Fogorvosi szemle, 1961 (54. évfolyam, 1-12. szám)
1961-04-01 / 4. szám
NYÁLKÉMIA 99 2, 3, 5, 10, 20 у amino-N-t tartalmazó hígításokat készítünk. Minden hígítással 0,1 ml-ben színreakciót végzünk az alább leírt módon és az extinctiós összefüggést grafikonon ábrázoljuk. Incubatio: Steril Wassermann-csövekben 0,2 ml nyálhoz 0,2 ml 5% pepton-oldatot adunk enyhe, habzásmentes rázással. Két csepp toluolt rétegezünk fölé. Steril gumidugóval lezárjuk a csöveket és 24 órára thermostatba helyezzük 37 C°-on. A pepton-vakpróba kivitelezésekor 0,2 ml nyálat és 2 csepp toluolt helyezünk a thermostatba és a peptont csak a 24 óra letelte után, közvetlenül a fehérjementesítés előtt adjuk hozzá. A peptont is a thermostatban tartjuk 24 órán át. Fehérjementesítés: A keverékhez 1,6 ml abs. alcoholt adunk. Enyhe rázás után 10—15 percig állni hagyjuk, majd centrifugáljuk. Elősegíti a fehérjementesítést és megkönnyíti a centrifugálást, ha a csőbe az alcohol hozzáadása előtt 2 csepp serumot adunk. Színreactio: Megfelelően számozott kémcsövekbe 0,5 ml phenylalcoholt és 0. 5 ml pyridin-cyankáliumot mérünk. Ehhez adunk 0,1 ml fehérjementesített inkubált oldatot. A csöveket 2 percre forró vízfürdőbe állítjuk, majd minden csőbe 0,1 ml (6 csepp) ninhydrin-oldatot adunk ; 4,5—5 percig forraljuk. Ezután folyóvízben lehűtjük a csöveket, s mindegyikbe 9,5 ml 60% alcoholt adunk. Az oldat élénk kék színű lesz. A színerősség 24 óra múltán sem változik. Leolvasás Pulfrich-photometerben 5 mm-es cuvettaban, a reagens ,,vak”-kal összehasonlítva. Reagens „vak” : 0,5 ml phenylalcohol, 0,5 ml pyridincyankálium és 0,1 ml 60% alcohol keverékének a photometerben azonos körülmények között leolvasott értéke. Számítás: a pepton „vakpróba” extinctióját levonjuk az inkubált anyag extinctiójából és az ennek megfelelő amino-N értéket közvetlenül leolvassuk az extinctiós-grafikonból. Az 1 у amino-N-t felszabadító peptonaseaktivitást nevezik peptonase-egységnek. Az egységeket 100 ml nyálra vonatkoztattuk. Eredmények : A nyál ferment-aktivitására vonatkozó eredményeinket az 1. táblázat, a nyál és a serum enzym-aktivitása közötti összefüggéseket az 1. ábra mutatja. A táblázat és ábra adataiból a következőket állapíthatjuk meg : CER GOT N = 20-----\- N = 70 0 U 1 2 L—10 0 3 10—30 6 15 30—50 8 28 50—80 5 20 80—120 0 2 GPT 0 u 2 4 1 — 10 1 0 10—30 7 9 30—50 4 10 50—80 5 29 80—160 1 18 PE 0 U 0 0 1—20 0 0 20—40 2 8 40—60 6 29 60—80 8 38 80—100 4 5