203894. lajstromszámú szabadalom • Eljárás foszforsavtartalmú szkvalén szintetáz inhibitorok és az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 203 894 B 2 alatt, 0,91 ml (6,90 mmól) (trimetil- szilil)-bromidot adunk, aminek következtében megzavarosodik. 5 percen át 0 *C-on tartjuk az elegyet, majd hagyjuk szobahőmérsékletre melegedni, és folytatjuk a keverést 2 órán át. A kapott halványsáiga oldatot bepároljuk, a maradékot egy időre nagyvákuumba helyezzük, majd feloldjuk 6,9 ml 1 n kálium-hidroxi-oldat és 10 ml metanol elegyében. 10 perc múlva a metanolt és a víz egy részét elpárologtatjuk, és a vizes oldatot felvisszük egy 2,5 cm átmérőjű, 20 cm magas, vízben szuszpendált HP-20 géllel töltött oszlopra. Az oszlopot először vízzel eluáljuk, majd a 14. frakciótól kezdve fokozatosan acetonitrilt adva a vízhez, gradienselúciót folytatunk. 10-15 ml-es frakciókat szedve, a kívánt terméket a 21-33. frakciókban találjuk, amelyek pH-ja 11 és 7 között van, jelezvén, hogy a vegyület di- és trikáliumsőja jön le az oszlopról, anélkül, hogy szétválna. Ezeket a frakciókat összeőntjük, az acetonitrilt elpárologtatjuk, majd a vizes oldatot liofilizáljuk, aminek eredményeképpen 743 mg fehér, ragacsos port kapunk. A terméket vákuumban foszfor(V)-oxid felett tovább szárítva, a fehér liofilizátum tömege 664,7 mg (81%) lesz. Az így kapott cím szerinti vegyület 1 tömeg%-os oldatának pH-ja 8,65. A vegyület higroszkőpos, és változó mennyiségű vízzel különböző molekulavegyületeket képez. Egy tömegállandóságig szárított minta analízise azt mutatja, hogy a termék di- és trikáliumsó 1,5:1 arányú elegye. Cellulózrétegen, butanol, tömény ammónium-hidroxid és víz 7:2:1 arányú elegyével kromatografálva, Rf-0,54. Infravörös színkép (KBr): 3400, 2968, 2924, 1641, 1449, 1383, 1236, 1174, 1154, 1127, 1109, 1079, 969, 886,792,517 cm'1. 'H-NMR-spektrum (D2O): 8 7,04 (td, 1H, Jt—11 Hz); 5,97 (d, 1H, J-ll Hz); 5,95 (dd, 1H, J-22,18 Hz); 5,11 (m, 2H); 2,11 (s, 4H); 1,9-2,1 (m, 6H); 1,81 (s, 3H); 1,63 (s, 3H); 1,57 (s, 3H); 1,56 (s, 3H) ppm. 3‘P-NMR-spektrum (D20): 8 25,6 (d, J-5 Hz); 12,4 (d, J-5 Hz) ppm. Tömegspektrum (FAB, +ionok): m/e 529 (M+4K- 3H), 491 (M+3K-2H), 453 (M+2K-H). M-376 (a trisav relatív molekulatömege). 4. példa (EJEJZ)-{Difluor-[hidroxi-(4,8,12-trimetil-lj,7,ll-tridekatetraenil)-foszfinil]-metil}-foszfonsav trikáliumsója A) {Difluor-[(4,8,12-trimetil-l,3,7,U-tridekatetraenil)-metoxi- foszfinil]-metil}-foszfonsav-dietil-észter 1,09 g (3,48 mmól), a 3. példa C) pontjában leírtak szerint előállított foszfonsavat feloldunk 6 ml metiléndikloridban, és keverés közben, aigongáz alatt, 1,3 ml (7 mmól) dietil-(trimetil-szilil)-amint adunk hozzá. Az elegyet 2 órán át szobahőmérsékleten keveredem hagyjuk, bepároljuk, majd benzolban feloldjuk, ismét bepároljuk és nagyvákuumban megszívatjuk. A maradékot feloldjuk 8 ml metilén-dikloridban, hozzáadunk 2 csepp NJJ-dimetil-formamidot, majd 0 *C-on, 10 perc alatt beadagolunk 0,5 ml (5,73 mmól) oxalil-dikloridot Az elegyet ezután 0 *C-on, 75 percig, majd szobahőmérsékleten 45 percen át keverjük, bepároljuk, a maradékról benzolt desztillálunk le, majd nagyvákuumban megszívatjuk. A kapott termék sötét olaj, amelyben kevés szilárd anyag van szuszpendálva. 0,59 ml (4,18 mmól) frissen desztillált diizopropilamin és 7 ml tetrahidrofurán elegyéhez -78 *C-on, argongáz alatt becsepegtetünk 2,4 ml (3,83 mmól) 1,6 M hexános butil-lítium-oldatot. A reakcióelegyet hagyjuk 0 ‘C-ra melegedni, majd 15 perc múlva ismét lehűtjük -78 ‘C-ra, és 10 perc alatt hozzáadjuk 691 mg (3,67 mmól), a 2. példa A) pontjában leírtak szerint előállított dietil-[(difluor-metil)-foszfonát] 4 ml tetrahidrofurános oldatát. A kapott halványsáiga oldatot 30 percig -78 ‘C-on hagyjuk keveredni, és ezt követőén 10 perc alatt beadagoljuk a fenti savkloridot, amelyet előzőleg 4 ml tetrahidrofuránban oldunk. A sötét oldatot 1,5 óra hosszat -78 *C-on tartjuk, majd 15 órán át mélyhűtőben, -85 *C-on tároljuk. Ezután 4 ml dietiléterben 0,3 ml ecetsavat adunk a reakcióelegyhez, szobahőmérsékletre hagyjuk melegedni, és dietil- éter, valamint 10%-os sósav keverékével öszerázzuk, majd az éteres fázist vízzel és telített nátrium-hidrogén-karbonát- oldattal mossuk. Az egyesített vizes oldatokat kétszer extraháljuk metilén-dikloriddal, az extraktumokat magnézium-szulfáton szárítjuk és bepároljuk, aminek eredményeképpen 1,62 g narancsvörös olajat kapunk. A nyersterméket kétszer egymás után flash-kromatografáljuk szilikagélen, eluensként először etil-acetát és petroléter 45:55 arányú elegyét, majd a második alkalommal tetrahidrofurán és toluol 10:90 arányú elegyét alkalmazva. Ilyen módon 511,1 mg (30%) halványsárga olajat kapunk, amely az ‘H-NMR-spektrum tanúsága szerint 5% szennyezőanyagot tartalmaz. A spektrometriás adatok valószínűsítik, hogy az idegen anyag (4,8,12-trimetil-l,3,7,ll-tridekatetraenil)foszfonsav-etil-metil-észter. A szilikagélen, tetrahidrofurán és toluol 35:65 arányú elegyével kifejlesztett vékonyréteg-kromatogramon a címben megnevezett vegyület Rrértéke 0,39, a szennyező anyagé 0,31. ‘H-NMR-spektrum (CDC13): 8 7,56 (ddd, 1H, J-20, 17, 11 Hz); 6,06 (d, 1H, J-ll Hz); 5,72 (dd, 1H, J-25, 17 Hz); 4,35 (m, 4H); 3,93 (d, 3H, J-10 Hz); 1,9-2,3 (m, 8H); 1,92 (s, 3H); 1,68 (s, 3H); 1,60 (s, 6H) ppm. Tömegspektrum (kémiai ionizálás: CH*, +ionok): m/e 483 (M+H, a cím szerinti vegyület), 341 (M+H, a szennyező anyag). B) (EJ5J£)-{Difluor-[hidroxi-(4,8,12-trimetil-1J ,7,11 -tridekatetraenil)-foszfinil] metil}--foszfonsav trikáliumsója 434,7 mg (0,901 mmól), az A) pontban közöltek szerint kapott vegyületet feloldunk benzolban, bepároljuk, majd ismét oldjuk 6 ml 0 *C-os metilén-dikloridban. Az oldathoz cseppenként, 5 perc alatt, 0/24 ml (1,82 mmól) 2,4,6-kollidint és 0,50 ml (3,81 mmól) (trimetil-szilil)-jodidot adunk. 2,5 óra hosszat 0 *C-on hagyjuk az elegyet keveredni, majd bepároljuk és a maradékot nagy vákuumban szívatjuk. Ezután 3,2 ml 1 n vizes kálium-hidroxid-oldatot adunk a maradékhoz 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 9
