203368. lajstromszámú szabadalom • Eljárás hisztidin vagy di-, illetve tripeptidek N-heterociklusos alkoholszármazékai és ezeket tartalmazó gyógyszerkészítmények előállítására
HU 203368B 22,68 kg nyomáson. A hidrogénabszorpció gyors és a hidrogéntartályt folyamatosan fel kell tölteni. A redukció egy éjszakán át tart és 20 óra után teljes. Az elegyet Celite-en szűrjük és csökkentett nyomáson besűrítjük, így 124,4 g cím szerinti savat kapunk színtelen üvegszerű szilárd maradék formájában; [a]D- -9,5" (c-1, metanol). Vékonyrétegkromatográfia: szüikagélen, toluol és ecetsav 4:1 arányú elegyével futtatva Rf- 0,62. b) (S)-a-{[(l,l-dimetil-etoxi)-karboníl]-amino}N-metoxi-N-metü-ciklohexánpropánamid 22,6 g (83,3 mülimól) a) lépés szerinti terméket argontakaró alatt 26 "C-on feloldunk 250 ml tetrahidrofuránban. 1 perc alatt részletekben hozzáadunk 16,0 g (98,7 mülimól) karbonil-diimidazolt. Az adagolás befejezése után röviddel enyhe gázfejlődés kezdődik. Az elegy mindvégig színtelen marad. Az elegyet 30 percig keverjük 25 °C-on, az alatt az idő alatt tiszta és színtelen marad. Ezután egyszerre hozzáadunk 11,5 g (118 millimól) 0,N-dimetil-hidroxü-amint, majd rögtön utána egyszerre 17.5 ml (125 millimól) trietil-amint. A trietil-amin hozzáadása után fehér csapadék képződik. Az elegyet 3 órát keverjük 25 'C-on, ezután 400 ml 1 n sósavoldatba öntjük és háromszor 200 ml éterrel extraháljuk. A színtelen extraktumokat egyesítjük, kétszer 200 ml telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfát fölött szárítjuk és besűrítjük, így 24,2 g cím szerinti terméket kapunk; [ű)d= -11,1° (c- 7, metanol). c) (S)-[l-(ciklohexil-metil)-2-oxo-2-(2-tiazolü)etü]-karbaminsav 1,1-dimetií-etilésztere 4,07 g (4,78 millimól) tiazol 80 ml tetrahidrofuránnal készített oldatához -60 'C-on argonatmoszférában hozzáadunk 19,5 ml (4,78 millimól) 2,6 M n-butil-lítium oldatot. A reakcióelegyet -60 °C-on keverjük 30 percig. -60 °C-on hozzácsöpögtetjük 7.5 g (2,4 millimól) b) lépés szerinti termék 15 ml tetrahidrofuránnal készített oldatát és a reakcióelegyet addig keverjük, amíg hőmérséklete el nem éri a -20 'C-ot (körülbelül 40 perc). A reakcióelegyet 40 ml telített ammónium-klorid oldattal megbontjuk és a terméket négyszer 200 ml éterrel extraháljuk. A szerves réteget konyhasóoldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfát fölött szárítjuk, szűrjük és besűrítjük, így 7,2 g nyersterméket kapunk. Ezt az anyagot 60 g-os Merck szilícium-dioxid párnán átszűrve tisztítjuk hexán:etil-acetát= 8:2 oldószerrendszer alkalmazásával. A szűrletet csökkentett nyomáson besűrítjük, így 6,0 g kristályos cím szerinti észtert kapunk, amelynek olvadáspontja 64-69 °C. Vékonyrétegkromatográfia: szilikagélen, hexán és etü-acetát 8:2 arányú elegyével futtatva Rf- 0,45. d) (lS,2R)-[l-(ciklohexü-metil)-2-hidroxi-2-(2- tiazolil)-etil]-karbaminsav 1,1 -dimetil-észtere 2,73 g (8,07 millimól) c) lépés szerinti terméket feloldunk 50 abszolút etanolban és az oldatot 5 'C- ra hűtjük. Részletekben hozzáadunk 0,6 g (16,14 millimól) nátrium-bór-hidridet és a reakcióelegyet 1 óra hosszat keverjük, 200 ml éterrel hígítjuk és pH-ját 1 n sósavoldattal 1-re beállítva megbontjuk. A szerves réteget elválasztjuk, kétszer mossuk vízzel és konyhasóoldattal, vízmentes magnéziumszulfát fölött szárítjuk és csökkentett nyomáson be31 sűrítjük. A két izomert 300 g Merck szilikagélen pülanatkromatográfiásan, etü-acetát és hexán 3:8 arányú elegyével eluálva elválasztjuk. A lassabban mozgó izomer az S,S-konfigurációjú és a gyorsabban mozgó izomer az lS,2R-konfigurációjú cím szerinti termék; [a]n= -30,72° (c- 0,55, metanol). Vékonyrétegkromatográfia: szilikagélen, etü-acetát és hexán 1:1 arányú elegyével futtatva Rf- 0,70. e) (aR,ßS)-ß-amino-a-(2-tiazolil)-ciklohexänpropanol-dihidroklorid 0,8 g (2,3 millimól) d) lépés szerinti terméket feloldunk 20 ml etil-acetátban és az oldaton sósavgázt buborékolta tunk át 10 percig, majd szobahőmérsékleten keverjük 4 órát. A reakcióelegyet besűrítjük, így a cím szerinti terméket kapjuk fehér szilárd anyagformájában. f) N-{N-[(1,1 -dimetil-etoxi)-karbonil]-L-fenüalanil}-r-(2,4-dinitro-fenil)-L-hisztidin 12,4 g (30,8 millimól) N-[N-/(l,l-dimetü-etoxi)karbonil/-L-fenil-alanil]-L-hisztidin 82 ml 1 M vizes nátrium-hidrogén-karbonát oldattal és 103 ml metanollal készített oldatához hozzáadunk 4,62 ml (36,74 millimól) 2,4-dinitro-fluor-benzolt. Az oldatot 2,5 órát keverjük, majd hozzáadunk további 0,6 ml (4,77 millimól) 2,4-dinitro-fluor-benzolt. A teljes 4 órás reakcióidő lejárta után az elegy pH-ját 51,3 ml 1 n vizes sósavoldattal 3,9-re állítjuk be, majd 500 ml vízzel hígítjuk. Az elkülönített szilárd anyagot szűrjük és vízzel mossuk. A kapott 16,6 g szilárd anyagot ezután forró etil-acetátból kristályosítjuk. Hozzáadunk 1,9 ml diciklohexü-amint, a kristályosított sót és szűrjük és a savat megsavanyítással felszabadítjuk, így 1,008 g cím szerinti terméket kapunk, amelynek olvadáspontja 180— 182 °C. [ű]d- +5,2 (c-1,4, ecetsav). g) (1 S,2R)-N-[ 1 -(ciklohexil-metil)-2-hidroxi-2- (2-tiazolil)-etil]-Na- {N-[(l,l-dimetü-etoxi)-karbonil]-L-fenil-alanil}-r-(2,4-dinitro-fenil)-L- hisztidinamid 0,53 g (1,5 millimól) e) lépés szerinti nyers dihidroklorid só termék, 0,85 g (1,5 millimól) N-{N-[( 1,1- dimetil-etoxi)-karbonil]-L-fenil-alanil}-r-(2,4-di nitro-fenil)-L-hisztidin és 0,2 g (1,5 millimól) 1- hidroxi-benztriazol-hidrát oldatához 0 'C-on argonatmoszférában hozzáadunk 0,23 ml (2,1 mülimól) N-metil-morfolint. Végül hozzáadunk 0,31 g (1,5 millimól) diciklohexil-karbodiimidet és a reakcióelegyet egy éjszakán át 0 °C-on tartjuk, 300 ml etilacetáttal hígítjuk és szűrjük. A szűrletet vízzel, telített nátrium-hidrogén-karbonát oldattal és konyhasóoldattal mossuk, vízmentes magnézium-szulfát fölött szárítjuk és csökkentett nyomáson besűrítjük, így 1,4 g nyersterméket kapunk. Ezt 200 g Merck szilikagélen kromatografálva és metanol és kloroform 5:100 arányú elegyével eluálva 0,8 g cím szerinti hisztidinamidot kapunk; [ct]D- -15,69' (c- 0,51, metanol). Vékonyrétegkromatográfia: szilikagélen, metanol és kloroform 5:85 arányú elegyével futtatva Rf= 0,25. h) (1 S,2R)-N-[ 1 -(ciklohexil-metil)-2-hidroxi-2- (2-tiazolil)-etil]-Na- {N-[(l,l-dimetil-etoxi)-karbonil]-L-fenil-alanil}-L-hisztidinamid 0,5 acetát sója 0,8 g (1,0 millimól) g) lépés szerinti terméket 2,8 ml tiolecetsav és 4 ml dimetil-formamid elegyé-32 5 10 15 20 25 30 35 40 45 50 55 60 65 17
