Fogorvosi szemle, 1961 (54. évfolyam, 1-12. szám)
1961-04-01 / 4. szám
98 BRAUN IRÉN DR mennyiségét n KOH-ban feloldjuk, a pH-t 7,4-re állítjuk, majd az oldat térfogatát 100 ml-re egészítjük ki. Az oldat jégszekrényben 4—6 hétig is eláll. B) 100 g trichlorecetsavat 100 ml dest. vízben oldunk. Korlátlan ideig tárolható. C) 5 g citromsavat 5 ml dest. vízben oldunk, majd 5 ml anilint adunk hozzá. Hosszú ideig eláll, de ha zavarossá válik, új oldatot kell készíteni. D) 100 mg 2-4-dinitrophenylhydrazint 20 ml conc. sósavban oldunk, majd 80 ml dest. vizet adunk hozzá. Néhány hónapig eltartható. E) Toluol. Korlátlan ideig eláll. F) 2,5 g KOH-t 100 ml 95% alkoholban oldunk. Ezt az oldatot 3—5 naponként cserélni kell, de ha zavaros, hamarabb. Kivitel: Minden meghatározáshoz 2 centrifugacsövet állítunk be ; mindegyikbe 0,5 ml nyálat cseppentünk. Az egyik jelzése „anyag”, a másiké „vak”. Először a ,,vak”-ba cseppentünk 1—1 cseppet a B) és C) oldatból. Összerázás után mindkét csőbe 0,5 ml-t adunk 25^2 C° szobahőmérsékleten az AJ oldatból. Pontosan 20 perc múlva 1—1 csepp В) és C) oldatot adunk az „anyaghoz”, jól felrázzuk és 20 percig állni hagyjuk. Ez idő alatt képződik a pyroszőlősav. E 20 perc letelte után mindkét csőhöz 0,5 ml D) oldatot adunk, enyhe rázás után 5 percig állni hagyjuk. Ezután mindkét csőbe 2 ml E) oldatot öntünk, mintegy fél percig erősen összerázzuk, majd 15—20 percre centrifugába helyezzük és nagy fordulatszámmal centrifugáljuk. Három réteg képződik : felül tiszta, átlásztó folyadék, középütt sűrű réteg, alul zavaros folyadék. Óvatosan leszívjuk pipettával a felső kristálytiszta, enyhén sárgás színű réteget. Ebből 1—1 ml-t a megfelelő jelzésű kémcsőbe („anyag” és „vak”) pipettázunk. Ehhez adunk .3 ml F) oldatot. Jól összerázzuk és a keletkezett piros színt Beckman-photometerben 440 mp, hullámhosszon olvassuk le. E meghatározásban 1 egység GOT 1 ml nyál aktivitását jelzi, mely 20 perc alatt 25^2 C° hőmérsékleten az adott substratumból 1 у pyroszőlősavat képez. Ugyanilyen módszerrel történik a GPT meghatározása is. Az A) oldat ez esetben azonban az asparaginsav helyett 1,6 g dl alanint tartalmaz. A PE-aktivitást Dán eljárása szerint határoztuk meg. Eszerint a nyálat Witte-peptonnal incubaljuk. 24 órai incubatio után fehérjementes szürletben meghatározzuk a közben felszabadult amino-N mennyiségét Troli és Cannan ninhydrines módszerével. A PE-aktivitás annyi egység, ahány mg amino-N-t szabadít fel 100 ml nyál. A meghatározást 0,2 ml nyálban végeztük. Szükséges oldatok: A) Witte-pepton. Száraz és hűvös helyen sterilen tartandó. B) Alcohol abs. C) 60% aethylalcohol. D) Ninhydrin-oldat : 500 mg ninhydrin oldata 10 ml abs. alcoholban. E) Phenol-alcohol : 80 ml dest. ammónia-mentes phenolhoz adott 20 ml abs. alcohol. F) Pyridin-cyankalium-oldat : 2 ml 0,01 n KCN- és 100 ml ammóniamentes pyridin-oldat keveréke. G) Amino-N-törzsoldat. Amino-N-tartalma 10 у/ml. Ezt készíthetjük leucinből vagy isoleucinből (46,78 mg), phenylalaninból (58,93 mg), valinból (43,22 mg) vagy glycinből (26,78 mg). Ezek bármelyikét 20 ml bidest. vízben oldjuk, és abs. alcohollal 50 ml-re feltöltjük. E törzsoldatból 0,1 ml-ben 1,
