203906. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a merszacidin nevű új antibiotikum és sói és hatóanyagként e vegyületeket tartalmazó gyógyászati készítmények előállítására
1 HU 203 906 B 2 3. táblázat Merszacidin antibakteriális hatása in vitro Szám Tesztorganizmus MIC-érték (pg/ml) 1. Staph, aureus 209P 0,78-1,56 2. Staph, aureus E 88 6,25-12,50 3. Staph, aureus 3066 12,50-25,00 4. Staph, aureus 20240 3,12-6,25 5. Staph, aureus 20424 1,56-3,12 6. Staph, aureus 503 0,78-1,56 7. Staph, aureus 789 0,78-1,56 8. Staph, aureus 722 3,12-6,25 9. Staph, aureus SG 511 0,39-0,78 10. Staph, aureus 20666 3,12-6,25 11. Staph, aureus E 712 3,12-6,25 12. Staph, aureus 285 0,78-1,56 13. Staph, aureus R 85 0,39-0,78 14. Staph, aureus 710 0,3^-0,78 15. Micrococcus luteus 0,0975-0,195 16. Bacillus subtilis 0,39-0,78 17. Streptococcus faecalis 0,0975-0,195 18. Str.D 21777 1,56-3,12 19. S. epidermidis MRSE 0,5-16,0 20. S. epidermidis MSSE 0,5-16,0 21. Streptococcus A csoport 0,5-8,0 22. Streptococcus B csoport 1,0-8,0 23. Streptococcus C csoport 2,0-64 24. Streptococcus G csoport 2,0-8,0 25. Streptococci bovis 4,0-32,0 26. Streptococcus viridans 0,5-32,0 27. Streptococcus faecalis 64,0 28. Streptococcus pneumoniae 1,0-4,0 29. Corynebacterium JK 2,0-4,0 30. Listeria monocyctogenes 16,0-64,0 31. Clostridium species 0,5-16,0 32. Peptostreptococci species 0,5-8,0 33. Propionobacterium genes 1,0-16,0 (b) Merszacidin hatása in vivo A merszacidin in vivo vizsgálatát egérben végezzük. A kísérletekben a merszacidin aktivitása jó. A Staphylococcus aureus SG 511 és S. aureus 710 (meticillin-rezisztens) törzzsel kísérletesen fertőzött egerek gyógyulása 100%-os 9,37, illetve 25 mg/kg szubkután adott merszacidin hatására. Ezenkívül a vegyület akut toxicitását is vizsgáltuk laboratóriumi egereken. 500 mg/kg szubkután dózisban (ez az eddig vizsgált legmagasabb koncentráció) nem tapasztalunk pusztulást az állatok között. Az eredményeket a 4. és 5. táblázatban foglaljuk össze. A merszacidin hatását patkányokon is vizsgáljuk in vivo, S. aureus SG 511 okozta tályog ellen, vankomicinnel összehasonlítva. A fertőzést 2-109 telepképző egység baktérium 5%os mucinos szuszpenziójának bőr alá injektálásával végezzük. A kezelést 50 mg/kg dózissal végezzük, 7 napon keresztül. 4. táblázat Merszacidin hatása S. aureus SG 511-gyel fertőzött egéren, vankomicinnel összehasonlítva (fertőződózis: l,75*109TKE/egér) Vegyület Dózis/adagolás mg/kg»3 s.c. Gyógyult/kezelt egerek száma (%-os gyógyulás) Közelítő EDjo, ED90 mg/kg*3 merszacidin 9,37 53/53 (100) 6,25 38/40 (95) 2,59 3,12 18/27 (67) 5,38 1,60 3/24 (12) 0,80 0/27 (0) vankomicin 18,75 71/71 (100) 12,5 59/61 (97) 7,20 9,37 48/53 (85) 9,37 6,25 13/44 (29) 3,12 2/41 (5) 5. táblázat Merszacidin hatása S. aureus E 710 (MRSA) fertőzés ellen egéren, vankomicinnel összehasonlítva (fertőző dózis: 5*109 TKE/egér) (1 MLD) Vegyület Dózis/adagolás mg/kg»3 s.c. Gyógyult/kezelt egerek száma (%-os gyógyulás) Közelítő ED50, ED90 mg/kg-3 merszacidin 25,00 12/12 (100) 10,81 12,50 10/16 (63) 19,59 9,37 4/10 (40) 6,25 1/10 (10) vankomicin 37,00 6/6 (100) 18,94 25,00 14/21 (67) 32,01 12,50 3/11 (27) 6,25 0/11 (0) A merszacidin 1,4 logio TKE/ml-rel csökkenti a baktériumok számát, a vankomicin 0,79 logio TKE/ml-rel (TKE-telepképző egység, MLD-letális dózis egérben). 6. példa Merszacidin vízoldható sóinak előállítása A merszacidin alkálifémsói formájában vízoldható. Ezeket a sókat például úgy állíthatjuk elő, hogy a merszacidint egy ekvivalens megfelelő alkálifém-hidroxiddal reagáltatjuk, piridin jelenlétében. Például 50 mg merszacidint 1 ml piridinben oldunk, az oldatot 0 °C-ra lehűtjük, és keverés közben hozzáadjuk 1,683 mg kálium-hidroxid 3 ml desztillált vízzel készült oldatát. Az elegyet 0 'C-on 1 órán keresztül keverjük, majd liofilizáljuk. 49 mg kálium-merszacidint kapunk, fehér por formájában. A fenti kálium-merszacidin vízoldhatósága 160 mg/ml. A kálium- merszacidin in vitro és in vivo anti-5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 6
