Szemészet, 2013 (150. évfolyam, 1-4. szám)
2013 06-01 - Supplementum
2013. június 21péntek/21 June 2013, Friday Purpose: Analysis of morphological changes developed during epiretinal membrane (ERM) formation associated with vision deterioration. Methods: We compared data of twenty-two eyes with idiopathic ERM with that of 12 healthy subjects (group C). In the ERM group best corrected visual acuity (BCVA) was 0.5 or worse in ten eyes (group A) while 12 eyes had 1.0 BCVA (group B). OCT scans were performed in each eye and segmentation analysis was carried out by OCTRIMA software. The thickness of the intraretinal layers was calculated for the central, pericentral and peripheral regions of the macula. Results were compared with data of one patient in whom ERM formation causing vision deterioration was documented after uneventful cataract surgery. We observed the alterations in retinal structure due to the development of ERM and changing of its localization. Results: Significant increase was observed centrally in the thickness of the outer nuclear layer (ONL) in group A and В compared to group C. In the two outer rings, the thickness of each neuroretinal layer was significantly increased in group A compared to both groups В and C. The strongest correlation was between logAdAR BCVA and the thickness of the ONL in the central region, and the thickness of the ganglion cell layer (GCL) and inner plexiform layer complex in the pericentral ring. In the observed patient, the thickness of the ONL increased due to the ERM affecting the fovea, while the peripheral displacement of the membrane returned ONL thickness to normal parallel with an increase in the thickness of the GCL complex. Conclusions: Beyond the desintegration of the photoreceptor layer, changes in the pericentral and peripheral ganglion cells might play a role in visual deterioration, therefore the whole retina is affected by the structural changes during ERM formation. Our results may refine the indication of surgical intervention in ERM cases where multiple factors can possibly influence the development of visual impairment. Cornea stroma eredetű mesenchymalis őssejtszerű sejtek szerepe az immunitásban, a sebgyógyulásban és az angiogenezisben Albert Réka1, Veréb Zoltán2, MC Мое3, Fésűs László4, Rajnavölgyi Éva2, Facskó Andrea5, Berta András6, Petrovski Goran1 1Debreceni Egyetem OEC Szemklinika, Biolkémiai és Molekuláris Biológiai Intézet, Debrecen, 2Debreceni Egyetem OEC, Immunológiai Intézet, Debrecen, 3Center for Eye Research, Department of Ophthalmoloy, Ullevál University Hospital, University of Osi, 4Debreceni Egyetem OEC, Biokémiai és Molekuláris Biológiai Intézet, Debrecen, 5Szegedi Egyetem, Szemészeti Klinika, Szeged, 6Debreceni Egyetem OEC, Szemklinika, Debrecen Célkitűzés: Egy olyan in vitro rendszer létrehozása, amelyben tanulmányozni tudjuk a cornea stromaig hatoló sebeit valamint a stroma eredetű őssejtek immunitásban, sebgyógyulásban és érüjdonképzódésben betöltött szerepét. Módszer: A cornea gombokat cadaverekból gyűjtöttük. Az epithel és endothel réteg eltávolítása után, a stroma sejteket sejttenyésztő edényben, humán szérumot tartalmazó tápfolyadékban proliferáltattuk. Áramlási citométert, génarrayt, immunfluoreszcens festést és standardizált in vitro differenciációs assayt használtunk a sejtek mesenchymalis őssejtszerű fenotípusának igazolására. Funkcionális teszteket, köztük kevert limfocita reakciót, sebgyógyulás- és érhálózatképzó assayt is végeztünk. Eredmények: A cornea stroma eredetű sejtek képesek sejtkultűrában, akár 10 passzálást követően is nőni (n = 6). A legfontosabb mesenchymalis őssejt markereket (CD73, CD90, CD105, CD44, CD147, PDGFRb) nagy mértékben expresszálták, ugyanakkor endothel vagy haematopoetikus sejt markereket nem fejeztek ki felszínükön. Csont-, porc-, zsír irányú differenciálódás sikeresen zajlott. Képesek voltak gátolni az aktivált perifériás limfociták proliferációját, migrálni és zárni a sebet 24 órán belül és spontán érhálózatszerű struktúrát létrehozni Matrigelen 8 óra alatt. Következtetés: Létrehoztunk egy állati anyag mentes módszert a cornea stroma eredetű, mesenchymalis őssejtszerű sejtek tenyésztésére. Sikeresen tanulmányoztuk szerepüket az immunitásban, sebgyógyulásban és az angiogenezisben in vitro, amely megfelelő modellként szolgálhat a cornea stromáig terjedő sérülések és azok gyógyításának tanulmányozására. Role of human corneal stroma-derived mesenchymal-like stem cells in immunity, wound healing and angiogenesis Réka Albert1, Zoltán Veréb2, MC Мое3, László Fésűs4, Éva Rajnavölgyi2, Andrea Facskó5, András Berta6, Goran Petrovski6 1Department of Ophthalmology, Department of Biochemistry and Molecular Biology, University of Debrece, department of Immunology, University of Debrecen, Debrecen, 3Center for Eye Research, Department of Ophthalmology, Ullevál University Hospital, University of Osl, department of Biochemistry and Molecular Biology, University of Debrecen, Debrecen, department of Ophthalmology, University of Szeged, Szeged, department of Ophthalmology, University of Debrecen, Debrecen Purpose: Our goal was to establish in vitro assay for studying human corneal stroma injuries and the role stroma-derived stem cells have on immunity, wound healing and neovascularization processes. Methods: Human corneal buttons were harvested from cadavers. Following removal of the epithelial and endothelial layers, stromal cells were proliferated in vitro on cell culture plate in medium containing human serum as the only supplement. To confirm MSC-like phenotype, FACS and gene array analysis, immunofluorescent staining and standardized in vitro differentiation assays were used. Functional tests including mixed lymphocyte response, wound healing and vascular tube-formation were also performed. Results: Corneal stroma cells could grow in culture for more than 10 passages (n=6). The most important markers of MSCs (CD75, CD90, CD105, CD44, CD147, PDGFRb) were highly expressed, and no endothelial or hematopoietic cell markers were present on their surface. Differentiation into adipogenic, chondrogenic and osteogenic lineages were successful. Corneal stroma MSC-like cells could 39
