203580. lajstromszámú szabadalom • Eljárás a GE 2270 antibiotikum A faktor és ezt tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
HU 203580B J lünk. Ez a kromatográfiás eljárás alkalmazható olyan koncentrált extraktumok esetében is, amelyeket a fermentléből állítottunk elő (tehát nemcsak a fermentlé esetében). A leírásban használt értelemben a „vízzel nem elegyedő oldószer” kifejezéssel—a szakterületen e kifejezés elfogadott jelentésével összhangban — olyan oldószereket kívánunk jelölni, amelyek az alkalmazás körülményei között vízzel ésszerűen tág koncentráció-tartományban kevéssé vagy egyáltalán nem elegyednek. A találmány szerinti antibiotikumnak a micélium-tömegből való extrakciójához használható vízzel elegyedő szerves oldószerrel, majd a betöményített extraktumokból való kicsapással — célszerűen egy kicsapószer hozzáadásával — vagy a vizes maradék további extrakciója egy vízzel nem elegyedő oldószerrel. Egy másik megoldás szerint a fermentlevet egy adszorpciós mátrixszal hozzuk érintkezésbe, majd egy poláris eluciós eleggyel eluálunk. Ez a kromatográfiás eljárás alkalmazható olyan koncentrált extraktumok esetében is, amelyeket a fermentléből állítottunk elő (tehát nemcsak a fertmentlé esetében). A leírásban használt értelemben a „vízzel nem elegyedő oldószer” kifejezéssel—a szakterületen e kifejezés elfogadott jelentésével összhangban — olyan oldószereket kívánunk jelölni, amelyek az alkalmazás körülményei között vízzel ésszerűen tág koncentráció-tartományban kevéssé vagy egyáltalán nem elegyednek. A találmány szerinti antibiotikumnak a micélium-tömegből való extrakciójához használható vízzel elegyedő szerves oldószerek például a következők lehetnek:- rövidszénláncú alkanolok, pl. 1-3 szénatomos alkanolok, mint metanol, etanol és propanol;- fenil-(l-3 szénatomos)-alkanolok, pl. benzilalkohol;- rövidszénláncú ketonok, pl. 3-4 szénatomos ketonok, így aceton és etil-metil-keton;- gyűrűs éterek, pl. dioxán és tetrahidrofurán;- glikolok és részleges észterezésük termékei, így etilén-glikol, propilén-glikol és etilén-glikol-monometü-éter;- rövidszénláncú amidok, így dimetil-formamid és dietil-formamid. Az antibiotikumnak a fermentléből való kivonásához használható vízzel nem elegyedő szerves oldószerekre példák a következők:- a szokásos szénhidrogén oldószerek, amelyek egyenes vagy elágazó láncúak vagy gyűrűs vegyületek lehetnek, mint a hexán vagy a ciklohexán;- halogénezett szénhidrogének, pl. a kloroform, széntetraklorid, diklór-etán, fluor-bróm-etán, dibróm-etán, triklór-propán, klór-trifluor-oktán stb.;- aromás szénhidrogének, mint benzol, toluol, xilolstb.;- legalább 4 szénatomos észterek, így etil-acetát, propil-acetát, etü-butirát stb.;- legalább 4 szénatomos alkanolok, amelyek egyenes, elágazó láncúak vagy gyűrűs vegyületek lehetnek, mint a butanol, 1-pentanol, 2-pentanol, 3- pentanol, 1-hexanol, 2-hexanol, 3-hexanol, 3,3-dimetü-1-butanol, 4-metü-l-pentanol, 3-metil-l-7 pentanol, 2,2-dimetil-3-pentanol, 2,4-dimetil-3- pentanol, 4,4-dimetil-2-pentanol, 5-metil-2-hexanol, 1-heptanol, 2-heptanol, 5-metil-1-hexanol, 2- etil-1-hexanol, 2-metil-3-hexanol, 1-oktanol, 2-oktanol, ciklopentanol, 2-ciklopentil-etanol, 3-ciklopentil-1-propanol, ciklohexanol, cikloheptanol, ciklooktanol, 2,3-dimetil-ciklohexanol, 4-etil-ciklohexanol, ciklooktil-metanol, 6-metil-5-heptén-2- ol, 1-nonanol, 2-nonanol, 1-dekanol, 2-dekanol és 3-dekanol; - egyenes vagy elágazó alkil-éterek vagy ezek keverékei, így petroléter, dietil-éter, dipropil-éter, dibutil-éter, stb. és az előbbiek elegyei vagy funkciós származékai. Mint ez a szakember számára ismert, a fázisok szétválasztása sózással javítható. Ha egy extrakciót követően rendelkezésűnkre áll egy vizes fázis, amely jelentős mennyiségű szerves oldószert tartalmaz, előnyösen úgy járhatunk el, hogy a vizet ebből azeotróp desztillációval távolítjuk el. Ehhez általában olyan oldószer hozzáadására van szükség, amely képes vízzel minimális azeotróp elegy képzésére. Ezt követően egy kicsapószert adagolunk a keresett termék kicsapására, ha ez szükségesnek látszik. Jellegzetes példák az olyan szerves oldószerekre, amelyek képesek vízzel minimális azeotróp elegy képzésére, a következők: n-butanol, benzol, toluol, dibutil-éter, széntetraklorid, kloroform, ciklohexán, 2,5-dimetil-furán, hexán és m-xilol. Kitüntetett oldószer a n-butanol. Példák a kicsapószerekre: petroléter, rövidszénláncú alkil-éterek, így dietil-éter, dipropil-éter és dibutil-éter, és rövidszénláncú alkil-ketonok, így aceton. Példák az olyan kromatográfiás rendszerekre, amelyek előnyösen alkalmazhatók a találmány szerinti antibiotikum kinyerésére:- polisztirol vagy vegyes polisztirol-divinil-benzol gyanták, így Amberlite XAD2 vagy XAD4 (Rohm és Haas), SÍ 12 (Dow Chemical Co.) és Diaion HP 20 (Mitsubishi);- akril-gyanták, így XAD7 vagy XDA8 (Rohm és Haas);- poliamidok, így polikaprolaktámok, nylonok és keresztkötéses polivinil-pirrolidonok, amelyek dórus-térfogata (ml/g) általában 1-5, felülete (m7g) 1-100, látszólagos sűrűsége (g/ml) 0,15-0,50, átlagos pórus-átmérője (A) 100-3000 és részecskenagyság-eloszlása olyan, hogy a részecskenagyság legalább 40%-ban 300 pm-nél alacsonyabb; ilyen Polyamide-CC 6, Polyamide-SC 6, Polyamide-CC 6.6, Polyamide-CC 6AC és Polyamide-SC 6AC (Macherey-Nagel and Co., NSZK); a PVP-CL polivinil-pirrolidon gyanta) Aldrich Chemie GmbH and Co., KG, NSZK), a PA400 poliamid gyanta (M. Woelm AG, NSZK) és-ászén. A polisztirol vagy az akril gyanták esetében kitüntetett eluálószer az előbbiekben említett vízzel elegyedő oldószerek poláris oldószer elegye. Poliamid gyanta esetében az eluálószer előnyösen egy vízzel elegyedő oldószer (pl. az előbbiekben említettek egyike) vizes elegye, míg szén esetében egy rövidszénláncú keton, pl. az aceton vagy egy rövidszénláncú alkohol, pl. a metanol a kitüntetett oldó8 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 5
