Fogorvosi szemle, 2008 (101. évfolyam, 1-6. szám)
2008-08-01 / 4. szám
158 FOGORVOSI SZEMLE ■ 101. évf. 4. sz. 2008. kezdtek. A primer egysejtes szuszpenzió, illetve a tripszinnel kezelt tenyészetek sejtjei gömbölyded alakúak, majd a letapadás után hosszúkás, fibroblasztszerű morfológiát alakítottak ki. Miután konfluens monolayert képeztek, a sejtek között fellépő kontaktgátlás következtében lelassult a proliferációjuk. Az izolált sejtkultúrákat sikerült stabilizálnunk, egyes esetekben több mint 20 passzázst követően is életképesek maradtak a PDL eredetű sejtek. A sejtkultúrák jellemzően az izolálást követő második héten homogén monolayert alakítottak ki a tenyésztőedényekben, ezután hetente egy alkalommal volt szükség a sejtek átültetésére (1. ábra). A sejttenyészetekben 105 sejtszámra vonatkoztatva átlagosan 25-30 kolónia volt kimutatható, ez az adat közelítőleg megegyezik a mesenchymalis őssejtekre jellemző értékekkel (2. ábra). Az FCS sejttenyészetek 2. ábra A sejttenyészetekben 105 sejtszámra vonatkoztatva átlagosan 25-30 kolónia volt kimutatható életképességére gyakorolt hatását a szérummegvonásos kezeléshez képest a tenyésztőmédiumhoz adott 5, 10, 15%-os koncentrációkban vizsgáltuk MTT-analízis segítségével. Az FCS kezelések mindegyike szignifikánsan növelte az életképes sejtek számát a szérummegvonáshoz képest (3a. ábra). kőről szignifikáns serkentő hatást a PDL eredetű sejttenyészetek életképességére (3b. ábra). FCS hatása szinkronizált, p3 PDLSC sejtekre, MTT 450.00 400.00 350.00 300.00 250.00 200.00 150.00 100.00 50,00 0,00 kontroll 5% FCS 10% FCS 15% FCS FCS mennyisége 3a. ábra A szérum (FCS) szinkronizált p3 PDLSC sejtekre gyakorolt hatása. A FCS-kezelések mindegyike szignifikáns hatásúnak bizonyult a sejtek életképességére a szérummegvonáshoz képest, p<0,05 A tenyésztési felület Emdogainnel történő előkezelését követően megfigyelhető volt, hogy az Emdogainlerakódások a PDLSC sejteket migrációra serkentették. A fáziskontraszt mikroszkópos felvételek olyan Emdogain hatása PDLSC sejtekre EMD EMD EMD EMD EMD 3b. ábra Az Emdogain® PDLSC sejtekre gyakorolt hatása, MTT-analízis. A zománcmátrix-kivonat a 200, ill. 400pg/ml-es dózisokban fejtett ki szignifikáns hatást a tenyészetek életképességére a szérummegvonásához képest, p<0,05 A zománcmátrix fehérje tartalmú Emdogain hatásának vizsgálata a sejttenyészetek életképességére és morfológiájára Az Emdogain® hatását a szérummegvonásos kezeléshez viszonyítva 25, 50, 100, 200, 400 pg/ml-es koncentrációkban vizsgáltuk. Eredményeink azt mutatják, hogy a zománcmátrix fehérje készítmény a vizsgált magasabb, 200, 400 pg/ml-es koncentrációkban gyasejtcsoportokat mutatnak, amelyek az Emdogain-cseppek körül alakultak ki. A távolabb elhelyezkedő PDLSC sejtek citoplazma-nyúlványokkal igyekeztek ezekhez a csomókhoz kapcsolódni (4. ábra). Mesenchymalis őssejtmarkerek vizsgálata FACS analízist a STRO-1, CD34 és c-kit mesenchy-
