., nagy térfogatok, kis sókonc. környezeti hőmérséklet 1000 l-es térfogatok nagy térf., jó feltárás standard környezeti hőmérséklet, nagy térfog. kis mennyiségű minták oldószerszennyeződés, specifikusság, tárolás limitált feltárás tárolás, műtermékek gyanta prep. ós eluálás szennyeződés, limitált feltárás, gyanta prep. specifikusság specifikusság, kis térf. kis térfogatok az oszlopokat mintavételi csapra szereljük. Mivel azonban a gyanták feltárása pH 2-nél a legjobb (Ringhand et al., 1987), célszerű a közel semleges frakciók mellett pl. egy sóval savanyított mintát is preparálni. Az oszlopok eluálása egy ágytérfogat dimetil-szulfoxiddal (DMSO) történhet. A javasolt végső koncentrálási fok 7000x-es. A DMSO előnye a többi eluenssel szemben az, hogy pl. az acetonos, metanolos stb. elució utáni bepárláskor az illékony kompenensek elvesznek. A DMSO megfelelő eluáló hatással rendelkezik (Kool et al., 1981), továbbá biológiai tesztekben inert (Latt et al., 1981), így közvetlenül alkalmazható. A bepárlási maradékokat egyébként szintén DMSO-ban célszerű oldani. 4.2 Genotoxicitás-vizsgálatok A javasolt szűrővizsgálati rendszer a következő teszteket öleli fel: In vitro Ames-mutagenitás. A klasszikus Salmonella typhimurium bakteriális pontmutációs teszt metabolikus aktiválással és anélkül (Ames et al., 1975). A javasolt teszttörzsek: TA 98 és TA 100. A teszt felvilágosítást nyújt az anyagok prokariota DNS-re gyakorolt közvetlen hatásáról. Kromoszóma-aberrációs analízis emberi limfocitákon in vitro. 48 órás emberi limfocita-tenyészetek mitotikus kromoszómáinak vizsgálata a DMSO-eluátumok különböző koncentrációinak jelenlétében metabolikus aktivációval és anélkül. Az analízis eredménye az esetleges klasztogén (kromoszómatörést előidéző hatásról nyújt felvilágosítást. SCE-analízis emberi limfocitákon in vitro. 72 órás emberi limfocita-tenyészetekhez a tenyésztés 48—50. órájában adjuk a tesztelendő eluátumokat különböző koncentrációkban metabolikus aktiválással és anélkül. A testvérkromatid-csere gyakoriság emelkedése egyrészt mint önálló citogenetikai végpont, másrészt közvetve az emberi sejtekben előidézett génmutációs potenciálról nyújt értékes információt. A SCE-k gyakoriságának emelkedése érzékenyen jelzi a DNS-ben történő legkülönfélébb változásokat. Általában a kromoszóma aberrációs teszt érzékenységét 2—3 nagyságrenddel múlja felül (Varga, 1988a). Az SCE-teszt normál érzékenységű emberi sejteken történő alkalmazása az extrapolációs problémák elkerülésével a közvetlen kozkázatbecslést nagyban elősegíti (Wolff, 1983). In vivo kromoszóma-aberrációs vizsgálat. Az in vitro tesztek mellett kiegészítésként indokolt egy