203475. lajstromszámú szabadalom • Eljárás apoplexia cerebri kezelésére alkalmas, tetrahidronaftalin-, benzindol- illetve pirimidin-származék szerotonin agonista hatóanyagot tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
1 HU 203 475 B 2 A találmány tárgya eljárás Apoplexia cerebri kezelésére alkalmas gyógyszerkészítmények előállítására egyes szerotonin-agonista hatású anyagokból, amelyek az 5HT1A-receptorokhoz 10 000 nmól/l-nél kisebb kötési erővel kötődnek. Az apoplexia cerebri (gutaütés, szélhüdés) az emberi agy hirtelen vérellátási zavarának következménye az agy működési kiesésekkel, neurológiai és/vagy pszichikai tünetekkel jár. Az Apoplexia cerebri oka agyvérzés (például magas vérnyomás, arterioszklerózis, apoplexiás aneurizma okozta véredényrepedésből) vagy ischémia (pl. drámai vérnyomás-csökkenés, embólia következtében) lehet. Az agy működési kiesései az agysejtek degenerálódásához és/vagy elhalásához vezetnek [Journal of Cerebral Blood Flow and Metabolism 1:155-185 (1981)]. Azt találtuk, hogy szerotonin-agonista hatású hatóanyagok, amelyek az 5HT1A-receptorokhoz 10 000 nmól/l-nél kisebb kötési erővel kötődnek, az apoplexia cerebri kezekére alkalmas gyógyszerkészítmények hatóanyagaként alkalmazhatók. A találmány szerint alkalmazható hatóanyagok meglepő módon mind megelőző, mind terápiás (az Apoplexia cerebri után végzett) kezelés esetén az agysejtek degenerálódását és/vagy elhalását erősen csökkentik, az agy működési zavarait kiküszöbölik vagy legalábbis csökkentik. A szerotonin-agonista hatású hatóanyagok a forszkolinnal kiváltott adenilát-cikláz aktivitásának (ECjq) a vizsgálni kívánt vegyület által előidézett gátlásának meghatározása útján azonosíthatók [J. Pharmacol. Exp. Then 238, 248-253 (1986)]. Agonista, illetve részben agonista hatású 5HTJA-ligandum a forszkolinnal kiváltott adenilát-ciklázt gátolja. Az enzimaktivitást csökkentő hatóanyagoknak szerotonin-agonista, illetve részben szerotonin-agonista hatása van. Az említett adenilát-cikláz gátlásán alapuló tesztet például az alábbiak szerint végezhetjük. Patkány hippocampus membránokat alkalmas körülmények között a-32P-ATP-vel és forszkolinnal a találmány szerint alkalmazható vegyületek jelenlétében, illetve távollétében inkubálunk. A reakció félbeszakítása után a radiokaktívan jelölt cikloAMP-t elkülönítjük, mennyiségét meghatározzuk. Ebből az enzimaktivitást kiszámíthatjuk. A kötési erő (gátlás állandó, ill. Kj-érték) a hatóanyag és az 5HT1A-szerotonin-receptorok közötti kölcsönhatás mérőszáma [Molecular Pharmacology 16, 687-699. (1979); J. Neurochem. 36,220-226. (1981)]. A kötési erő például az alábbiak szerint határozható meg. Borjú hippocampus membránokat 3H-szerotoninnal együtt a találmány szerint alkalmazható vegyületek jelen- vagy távollétében inkubálunk. A reakciót szűréssel félbeszakítjuk, a szűrőn maradt radioaktivitást mérjük. A kapott kiszorítási görbékből az IC50-értékeket, illetve a gátlás-állandót kiszámítjuk. A találmány értelmében szerotonin-agonista anyagként az alábbi, ismert módon előállított vegyületeket alkalmazzuk: (1) 2-(N,N-dipropilamino)-8-hidroxi-l,2,3,4-tetrahidronaftalin (8-OH-DPAT); (2) 4-(N,N-dipropilamino)-6-metoxi-l,3,4,5-tetrahidrobenz[c,d]indol-hidroklorid (Bay R 1531); (3) 8-{4-N-[4-(2-pirimidinil)-l-piperazinil]-butil}-8- -aza-spiro[4,2]dekán-7,9-dion-hidroklorid (buspiron); (4) 4,4-dimetil-l - (4-[4-(2-pirimidinil)-1 -piperazinil]-butil}- 2,6-piperidindion-hidroklorid (gepiron); (5) 2- {4-[4-(2-pirimidinil)-1 -piperazinil]-butil}-1,2- -benzizotiazol-3-2H-on-l,l-dioxid-hidroklorid (ipsapiron). Ezek a vegyületek mind anxiolitikus hatásúak, és előállításuk az alábbi irodalmi helyekből ismertek: 8-OH-DPAT: L. E. Arvidsen és munkatársai, J. Med. Chem. 24 921(1981), Bay R 1531 3 346 573 sz. NSZK-beli szab. leírás, buspiron 2 057 845 sz. NSZK-beli szab. leírás, gepiron 3 248 160 sz. NSZK-beli szab. leírás, ipsapiron 3 321 969 sz. NSZK-beli szab. leírás. A találmány tárgya tehát eljárás egy vagy több fenti szerotonin-agonista hatóanyagot tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására. A találmány értelmében 0,01-20 t%, előnyösen 0,1-10 t% ismert módon előállított hatóanyagot a gyógyszeriparban szokásos hordozó- és egyéb segédanyagokkal összekeverve apoplexia cerebri elleni gyógyszerkészítménnyé alakítunk. Az „ismert módon előállított” kifejezés a technika állása szerint előállítottat jelent. A fenti vegyületek szerotonin-agonista hatásából az apoplexia cerebri elleni hatás nem volt levezethető. Közvetlen összefüggésről például akkor lehetne szó, ha ischémia alatt vagy vele közvetlen időbeli összefüggésben a szerotonin hiányát vagy csökkent átalakulását lehetne kimutatni, de nem lehet, ellenkezőleg. így patkányagyban hipoxiás fázis alatt a szerotonin-átalakulás emelkedését tapasztalták (Broderick és Gibson, 1989). Ezzel szemben az Artéria cerebri media állandó okkluziójának modelljén patkányon a szerotonin-szintézis lassulását figyelték meg azonos szintű szerotoninfelszabadítás mellett (Okada és munkatársai, 1985). Ezek a változások azonban nemcsak az ischémiás területekre korlátozódtak, hanem ép vérellátású területekre is kiterjedtek. Másrészt reverzibilis ischémia primer fázisában a szerotonin-átalakulás emelkedett, míg az ezt követő időben csökkent (Cvejic és munkatársai, 1984). Bár a kép távolról sem egységes, a tanulmányok többsége arra enged következtetni, hogy ischémia közben a szerotonin-szintézis állandó felszabadítás mellett gátolt (Harik és munkatársai, 1986). Cerebrális véredény elzáródás akut fázisában tekintélyes mennyiségű szerotonin szabadul fel a vérlemezkékből (Costa és munkatársai, 1974). Az agyi érfalak megbetegedésekor egyebek között magasabb szerotonin-szintet is mutattak ki a cerebrospinális folyadékokban (Southern és Christoff, 1962). Közvetlen összefüggés akkor is fennállna, ha az endogén módon felszabadult szerotoninnak kétségtelenül volna védő funkciója. De nincsen tisztázva, hogy a szerotoninnak milyen szerepe van gutaütés esetén. Már 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 2
