203734. lajstromszámú szabadalom • Eljárás bisz(hidroxi-metil)-ciklobutil-purinok és pirimidinek, valamint az ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 203 734 B 2 juk, aminek eredményeként 1,02 g, még mindig nem eléggé tiszta, úgynevezett harmadik generációs terméket kapunk. A második generációs kristályok anyalúgját a fentivel azonos módon, vagyis 300 nil Merck-féle szilikagél-60 adszorbensen, 2% etil-acetátot tartalmazó toluollal eluálva kromatografáljuk, aminek eredményeképpen további 187 mg szennyezett terméket, úgynevezett negyedik generációs terméket kapunk. A harmadik és negyedik generációs terméket egyesítjük és hexán-etil-acetát elegyből átkristályosítjuk, amikor is 770 mg tiszta terméket különíthetünk el. Ilyen módon a kívánt vegyület együttes tömege 2,95 g. H) (lu,2$,3a)-3-[2-(amino-6-(benziI-oxi)-iH- purin-9-il]-l,2-ciídobuián-dimetil-(l,2-dibenzoát) 1,072 g (2,17 mmól) ((lo,2ß,3ß)-[3-(tozü-oxi)-l,2- ciklobután-dimetílj-dibenzoát, 20 ml NJí-dimetüformamid, 784 mg (3,25 mmól) 2-amino-6-(benzüoxi)-9H-purin, 573 mg (2,17 mmól) 18-korona-6-éter és 600 mg (4,34 mmól) kálium-karbonát elegyét 110 'C-on nitrogéngáz alatt keverjük 24 órán át. Az oldószert ezután vákuumban lepároljuk, és a maradékot egy 2,5x20 cm-es, Merck-féle szüikagél-60 adszorbenssel töltött oszlopon kromatografáljuk, etü-acetát és hexán 3:1 arányú elegyével végezve az eluálást. Az így kapott tiszta tennék tömege 400 mg. Azokat a frakciókat, amelyek tartalmazzák ugyan a kívánt terméket, de nem tiszta állapotban, egyesítjük és ismételten kromatografáljuk Merck-féle szilikagél-60 adszorbensen. Ez alkalommal az oszlop mérete 1,5x30 cm, és az eluens etü-acetát-hexán 2:1. A kapott tiszta termék tömege 52 mg, tehát az összesített hozam 452 mg. I) (la,2$,3a)-3-[2-Amino-6-(benzil-oxi)-9H- purin-9-il]-l,2-cildobután-dimetanol 452 mg (0,803 mmól) (la,2ß,3a)-[3-(2-amino-6- (benzil-oxi)-9H-purin-9-üj-1,2-ciklobután-dimetüj(1,2-dibenzoát) 12 ml vízmentes metanollal készült oldatához 109 jxl (0,482 mmól) 25%-os metanolos nátrium-metanolát-oldatot adunk, és az elegyet 40 'C-on nitrogén-gáz atmoszférában keverjük 1 óra hosszat. Ezután az oldószert vákuumban lepároljuk, a maradékhoz 10ml vizet adunk, és az így kapott oldat pH-ját 1 n sósavval 7-re állítjuk, majd vákuumban ismételten bepároljuk. A maradékot 2x20 ml dietü-éterrel eldörzsölve 358 mg nyersterméket kapunk, amelyet tisztítás nélkül használunk fel a következő lépésben. J) (la,2$,3a)-9-[2,3-Bisz(hidroxi-metil)-cikIo - butilj-guanin 358 mg (1,0 mmól) (la,2ß,3a)--3-[2-amino-6- (benzil-oxi)-9H-purin-9-ü]-l ,2-ciklobután-dimetan ol 5 ml metanollal készült szuszpenziőjához 2,5 ml 3 n sósavat adunk. A reakcióelegyet 4 óra hosszat 45 'C- on keverjük, majd vákuumban bepároljuk, és a maradékot feloldjuk 20 ml vízben. Az oldat pH-ját 1 n kálium-hidroxid-oldattal 7-re állítjuk, és pontosan mért 10%-át vákuumban bepároljuk. A maradékot előbb háromszor egymás után 4-4 ml metanollal, majd kétszer 4 ml etil-acetáttal szárazra pároljuk, végül melegen feloldjuk 4 ml vízben, és felvisszük egy 1,1x20 cmes CHP-20P gyantával (Mitsubishi Chemical Industries Ltd., 75-150 pm) töltött oszlopra, amelyet vízzel, 2% acetonitrilt tartalmazó vízzel, majd 4%-os acetonitril-víz eleggyel eluálunk. Ilyen módon a kívánt termék 11 mg-ját kapjuk tiszta állapotban. 5 A fenti oldat többi 90%-át szintén bepároljuk vákuumban, a maradékról előbb háromszor 20-20 ml metanolt, majd kétszer 20-20 ml etü-acetátot desztillálunk le, végül 30 ml vízben melegítve feloldjuk és egy 2,5x15 cm-es, CHP-20P gyantával töltött oszlopra 10 visszük. Vízzel, 2% acetonitrilt tartalmazó vízzel, 4% acetonitrilt tartalmazó vízzel, majd 10% acetonitrilt tartalmazó vízzel eluálva az oszlopot, további 111 mg (lot,2ß,3a)- 9-[2,3-bisz(hidroxi-metü)-ciklobutü]-guanint kapunk, amelynek olvadáspontja200 ’C-nálma- 15 gasabb. A termék elementáranalzise C^H^NjOj . 1,43 H20 összetételnek felel meg. számított: C:45,40,H:6,18,N: 24,08,H20:8,83%, talált: C: 45,66, H: 5,95, N: 23,82, H20:8,83%. 20 2. példa (la,2$,3a)- 3-(6-Amino-9H-purín-9-il)-l,2-ciklobután-dimetanol A) (7 a, 2ß, 3a)-[3-(6-Amino-9H-purin-9-il)- 25 1,2-ciklobittán-dimetil]-( 1,2-dibenzoát) 988 mg (2,0 mmól) (la,2ß,3ß)-[3-(tozü-oxi)-l,2- ciklobután-dimetüj-dibenzoát, 20 ml vízmentes NJ4- dimetü-formamid, 405 mg (3,0 mmól) adenin, 538 mg (2,0 mmól) 18-korona-6-éter és 276 mg (2,0 mmól) 30 kálium-karbonát elegyét nitrogéngáz alatt, 110 ‘C-on hagyjuk reagálni 16 órán át. Az oldószert vákuumban ledesztilláljuk, és a maradékot 400 ml szilikagél-60 (Merck) adszorbensen, oszlopkromatográfiás eljárással tisztítjuk. Az eluálást 0,1,0,5,5 és 10% metanolt 35 tartalmazó metanol-etil-acetát eleggyel végezzük, aminek eredményeképpen 522 mg, még nem eléggé tiszta terméket kapunk. A további tisztítást ugyancsak oszlopkromatográfiás eljárással végezzük, 400 ml szilikagél-60 (Merck) adszorbensen, azonban az eluáló- 40 szer metilén-diklorid és metanol 20:1 arányú elegye. Az így kapott tiszta (la,2ß,3a)-[3-(6-amino-9H-purin-9-il)-l,2-ciklobután-dimetü]-(l,2-dibenzoát) tömege 400 mg. B) (la,2ß,3a)-3-(6-Anúno-9H-purin-9-il)-l,2- 45 ciklobntán-dimeonnaJ 400 mg (0,899 mmól) (la,2ß,3a)-[3-amino-9H-purin-9-ü)-l,2-ciklobután-dimetil]-(l,2-dibenzoát)-ot feloldunk 20 ml vízmentes metanolban, és hozzáadunk 123 pl (0,539 mmól) 25%-os metanolos nátri- 50 um-metanolát-oldatot. Az elegyet 40 *C-on keverjük 45 percig, majd az oldószert vákuumban elpárologtatjuk. A maradékot 20 ml vízben feliszapoljuk, 1 n sósavval 7,0-re állítjuk a pH-ját, és újból bepároljuk. A párlási maradékot oszlopkromatográfiás eljárással 55 CHP-20P gyantán tisztítjuk meg. Az oszlopot előbb vízzel eluáljuk, majd víz-metanol eleggyel grádienseluciót végzünk, melynek során a metanol koncentrációját 0-tól 20%-ig növeljük, végül 20, illetve 30% metanolt tartalmazó víz-metanol eleggyel folytatjuk az elu- 60 álást. Az így kapott 128 mg (lou2ß,3a)-3-(6-amino» * 8
