203471. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hatóanyagként 6-acetil-7-[5-/4-acetil-3-hidroxi-2-propil-fenoxi/-pentiloxi]-3,4-dihidro-2H-1-benzopirán-2-karbonsavat vagy kis szénatomszámú alkil-észtereit, vagy sóit tartalmazó, gyulladásos bélbetegségek és a bélnyálkahártya leukotriének által k
1 HU 203 471 B 2 nyitott aránya. A mortalitást a tesztvegyülettel kezelt és hatóanyagmentes hordozóval kezelt csoportok esetében naponta kétszer határozzuk meg és a mindkét csoportban kapott túlélési görbék összehasonlításával értékeljük. Mindegyik csoportra kiszámítjuk a Kaplan-Meier módszerrel becsült túlélési görbét és a Mantel-Cox (logrank) teszt segítségével összehasonlítjuk a tesztvegyülettel kezelt (gyógyszerezett) csoport túlélési görbéjét a megfeleld hordozóval kezelt kontrollcsoport megfeleld görbéjével. Az »1,0 véletlen arány” azt jelenti, hogy a gyógyszeres kezelés nem ad jobb eredményt a hatóanyagmentes hordozóval végzett kezelésnél. Az 1,0 értéknél nagyobb „véletlen arány” (>1,0) azt jelenti, hogy a gyógyszeres kezelés a hatóanyagmentes hordozóval végzett kezeléshez viszonyítva meghosszabbítja a túlélési iddt A racém 6-acetil-7-[5-(4-acetil-3-hidroxi-2-propil-fenoxi)-pentiloxi]-3,4-dihidro-2H-1 -benzopirán-2- -karbonsav orálisan 10-100 mg/kg dózisban hatásosnak bizonyul. Ezzel szemben két ismert leukotrién-inhibitor - éspedig a 7-[3-(4-acetil-3-hidroxi-2-propil-fenoxi)-2-hidroxi-propoxi]-4-oxo-8-propil-4H-1 -benzopirán-2-karbonsav (1. összehasonlító vegyület) és a 7- -[3-(4-acetil-3-hidroxi-2-propil-fenoxi)-propoxi]-4- -oxo-8-propil-4H-l-benzopirán-2-propánsav (2. összehasonlító vegyület) 10 mg/kg orális dózisban hatástalan (lásd: 2. táblázat). A clindamicinnel kezelt állatok túlélésének meghosszabbításán kívül a racém 6-acetil-7-[5-(4-acetil-3-hidroxi-2-propil-fenoxi)-pentiloxi]-3,4-dihidro-2H-l-benzopirán-2-karbonsav visszaszorítja a hasmenést és jelentős mértékben javítja a vakbél és vastagbél hisztopatológiáját. Ezenkívül a clindamicinnel kezelt hörcsögök vakbelét kezdetben ödémák, extenzív vérzések és vértolulás, lekrózis, a nyálkahártya fokális eróziója, valamint a nyálkahártya fokozott behatolása a gyulladásos sejtekbe jellemzi. Hasonló, azonban kevésbé súlyos tüneteket észlelünk a vastagbélen is. A fenti tünetek 60 vagy 100 mg/kg fenti vegyület beadásakor a legtöbb esetben csökkennek vagy megszűnnek. 2. táblázat 5 Leukotrién-inhibitorok gyógyászati hatása antibiotikum által előidézett colitis ellen (in vivo) Véletlen 95% Tesztvegyület Dózis arány megbízn 10 (mg/kg) hatósági tartomány Racém 6-acetil-6-[5-(4-10* 2,87 2,00-4,13 20-acetil-3-hidroxi-2-propil-60* 4.77 3,05-7,45 20 15-fenoxi)-pentiloxi]-3,4-10b 3,80 2,64-5,46 25 -dihidro-2H-1 -benzopirán-60b 12,0 7,30-19,8 20-2-karbonsav 100b 64,2 22,5-183 20 1. összehasonlítóv egyfllet 10* 2,02c 1,43-2,85 20 10b 1,42 1,07-1,89 25 20 2. összehasonlítóv egyttlet 13b 1,68 1,25-2,27 25 a-intraperitoneális adagolás, 0,075 ml PEG-400-ban; b-orális adagolás, 0,15 ml vízben; é» c-p<0,05 kontra hordozó Mantel-Cox és globális Chi 25 négyzet tesztben; d-p<0,01 kontra hordozó Mantel-Cox és globális Chi négyzet tesztben; i; n-kezelt állatok szám A racém 6-acetil-7-[5-(4-acetil-3-hidroxi-2-propil- % 30 -fenoxi)-pentiloxi]-3,4-dihidro-2H-l-benzopirán-2- -karbonsav és e vegyület metil- és hexil-észtere hatását párhuzamosan végzett in vivo tesztekben értékeljük (a fent ismertetett, clindamicin által előidézett colitis vizsgálata hörcsögön). A tesztvegyületet orálisan ada- 35 góljuk 20 pmól tesztvegyület/kg állattestömeg dózisban. Az eredményeket a 3. táblázatban foglaljuk össze. Az észterek a megfeleld karbonsav 2,87 véletlen hányados értékéhez, valamint a 2. táblázatban megadott eredményéhez viszonyítva kedvezőbb hatást mutatnak. 3. táblázat Leukotrién-inhibitorok gyógyászati hatása antibiotikum által előidézett colitis ellen (in vivo) Tesztvegyület Dózis 20 (pmól/kg) Véletlen arány n Racém 6-acetil-7-[5-(4-acetil-3-hidroxi-2-propil-fenoxi)-pentiloxi]-3,4-dihidro-2H- l-benzopirán-2-karbonsav-metil-észter 20 3,42 'Jo Racém 6-acetil-7-[5-(4-acetil-3-hidroxi-2-propil-fenoxi)-pentiloxi]-3,4-dihidro-2H-1 -benzopirán-2-karbonsav-metil-észter 20 1,64 30 Racém 6-acetil-7-[5-(4-acetil-3-hidroxi-2-propil-fenoxi)-pentiloxi]-3,4-dihidro-2H-l-benzopirán-2-karbonsav 20 1,45 30 n-kezelt állatok száma C. Ecetsav által előidézett colitis patkányon in vivo Az ecetsav által előidézett colitis bioassayt patkányon J. E. Krawisz és mtársai módszerével: J. Proc. Gastro. Col. Rec. Surg. 31: 11-18 (1980) és P. Sharon és W. F. Stenson módszerével: Gastroenterology 88: 55-63 (1985) és 86:452-460 (1984) végezzük el. Az ecetsav által előidézett colitist az jellemzi, hogy a gyulladásos sejtek a vastagbélbe vándorolnak; a nyálkahártyába^ievő gyulladásos sejtek számát a fenti sejtek jelzóenzi^nek tekinthető mieloperoxidáz aktivitásával mérjük. ^yjozi-5
