203472. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hatóanyagként 2-/2-metil-4-klór-fenilimino/-imidazolidint tartalmazó akvaretikus hatású gyógyászati készítmények előállítására

1

HU 203 472 B

2

1. teszt

A (I) képlettf 2-(2-metil-4-klór-feniliniino)-imidazolidin endogén vazopresszin-gátló hatásának vizsgálata

Módszer Lipschitz W.L., et al., J. Pharmacol. Exp. 5 Ther., 79, (1943)

Módosítva: Kagawa C.M. és Kaim MJ.: Arch. Int. Pharmacodyn, 137,241 (1962) által.

A (I) képlett! 2-(2-metil-4-klór-fenilimino)-imidazolidinnek vizeletürítésre és a vizelet elektrolitjainak koncentrációjára gyakorolt hatását az alábbi táblázattal részletesen szemléltetjük:

Vizsgált

anyag

Dózis

mg/kg

p.o.

Volumen

mhkg'^ts'ő

h'1

Vizeletminta

L

Uozm

10'2 3 * * M*kg_1

H2O

Kontroll-10,39±0,85

(23)

43

581±39

(15)

2-(2-metil-0,01

10,00±0,25

(5)

40-4-klór-0,03

14,15±0,20

(5)

57-fenil-0,10

15,35+0,29

(5)

64-imino)-0,30

15,70±0,55a

(4)

63

480±7

(4)

imidazo-0,50

30,70±0,34d

(5)

123

352±10b

(5)

lidin

1,00

34,50±0,77d

(5)

138

340±10b

(5)

(bázis)

2,00

42,30±0,97d

(5)

169

327±14b

(5)

0)

4,00

49,25±0,98d

(5)

197

287±4C

(5)

8,00

52,00±0,47d

(5)

208

326±15c

(5)

16,00

53,05±0,22d

(4)

212

306±20c

(5)

2-(2,6-diklór-0,01

17,40±0,35a

(14)

70

383±33c

(14)

fenilimino)-0,03

20,60±0,43c

(15)

82

360±22d

(15)

imidazoli-0,10

27,25+0,46d

(15)

109

313±19d

(15)-din*HCl

0,30

36,25±0,46d

(15)

145

324±lld

(15)

(clonidin*

1,00

29,10±0,43d

(12)

116

316±16d

(12)

HC1)

3,00

30,35±0,64d

(10)

121

313±19d

(10)

Hidroklorotiazid

2,00

I8,34±0,llb

(10)

73-Csoportonként 3-5 Wistar SPF patkányt kezeltünk. A megadott értékek csoport-átlagértékek ± SEM L-Lipschitz érték [5 óra alatt ürített volumen/adagolt volumen* 100] a-pc0,05; b-pcO.Ol; c-p<0,005; d-=p<0,001 ts-testtömeg 40

2. teszt

A (I) képletű 2-(2-metil-4-klór-fenilimino)-imidazolidin exogén vazopresszin-gátló hatásának vizsgálata Módszer: 1. J. Physiol. 196,145 (1968) 45

2. Brit. J. Pharmacol. Chemother., 2, 189 (1947)

3. J. Cardiovasc. Pharmacol. 8, Suppl. 7, p.

S29 (1986)

Kísérleteinkhez 141±11 g tömegtí, nőstény Wistar 50

SPF patkányokat használtunk. Az állatok a kísérlet megkezdéséig szabadon fogyaszthattak ivóvizet, és LATI tápot. Hidrálásukat és altatásukat 12 v/v%-os etanollal végeztük a testtömeg 6%-át kitevő össztérfogattal, melyet két részletben 30 perces időközönként adagoltunk oráli- 55 san. Az alvó patkányok véna jugularis dextrájába két PE katétert (PP 50 Portex) vezettünk be az i.v. hidrálás és a vazopresszin adagolása céljából, továbbá szuprapubikusan katétereztük (PP 240 Portex) a húgyhólyagot. Min- s den sebet varrattal láttunk el, majd oldalfekvésben fütött 60

müpadon tartottuk az állatot. Az állat 38 *C-os testhőmérsékletét a rektálisan elhelyezett termisztor elem segítségével sikerült tartósan biztosítani.

Az i.v. hidrálást 1,5 v/v%-os etanollal (0,4%-os NaCl-oldatban oldva) folytattuk, melyet percenként 84*10'61 térfogatban adagoltunk. Amikor a vizeletürítés elérte a folyadékterhelésnek minimum 75%-át - ez általában 45±24 perc múlva következett be - megkezdtük a vazopresszin (Lysin VP; Sandoz, a továbbiakban csak LVP) i.v. adagolását 20-150* 10'6 1/min. térfogatban.

Mind a folyadékterhelés, mind pedig az LVP titrálása Braun pumpával (typ.: 1830) történt. Az ürített vizeletmintákat 4 percen keresztül közvetlenül az LVP adagolása előtt, illetve ezt követően a 3. perctől a 8. percig gyűjtöttük. E két mintát összevetve számítottuk ki az LVP által kiváltott %-os gátlást. 3-5 különböző LVP dózis adagolása után a dózis-hatásgörbe segítségével Schild módszere szerint meghatároztuk az agonista

4