Szemészet, 2002 (139. évfolyam, 1-4. szám)
2002-03-01 / 1. szám
Szemészet 139. évfolyam (2002) 13 Debreceni Egyetem Orvos- és Egészségtudományi Centrum Szemészeti Klinikájának (igazgató: Berta András egyetemi tanár) közleménye Ca2+-anyagcsere vizsgálatok humán extraocularis szemizmokban Facskó Andrea, Nagy Annamária Célkitűzés: A foszfolamban (PLB) és a szarkoplazmatikus retikulum (SR) Ca2+-ATP-áz a Ca2*-anyagcsere fontos szabályozó fehérjéi mind a szív-, váz- és a simaizomban. Normál állapotban a PLB erőteljes gátló hatást fejt ki az SR Ca2*-pumpára és lassítja a Ca2*-felvételt. Kevés adat ismert a humán extraocularis izmok Ca2*-anyagcseréjében szerepet játszó fehérjék (PLB, SR Ca2*-ATP-áz) szöveti mennyiségéről normál körülmények között, illetve strabismus kapcsán. Ebben a tanulmányban a szerzők megvizsgálták a két protein jelenlétét és arányát a strabismusműtétből származó rectusizmokban (lateralis, medialis), illetve enucleatio során nyert normál izomban. Módszer: A PLB és a SR Ca2*-ATP-áz szöveti szintjének meghatározását a proteinek elektroforetikus szétválasztását követően kvantitatív western-blot segítségével végezték. Eredmények: A membránfrakció Ca2*-ciklus fehérjéinek szignifikáns (p<0,05) csökkenését találtuk mind a PLB, mind az SR Ca2*-ATP-áz esetén a strabismusellenes műtétből származó, elongált egyenes izmok mintáiban a normál kontrolihoz képest (PLB: I33±18 vs. 94±12; SR Ca2*-ATP-áz: 244±21 vs. 113±I7 pixel/mg protein x 10'3). A két protein szöveti mennyiségének aránya (PLB/SR Ca2*-ATP-áz) a strabismusos mintában szignifikáns emelkedést (0,83±0,15) mutatott, a kontrolihoz képest (0,55±0,12), ami a gátló tulajdonságú PLB mennyiségének relatív felszaporodását jelenti. Következetés: A strabismusból származó extraocularis izomban a Ca2*-anyagcserében részt vevő fehérjék szöveti szintjének csökkenése és a PLB/SR Ca2*-ATP-áz arányának emelkedése bizonyítja a celluláris funkció károsodását. Kulcsszavak: SR Ca2*-ATP-áz, foszfolamban (PLB), strabismus EXAMINATION OF CA2+ CYCLING PROTEINS IN EXTRAOCULAR HUMAN MUSCLES Purpose: Phospholamban (PLB) and sarcoplasmic reticular (SR) Ca2*-ATPase are important regulators of the Ca2* metabolism in the slow skeletal muscles, smooth muscles, and cardiac muscles. Under basal conditions PLB is an inhibitor of SR Ca2*-ATPase, by decreasing its affinity to Ca2*. Little data is available on the relative tissue amounts of Ca2* cycling proteins (PLB and SR Ca2*-ATPase) in the extraocular muscles either under normal conditions or in strabismus. The authors discuss the presence, and ratio of, these two proteins found in lateral and medial rectus human muscle tissue samples removed during enucleation or strabismus surgery. Methods: Membrane vesicles were isolated, electrophoresed, and assessed using the quantitative blot-test to examine the relative tissue amounts of PLB and SR Ca2*-ATPase in the tissue samples. Results: Measurement of the relative tissue amounts of Ca2* cycling proteins in the membrane fraction revealed significant decreases (p<0.05) for both PLB and SR Ca2*-ATPase in the samples prepared from the elongated rectus muscle compared with the values for control samples (PLB: 94±12 vs. 133±18; SR Ca2*-ATPase: 113±17 vs. 244±2I pixel/mg protein x 10-3). Moreover, the ratio of the two proteins (PLB/SR Ca2*-ATPase) was significantly increased in the elongated rectus muscles with strabismus (0.83+0.15), compared with the ratio for control samples (0.55±0.12), showing the increased preponderance of the inhibitory regulator PLB. Conclusion: The decrease in the tissue amount of the Ca2* cycling proteins and the increase in the PLB/SR Ca2*ATPase ratio are indicators of the functional impairment of the extraocular muscle tissue in strabismus. Keywords: SR Ca2*-ATPase, phospholamban (PLB), strabismus Bevezetés Az emlős izomzatban az intracelluláris Ca2+-szintet a szarkoplazmatikus retikulum (SR) hálózat szabályozza, amely a relaxáció során Ca2+-raktárként, a kontrakciók során pedig Ca2+-ionokat biztosító forrásként szolgál. Az Zajácz Magdolna professzornő 70. születésnapja tiszteletére izomban a Ca2+-felvételt egy SR-membránban található enzim, a Ca2+-ATP-áz katalizálja. A lassú, oxidativ (slowtwich) vázizomban, a myocardiumban és a simaizomban az SR Ca2+-ATP-áz működését egy kis molekulasúlyú fehérje szabályozza, amelyet foszfolambannak neveztek el. A foszfolamban molekulatömege 6080 dalton; a natív membránokban pentamerként viselkedik. Aminosavszekvenciája ismert és igen konzervatívan megőrzött a törzsfejlődés során. Alapállapotban (defoszforilált állapotban) a foszfolamban Facskó Andrea: Ca2+-anyagcsere vizsgálatok humán extraocularis szemizmokban
