Szemészet, 2003 (140. évfolyam, 1-4. szám)
2003-09-01 / 3. szám
Szemészet 140. évfolyam (2003) 169 A Semmelweis Egyetem, I. Szemészeti Klinika (igazgató: Süveges Ildikó egyetemi tanár), a Semmelweis Egyetem I. Kórbonctani és Kísérleti Rákkutató Intézet (igazgató: Kopper László) és az. MTA-SE EKSZ Molekuláris Patológiai Kutató Csoport (vezető: Szende Béla) közleménye Apoptosis a corneában fotorefraktív keratectomia után Szentmáry Nóra, Resch Miklós, Nagy Zoltán Zsolt, Szende Béla, Süveges Ildikó Célkitűzés: Az apoptosis vizsgálata fotorefraktív keratectomia után. Módszerek: 17 nyúl jobb szemén lokális és általános érzéstelenítés után fotorefraktív keratectomiát végeztünk (-6,0 D, 6 mm ablációs átmérő) Asclepion-Meditec MEL 70G.scan excimer lézerrel. A posztoperatív szakban folyamatosan rögzítettük a cornea állapotát. Az állatokat 1, 4, 7, 14 és 28 nappal a műtét után túlaltattuk és a corneákat a fenti 5 csoportba osztva szövettanilag elemeztük. Az apoptosist citológiai jelek alapján és TUNEL-próbával vizsgáltuk. Kontrollként az állatok kezeletlen bed szemét használtuk. Eredmények: Haze-képződést két esetben figyeltünk meg. Négy, 7 és 14 nappal a fotorefraktív keratectomia után mutattunk ki keratocyta-apoposist a stroma felső rétegében. Egy esetben 2 héttel a műtét után az apoptosist abban a corneában igazoltuk, ahol a haze-képződés is jelen volt. A kontroll egészséges corneákban apoptosis nem volt igazolható. Következtetések: A fotorefraktív keratectomia cornealis keratoeyták apoptosisát indukálta. A keratoeyták apoptosisának mértéke és megoszlása valószínűleg meghatározó a cornealis sebgyógyulás folyamatában, azonban a pontos szabályozó mechanizmusok egyelőre nem ismeretesek. Kulcsszavak: apoptosis, cornea, fotorefrakív keratectomia Apoptosis in the cornea after photorefractive keratectomy Purpose: To examine the occurrence of corneal apoptosis subsequent to photorefractive keratectomy. Methods: Photorefractive keratectomy (-6.0 D, 6 mm optical zone) was performed with the Asclepion-Meditec MEL-70 G-scan excimer laser on 17 right rabbit eyes, under local and general anaesthesia. After surgery the corneal status was continuously recorded. Groups of animals were sacrificed on the 1st, 4th, 7th, 14th, and 28th postoperative days, and the corneas of the 5 groups were analysed histologically. Apoptosis was detected by considering cytological signs and by using the TUNEL assay method. The untreated left eyes served as controls. Results: Haze formation was observed in two cases. Keratocyte apoptosis was detected in the upper stroma at 4, 7, and 14 days after photorefractive keratectomy. In one case, two weeks after surgery apoptosis was found to be present in the cornea with haze formation. No apoptotic activity was present in the control, normal corneas. Conclusions: Photorefractive keratectomy was found to trigger apoptosis of corneal keratocytes. The degree and distribution of keratocyte apoptosis are both likely to be important determinants of the corneal wound healing process, but the exact regulatory mechanisms have not yet been characterised. Key words: apoptosis, cornea, photorefractive keratectomy A cornealis homeostasist szabályozó folyamatok pontos működése nem ismeretes. A cornealis sejtek apoptosisa (programozott sejthalála) központi szerepet játszik a különféle környezeti hatásokra adott válaszreakcióban: a szaruhártya integritásának megőrzésében, szerkezetének, funkciójának fenntartásában, valamint a sebgyógyulásban. Számos protein apoptosist reguláié hatása beigazolódott: az interleukin-1,12 a FAS-ligand protein,513 a bone morphogenic protein 2 és 4,2*6 a fibroblast eredetű anti-apoptoticus faktor,12 a bcl-2 apoptosist gátló protein,2 a VI. típusú kollagén jelenléte egyaránt12 az apoptoticus program modulálásában vesznek részt. Ezeknek a fehérjéknek a szintézise és expresszálása genetikailag determinált. Az 1990-es évek elején megkezdett fotorefraktív kezelések rendkívül ígéretesek a fénytörési hibák korrigálásában, azonban a műtétet követő sebgyógyulási folyamatok és azok szabályozása csak részben ismert.7,8’12’14 Korábbi vizsgálatok eredményei alapján a kezeléseket követően az apoptoticus folyamatok központi szerepet játszhatnak a cornea regenerációjában, sebgyógyulásában.2'4 Ezért munkánkban célul tűztük ki az apoptoticus tevékenység vizsgálatát nyúl szaruhártyákon, fotorefraktív keratectomiát (PRK) követően. Módszerek A kísérletek lebonyolítása és az állatok tartása megfelelt a nemzetközi szabályoknak (NIH, No. 85-23, 1985), a kísérleti protokollt a Fővárosi Állategészségügyi és Élelmiszer Ellenőrző Állomás jóváhagyta. Tizenhét, 2,5-3,5 kg testsúlyú pigmentáll nyúl jobb szemén fotorefraktív keratectomiát végeztünk. Az állatokat Szentmáry Nóra: Apoptosis a corneában fotorefraktív keratectomia után
