203894. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszforsavtartalmú szkvalén szintetáz inhibitorok és az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 203 894 B 2 és liofilizáljuk. Az így kapott sárgásbarna port a lehető legkisebb mennyiségű vízben feloldjuk, és egy 2,5 cm átmérőjű, 22 cm magas, HP-20 vizes szuszpenziójával töltött oszlopon, közepes nyomással kromatografáljuk. Az eluálást metanol és víz elegyével, koncentrációgradienst alkalmazva végezzük, miszerint 600 ml vízhez adjuk fokozatosan 800 ml metanol-víz 75:25 arányú elegyét. 10-15 ml-es frakciókat szedve, a 42-61. frakciókból liofllizálással kapott higroszkópos fehér port nagyvákuumban tovább szárítjuk, és így 349,3 mg (74%) cím szerinti vegyülethez jutunk. A termék 1 tömeg%-os vizes oldatának pH-ja 8,75, vékonyrétegkromatográfiás Rf-értéke szilikagélen, butanol, tömény ammónium-hidroxid és víz 6:3:1 arányú elegyével kifejlesztve a kromatogramot 0,31. Infravörös színkép (KBr): 3300, 2972, 2924, 2854, 1640, 1218, 1199, 1118,1045,997,553,530 cm-1. 1 H-NMR-spektrum (D20): 8 7,22 (td, 1H, J-17, 11 Hz); 6,07 (d, 1H, J-ll Hz); 5,93 (dd, 1H, J-17,22 Hz); 5,17 (m, 2H); 2,17 (s, 4H); 2,10 (q, 2H, J-7 Hz); 2,02 (t, 2H, J-7 Hz); 1,87 (s, 3H); 1,68 (s, 3H); 1,61-1,62 (két s, 3H egyenként) ppm. 31P-NMR-spektrum (D20): 8 21,5 (td, Jpp-47 Hz, Jpf-81 Hz); 4,90 (td, Jpp-47 Hz, Jpf-74 Hz) ppm. Tömegspektrum (FAB, +ionok): m/e 565 (M+K), 527 (M+H), 489 (M- K+2H), 309, 271, 246, 217, 208, 157. 5. példa (E,E)-{[Hidroxi-(4,8,12-trimetil-3,7,11 - -tridekatrienil)-fos7finil]-metil}-fos7fonsav-monometil-észter dinátriumsója 333,2 mg (0,79 mmól), az 1. példa D) pontjában leírtak szerint előállított triészter 3,95 ml (3,95 mmól, 5 egyenérték) 1 n nátrium-hidroxid-oldattal készült emulzióját nitrogéngáz alatt, 50 ”C-on, 16 óra hosszáig keverjük, majd lehűtjük. A sárga oldatot felvisszük egy 2,5 cm átmérőjű, 16 cm magas, HP-20 gél vizes szuszpenziójával töltött oszlopra, és 450 ml acetonitril, valamint 450 1 víz felhasználásával gradienselúciót végzünk. Hozzávetőlegesen 10 ml-es frakciókat szedünk kétperces időszakokban, és az így gyűjtött 24-28. frakciókból liofllizálással, illetőleg ezt követően éjszakán át nagy vákuumban történő szárítással 206,4 mg (60%) cím szerinti vegyületet kapunk. A termék vékonyrétegkromatográfiás Rf-értéke 0,30, ha a kromatogramot szilikagélen, butanol, tömény ammónium-hidroxid és víz 7:2:1 arányú elegyével fejlesztők ki. Infravörös színkép (KBr): 3427, 3282, 2966, 2924, 2854,1218,1172,1146,1102,1064,790,747 cm'1. 'H-NMR-spektrum (D20): 8 5,24 (m, 1H); 5,16 (m, 2H); 3,55 (d, 3H, Jhp-11 Hz); 2,20 (m, 2H); 2,0-2,2 (m, 10H); 1,67 (s, 3H); 1,65 (s, 3H); 1,60 (s, 6H) ppm. Tömegspektrum (FAB, +ionok): m/e 437 (M+H), 415 (M+2H-Na). 6. példa (E ,E)-{[Hidroxi-(5,9,13-trimetil-4,8,12-tetradekatrienil)-foszfinil]-metil}-foszfonsav trinátriumsója A) Biszhomofarnezil-bromid (1) (EJ3)-5,9,13-Trimetil-4,8,12-tetradekatriénsav--íerc-buíil-észíer 9,60 ml (68,5 mmól, 1,5 mólegyenérték) diizopropilamint 100 ml tetrahidrofuránban oldunk, és argongáz-atmoszférában -78 'C-on, 20 perc alatt hozzáadunk 28,2 ml (45,0 mmól, 1,0 mólegyenérték) 1,6 M hexános butil-lítium-oldatot. Az elegyet szobahőmérsékletre hagyjuk melegedni, majd 15 perc múlva visszahűtjük -78 'C-ra, és 20 perc alatt beadagolunk 6,05 ml (45 mmól, 1,0 mólegyenérték) terc-butil-acetátot. Újabb 15 perc elteltével előbb 16,0 ml (92 mmól, 2,05 mólegyenérték) hexametil-foszforsavamidot (HMPA), majd 20 perc alatt 12,53 g (45,0 mmól), az 1. példa A) pontjában leírtak szerint előállított famezil-bromidot, feloldva 100 ml tetrahidrofuránban, adunk az elegyhez, és -78 'C-on, 2,5 órán át keverjük. Ezután telített ammónium-klorid-oldattal a reakciót leállítjuk, szobahőmérsékletre hagyjuk melegedni az elegyet, 400 ml etil-acetáttal meghígítjuk és mossuk négyszer 100 ml vízzel, 200 ml sóoldattal, majd magnézium-szulfát felett szárítjuk és bepároljuk. A visszamaradó 12,% g sárga olaj a nyerstermék, amelyből flash-kromatográfiával, 1000 g szilikagélen, 1:9 arányú etil-acetát:petroléter eleggyel végezve az eluálást, 9,39 g (65%) cím szerinti terméket kapunk halványsárga olajként. Szilikagél-rétegen 2:98 arányú etil-acetáthexán eleggyel kromatografálva, Rp-0,16. Infravörös színkép (hígítatlan): 2977, 2925, 2857, 1733,1452,1368,1258,1149 cm1. ‘H-NMR-spektrum (CDC13): 8 5,10 (m, 3H); 2,25 (m, 4H); 1,9-2,1 (m, 8H); 1,68 (s, 3H); 1,62 (s, 3H); 1,59 (s, 6H); 1,44 (s, 9H) ppm. Tömegspektrum (kémiai ionizálás: CH<-N20, +ionok): m/e 265 (M+H-CA), 247, 183, 137, 68, 57; (-ionok): m/e 319 (M-H), 279,251,100. (2) Biszhomofarnezol A fenti észter 5,00 g-ját (15,6 mmól) 45 ml vízmentes dietil-éterben feloldjuk, és 0 'C-on, argongáz alatt, keverés közben hozzáadunk 592 mg (15,6 mmól, 1,0 mólegyenérték) lítium-(tetrahidrido-aluminát)-ot. A szuszpenziót szobahőmérsékleten 20 óra hosszat keverjük, majd lehűtjük 0 'C-ra és előbb 5 ml vizet, azután 5 ml 15%-os nátrium-hidroxid-oldatot, végül még 15 ml vizet adunk hozzá, és folytatjuk a keverést további fél órán át. Ezt követően nátrium-szulfátot adunk az elegyhez, a sűrű szuszpenziót celiten megszűrjük és a szűrőt dietil-éterrel alaposan átmossuk. A szűrletet bepárolva 3,62 g nyersterméket kapunk, amelyet flash-kromatográfiával 300 g szilikagélen, eluensként etil-acetát és petroléter 1:9 arányú elegyét használva, tisztítunk. Ilyen módon színtelen folyadék formájában 3,516 g (90%) biszhomofamezolt kapunk. Etil-acetát és hexán 2:8 arányú elegyével szilikagélen kromatografálva, 0,19 Rf értékénél jelentkezik a termék foltja. Infravörös színkép (hígítatlan): 3330, 2964, 2926, 2873,2858,1448,1384,1107,1059,401 cm1. ‘H-NMR-spektrum (CDClj): 8 5,10 (m, 3H); 3,63 (t, 2H, J-6,5 Hz); 1,9-2,2 (m, 10H); 1,68 (s, 3H); 1,62 (s, 3H); 1,60 (s, 6H) ppm. 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 10
